重庆市卫生局医学科研项目(2008-1-26)
- 作品数：6 被引量：35H指数：4
- 相关作者：吴小翎连海峰王璐璐彭阳张莉更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院滨州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- siRNA-NRP1对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨神经纤毛蛋白1(Neuropilin 1,NRP1)基因小干扰RNA(siRNA)质粒对裸鼠胃癌移植瘤生长的抑制作用。方法设计靶向人NRP1基因的siRNA序列,合成一对互补的寡核苷酸,退火后克隆至质粒pGenesil-1.1上,构建重组质粒siRNA-NRP1;将人胃癌细胞SGC7901注入裸鼠右臀部皮下,构建移植瘤模型,成瘤后将重组质粒siRNA-NRP1注入瘤内,观察裸鼠临床表现,并测定裸鼠移植瘤的体积及重量;病理切片观察肿瘤组织及血管生长情况;免疫组化方法观察裸鼠移植瘤中NRP1的表达及微血管密度。结果酶切分析及测序鉴定证实目的寡核苷酸片段已克隆至质粒pGenesil-1.1中;siRNA-NRP1组裸鼠移植瘤的体积及重量均小于对照组(P<0.01);病理切片显示siRNA-NRP1组肿瘤细胞坏死较对照组明显;免疫组化显示siRNA-NRP1组裸鼠移植瘤中NRP1的表达及微血管密度均低于对照组(P<0.01)。结论通过siRNA-NRP1抑制裸鼠胃癌移植瘤中NRP1的表达,可影响裸鼠移植瘤中血管的生成,最终抑制肿瘤的生长。
- 彭阳吴小翎连海峰陈鹏飞芦曦
- 关键词：裸鼠移植瘤
- 血管内皮生长因子受体3和神经纤毛蛋白2对胃癌SGC-7901细胞增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2012年
- 目的探讨分别阻断和联合阻断血管内皮生长因子受体3(Vascular endothelial growth factor receptor 3,VEGFR3)及神经纤毛蛋白2(Neuropilin 2,NRP2)基因的表达对人胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响。方法将SGC-7901细胞株分为3大组,VEGFR3阻断组、NRP2阻断组和VEGFR3+NRP2阻断组,各大组中又包含空白对照组、脂质体转染组、无义链转染组(NSODN组)和不同浓度反义链转染组(ASODN组)。转染后的各组SGC-7901细胞株经RT-PCR法检测VEGFR3-mRNA及NRP2-mRNA的转录水平。分别采用MTT法和流式细胞术检测细胞的增殖和凋亡情况。结果反义链转染组VEGFR3-mRNA和NRP2-mRNA的转录水平明显低于其各自的空白对照组、脂质体转染组和NSOND组,表明该组成功阻断基因VEGFR3和NRP2的表达。各组细胞的增殖和凋亡情况差异有统计学意义(P<0.05),并呈剂量和时间依赖性。在相同条件下,单独转染VEGFR3-ASODN组对胃癌细胞增殖的抑制及促凋亡作用优于单独转染NRP2-ASODN组,而联合转染组对细胞增殖的抑制及促凋亡作用最明显。结论阻断VEGFR3基因的表达对细胞增殖凋亡的影响大于阻断NRP2基因,联合阻断两个基因的表达,对细胞增殖和凋亡的影响明显大于单独阻断组。
- 王璐璐吴小翎刘波连海峰李本杰
- 关键词：血管内皮生长因子受体3胃癌细胞增殖
- 1,25-二羟维生素D_3对胃癌细胞增殖和TNF-α表达的影响被引量：11
- 2012年
- 目的研究1,25-二羟维生素D3[1,25(OH)2D3]对胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响,以及对细胞因子TNF-αmRNA及蛋白表达的影响。方法用不同浓度1,25(OH)2D3处理胃癌SGC-7901细胞,采用MTT法检测细胞增殖情况;流式细胞仪检测细胞生长周期;RT-PCR和Western blotting分别检测TNF-α在mRNA和蛋白水平的表达情况。结果 1,25(OH)2D3对胃癌SGC-7901细胞增殖有抑制作用(P<0.05),并呈时间剂量依赖性。经1,25(OH)2D3处理72 h后细胞周期出现向G0/G1期移行的动力学改变(F=9.81,P<0.05)。TNF-αmRNA及蛋白的表达水平均呈剂量依赖性减少(P<0.05)。结论 1,25(OH)2D3可抑制胃癌细胞增殖,且与其抑制TNF-α的表达可能有相关性。
- 张莉王璐璐吴小翎
- 关键词：1,25-二羟维生素D3细胞增殖细胞周期肿瘤坏死因子-Α
- RNA干扰NRP2基因表达对胃癌细胞SGC7901裸鼠移植瘤的抑制作用被引量：3
- 2010年
- 目的:探讨特异性抑制NRP2基因表达对人胃癌细胞SGC7901裸鼠移植瘤生长及淋巴管新生的影响。方法:采用小RNA干扰方法,构建shNRP2质粒,稳定转染入SGC7901细胞株,Westen blot检测转染前后NRP2蛋白的表达。建立人胃癌细胞SGC7901裸鼠移植瘤模型,随机分为shNRP2组(实验组)、shCon组(HK阴性对照组)和正常对照组,观察移植瘤的生长情况。6周后处死裸鼠,免疫组化检测NRP2蛋白的表达及微淋巴管密度(Micro-vessel density,MLD)。结果:成功构建shNRP2质粒,与另两组比较,shNRP2组细胞NRP2蛋白表达明显降低,且移植瘤组织生长、NRP2表达及MLD明显受抑制。结论:抑制NRP2基因的表达,可以抑制胃癌裸鼠移植瘤的生长及淋巴管的形成,NRP2基因有可能成为一个潜在的胃癌生物治疗靶点。
- 连海峰吴小翎彭阳
- 关键词：胃癌淋巴管生成
- 神经纤毛蛋白1基因RNA干扰质粒对胃腺癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响被引量：7
- 2010年
- 目的探讨神经纤毛蛋白1(Neuropilin1,NRP1)基因RNA干扰质粒对胃腺癌细胞SGC7901增殖和凋亡的影响。方法构建NRP1基因特异性shRNA表达质粒,经脂质体介导转染入人胃腺癌SGC7901细胞。采用Western blot法检测细胞中NRP1蛋白的表达水平,应用流式细胞术和Annexin-V-FITC/PI法检测细胞的增殖水平和凋亡率。结果经酶切及测序鉴定证明,shRNA-NRP1质粒构建正确,转染SGC7901细胞48h后,能有效抑制NRP1蛋白的表达,G0/G1期细胞百分比显著升高,S期细胞显著减少,细胞凋亡率增加。结论 shRNA-NRP1质粒能有效抑制胃腺癌SGC7901细胞株NRP1蛋白的表达,细胞周期阻滞在G0/G1期,从而降低细胞的增殖水平,诱导细胞进入凋亡期。
- 连海峰吴小翎
- 关键词：胃肿瘤RNA干扰
- 神经纤毛蛋白2干扰质粒对胃腺癌SGC7901细胞株生长、侵袭及转移的影响被引量：8
- 2010年
- 目的探讨神经纤毛蛋白2(Neuropilin2,NRP2)干扰质粒对胃腺癌SGC7901细胞株生长、侵袭及转移的影响。方法构建NRP2特异的小RNA干扰质粒shRNA-NRP2,采用脂质体介导的方法将质粒转染入人胃腺癌SGC7901细胞株,Western blot法检测NRP2蛋白的表达;Transwell试验检测胃癌细胞体外迁移和侵袭能力的变化;MTT试验检测胃癌细胞的增殖水平。结果 shRNA-NRP2转染SGC7901细胞后,NRP2蛋白表达明显下降,细胞的侵袭、迁移能力明显受抑制,而细胞的增殖水平无显著变化。结论 shRNA-NRP2干扰质粒可下调胃腺癌SGC7901细胞株NRP2蛋白的表达,进而抑制细胞的侵袭、转移能力,提示NRP2可能成为胃癌分子治疗的靶标。
- 连海峰吴小翎刘倩
- 关键词：胃肿瘤RNA干扰
