河北省自然科学基金(C2007000542)
- 作品数：4 被引量：7H指数：1
- 相关作者：郭巍张霞李国勋申建茹宋水山更多>>
- 相关机构：河北农业大学河北省生物研究所青岛农业大学更多>>
- 发文基金：河北省自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 甜菜夜蛾羧酸酯酶基因cDNA的克隆、表达及序列分析被引量：7
- 2008年
- 羧酸酯酶是昆虫体内重要的解毒酶系之一,与昆虫抗药性产生相关。利用粉纹夜蛾Trichoplusia ni(Hübner)肠粘蛋白多克隆抗体免疫筛选甜菜夜蛾Spodoptera exigua(Hübner)中肠cDNA表达文库,得到编码羧酸酯酶的全长cDNA克隆。该cDNA克隆全长1812bp(GenBank登录号EF580101),开放阅读框长1605bp,编码535个氨基酸。该蛋白活性中心包括3个氨基酸残基(催化三联体):Ser186,Glu319和His443,3个N-联糖基化位点,具备羧酸酯酶的结构特征,属羧酸酯酶家族(EC:3.1.1.-)。将该基因与pQE30载体重组,经IPTG诱导,spot-blot鉴定,蛋白获得了表达;以α-醋酸萘酯为底物,检测表达的羧酸酯酶活性为1.3nmol/100μL酶液。
- 张霞郭巍李国勋宋水山
- 关键词：甜菜夜蛾CDNA表达文库羧酸酯酶
- 一种从多克隆抗体库快速分离高特异性抗体的方法
- 2008年
- 为克服传统方法制备单克隆抗体复杂而费时的弊病,研究介绍了一种从多克隆抗体库中快速分离高特异性抗体的方法;根据抗原抗体特异性结合的原理,以大肠杆菌系统表达的甜菜夜蛾围食膜蛋白SeP89为抗原,从多克隆抗体库中分离其特异性抗体;成功从甜菜夜蛾围食膜蛋白抗血清库中分离SeP89蛋白的特异性抗体;以快速分离围食膜蛋白SeP89抗体为例,研究建立了一种快速从多克隆抗体库中分离特异性抗体的方法。
- 张霞李杰郭巍李国勋
- 关键词：抗体CDNA克隆抗血清WESTERNBLOT
- 苏云金杆菌vip1A/vip2A基因的鉴定及其与cry1基因的联系
- 2008年
- 利用PCR方法检测vip1A/vip2A基因在野生型Bt菌株中的分布,进行基因片段的克隆和序列分析。结合cry1基因的PCR-RFLP基因型鉴定体系,分析与vip1A/vip2A基因有联系的cry1类基因。结果表明,分离保存的171株野生型Bt菌株中,有20株菌株含有vip1A/vip2A基因,分布率为11.69%。成功克隆了菌株Bt16的vip1A/vip2A基因片段,命名为vip1A/vip2A-16,GenBank登录号为EU594327。cry1基因的PCR-RFLP鉴定结果表明,该20株菌株均含有cry1Fa基因,说明vip1A/vip2A基因与cry1Fa可能具有某种联系。
- 申建茹郭巍张霞李晶
- 关键词：PCR-RFLP
- 苏云金芽孢杆菌营养期杀虫蛋白Vips研究进展
- 2008年
- 苏云金芽孢杆菌Bt营养期杀虫蛋白Vips主要分为Vip1、Vip2和Vip33种。Vip1和Vip2构成二元毒素,对叶甲科昆虫具有特异杀虫活性。Vip3对鳞翅目昆虫具有广谱杀虫活性,该蛋白广泛存在于Bt中,与已知杀虫晶体蛋白ICPs没有序列相似性。Vip3通过诱发细胞凋亡,最终导致昆虫死亡,这与Btδ-内毒素的作用机理完全不同,Vips的发现对于Bt的进一步开发利用具有重要意义。本文主要对营养期杀虫蛋白Vips的分布、特性、作用机制及应用等进行报道。
- 申建茹郭巍
- 关键词：营养期杀虫蛋白
