上海市浦江人才计划项目(09PJ1407600)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：郁婷婷傅启华张岚张纪蔚应春妹更多>>
- 相关机构：上海交通大学上海交通大学医学院附属仁济医院上海交通大学医学院附属瑞金医院更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 一例遗传性蛋白C缺陷症家系的实验诊断被引量：5
- 2011年
- 目的对1例遗传性蛋白C缺陷症家系进行临床表型诊断和基因突变检测。方法用发色底物法测定血浆蛋白C活性;用聚合酶链反应(PCR)法对先证者PC基因(PROC)的9个外显子及其侧翼序列进行扩增,PCR产物纯化后直接测序,检测其基因突变。家系成员DNA在先证者PROC基因突变区域扩增后测序,进行家系调查以期发现遗传规律。结果先证者蛋白C活性为38.6%,抗原为45.3%。直接基因测序分析发现先证者PROC基因外显子7区存在杂合错义突变c.565C>T,该突变将引起编码的蛋白C 147位精氨酸被色氨酸替换(p.Arg147Trp)。家系分析发现先证者的c.565C>T突变遗传于其父亲。结论 c.565C>T杂合突变是导致该家系遗传性PC缺陷症的原因。
- 沈薇顾怡张岚张纪蔚应春妹郁婷婷傅启华
- 关键词：蛋白C基因突变
- 蛋白C P275S突变导致遗传性蛋白C缺陷症的分子机制研究
- 2011年
- 目的研究蛋白C(PC)基因P275S突变导致遗传性PC缺陷症的分子机制。方法构建PC基因野生型和P275S突变型表达质粒,并瞬时转染HEK293T细胞和COS 7细胞进行体外表达。ELISA检测转染细胞上清液和细胞裂解液的PC抗原;实时荧光RT-PCR(real time,RT-PCR)检测转染细胞PC mRNA表达量的改变;细胞免疫荧光染色检测PC在内质网和高尔基体内的分布。结果转染细胞上清液和细胞裂解液中的PC P275S抗原分别为野生型PC抗原的22.6%和78.9%;实时RT-PCR结果显示,与野生型PC相比,PC P275S突变体在mRNA水平没有减少;细胞免疫荧光染色显示,野生型PC蛋白在内质网和高尔基体中均有大量分布,而PC P275S突变蛋白主要位于内质网中。结论分泌障碍和细胞内降解是PC P275S导致PC缺陷症的原因。
- 郁婷婷王剑戴菁王学锋傅启华
- 关键词：基因突变
