北京市教委科技发展计划(KM200310028102) 作品数:6 被引量:12 H指数:2 相关作者: 张飞云 李晶晶 曾静 邓召花 张金方 更多>> 相关机构: 首都师范大学 东京农业大学 更多>> 发文基金: 北京市教委科技发展计划 国家自然科学基金 教育部科学技术研究重点项目 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
多花黑麦草斑驳病毒基因组克隆与序列分析 被引量:1 2006年 多花黑麦草斑驳病毒(Ryeg rass mottle virus,RGM oV)属南方菜豆花叶病毒属,是牧草病毒病的重要病原。利用反转录技术合成和扩增了RGM oV RNA的cDNA。将cDNA克隆在载体pUC18上,对RGM oV的基因组RNA作序列分析。RGM oV RNA是一个正义单链RNA分子,全长4 210个核苷酸,包含4个开放阅读框架5′非翻译区包含99个核苷酸,3′非翻译区有198个核苷酸。RGM oV ORF的结构和南方菜豆花叶病毒以及水稻黄斑病毒的结构一样。ORF1编码1个14.6 kD的蛋白质,这个蛋白质的功能还不清楚;ORF2的产物由947个氨基酸组成,分子量为103.6 kD;ORF3编码1个19.8 kD的蛋白质;ORF4编码1个25.6 kD的蛋白质,通过N末端氨基酸分析,确认ORF4为病毒外壳蛋白。RGM oV RNA的全序列以及染色体结构已被GenBank登录,登录号分别为AB040446和NC_003747。 张飞云 鸟山重光侵染万寿菊的黄瓜花叶病毒外壳蛋白基因的克隆与序列分析 被引量:4 2007年 应用ELISA的方法检测到感染了黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)的万寿菊。根据已报道的CMV外壳蛋白(CP)基因的保守序列设计并合成引物,提取万寿菊叶片总RNA为模板,进行cDNA合成和PCR扩增,得到约875bp的片断,与预期片断大小相符。序列分析显示:该分离物CMV-WSJ CP基因全长657bp,编码218个氨基酸,其核苷酸和氨基酸序列与CMV亚组Ⅱ的分离物有很高的同源率,分别达到98.33%~99.24%和98.63%~100%;与CMV亚组I分离物的同源率分别仅为74.43%~76.26%和77.17%~78.99%。因此,从万寿菊叶片上检测出的黄瓜花叶病毒分离物CMV-WSJ应归属于亚组Ⅱ。 李晶晶 邓召花 曾静 张金方 张飞云关键词:万寿菊 黄瓜花叶病毒 外壳蛋白 四种广普性植物病毒高效mPCR检测方法的建立 被引量:5 2007年 本研究建立了能同时检测出烟草花叶病毒(TMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、马铃薯X病毒(PVX)和马铃薯Y病毒(PVY)的多重RT-PCR体系。TMV、CMV、PVX、PVY是四种广普性植物病毒,寄主范围广泛,并且常常发生复合侵染。本研究以上述四种病毒的CP基因部分序列设计引物,以反转录的cDNA为模板,建立多重RT-PCR反应体系,分别扩增出211~417bp的不同长度的基因片断,并通过序列测定来确认扩增序列的特异性。将反转录合成的cDNA进行浓度稀释,来对多重RT-PCR与单重RT-PCR的灵敏度进行比较,结果证明,多重RT-PCR体系能够同时快速检测这四种病毒,并且有很高的灵敏度。 曾静 张飞云 李晶晶 于银霞 王法军关键词:多重RT-PCR 烟草花叶病毒 黄瓜花叶病毒 马铃薯X病毒 RNAi技术及在植物抗病毒研究中的应用 2006年 RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术是一项基因沉默新技术,在抗病毒研究中,人为地将与病毒或宿主基因(宿主基因编码的蛋白质对病毒很重要而对宿主本身作用很小或不起作用)同源的双链RNA(double strand RNA,dsRNA)导入生物体内,引起与其同源的基因发生沉默,从而抑制病毒复制,达到抗病毒的目的。因此RNAi技术在抗病毒研究中倍受关注,并取得了显著成绩。主要对RNAi技术的相关知识以及在植物抗病毒中的应用进展作一综述。 张金方 张飞云关键词:RNAI技术 DSRNA SIRNA 植物病毒 水稻条纹病毒研究进展 被引量:2 2006年 水稻条纹病毒引起的水稻条纹叶枯病在水稻种植区造成巨大的经济损失,有关病毒本身及抗病基因一直是近年研究的热点。根据近年的研究成果,综述在病毒的核酸、蛋白质、抗病基因及应用基因工程控制病害等方面的研究进展,并对利用抗病基因工程策略控制病害的应用前景进行了展望。 邓召花 张飞云关键词:水稻条纹病毒 抗病毒基因 抗病毒蛋白 水稻条纹叶枯病 病毒学对分子生物学发展的贡献 2006年 本文通过回顾病毒学发展史上的重大事件,尝试从以下几个方面说明病毒学的新发现对分子生物学发展所做出的贡献:①噬菌体感染实验和植物病毒重建实验证明了核酸是遗传信息的载体;②逆转录病毒的发现使人们认识到遗传信息的流动不是单向的;③逆转录酶已经成为基因克隆中重要的工具酶;④朊病毒的发现使人们认识到蛋白质很有可能成为核酸之外遗传信息的载体,扩展了人们对中心法则的认识;⑤各种野生型病毒被改造成为基因工程载体,广泛应用于基因工程. 张海龙 张飞云 董志关键词:病毒学 逆转录病毒 朊病毒 病毒载体