国家留学基金(K513201011) 作品数:12 被引量:44 H指数:4 相关作者: 王剑文 董婷 嵇源源 潘魏松 王秋军 更多>> 相关机构: 苏州大学 云南省农业科学院 更多>> 发文基金: 国家留学基金 江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目 国家大学生创新性实验计划 更多>> 相关领域: 生物学 医药卫生 环境科学与工程 更多>>
甲基磺酸乙酯诱变选育竹红菌甲素高产菌株 被引量:2 2014年 以从短穗竹( Brachystachyum densiflorum)茎秆中分离获得的竹黄菌( Shiraia sp.S8)菌株为出发菌株,以.5%~2.5%甲基磺酸乙酯( EMS)处理竹黄菌悬浮孢子~30 min,结合平板初筛和高效液相色谱( HPLC)分析进行复筛。经诱变筛选得到高产菌株,发现其竹红菌甲素产量达到.8 mg/L,与原始出发菌株相比提高了.4%,且遗传稳定性良好,具有较高的医药及工业应用价值。 杨珠英 潘魏松 聂云 罗晗 王剑文关键词:甲基磺酸乙酯 竹红菌素 选育 Ag-SiO_2核壳型纳米粒的制备及其抗菌作用 被引量:3 2014年 利用抗坏血酸对AgNO3进行还原,生成银纳米粒核心,并通过正硅酸四乙酯的水解与聚合反应获得SiO2介孔外壳,制备平均粒径约为.9 nm的Ag SiO2核壳型纳米粒。 Ag SiO2纳米粒可以显著地抑制香石竹镰刀菌的生长,最小抑菌质量浓度为μg/mL,并可抑制香石竹镰刀菌菌丝生长和孢子分生。 Ag SiO2纳米粒处理~4 h后,菌丝体的过氧化氢酶、总超氧化物歧化酶、过氧化物酶活力增强,提示Ag SiO2纳米粒抗菌机制和活性氧诱导相关。 陆露 郑丽屏 赵培飞 王剑文葡萄细胞中白藜芦醇生物合成的研究进展 被引量:1 2013年 白藜芦醇是1种含有茋类结构的植物多酚化合物,具有抗氧化、抗菌、抗癌等多种生物活性;葡萄是提取白藜芦醇的主要植物资源;介绍葡萄中白藜芦醇含量的品种及其分布差异;综述葡萄细胞的培养方式和利用葡萄细胞生物技术生产白藜芦醇的技术的文献,探讨葡萄中白藜芦醇的生物合成途径及其基因调控等方面的研究进展,为白藜芦醇的生物技术生产提供理论参考。 龙小凤 夏倩华 王剑文关键词:葡萄 细胞培养 白藜芦醇 生物合成 原生质体紫外诱变选育竹红菌甲素高产菌株 被引量:4 2012年 采用原生质体紫外诱变技术选育竹红菌甲素高产菌株。结果表明:以竹黄菌Shiraia sp.S8为出发菌株,当使用混合酶系(5 mg/mL纤维素酶和10 mg/mL蜗牛酶)在30℃处理菌丝2 h,获得菌丝原生质体3.24×106个/mL。以竹黄菌原生质体在距离15 W紫外灯30 cm处照射诱导,获得诱变菌株C6。其竹红菌甲素产量达到28.1 mg/L,比原始出发菌株提高了53.7%,且遗传稳定,具有较高的医药与工业应用价值。 潘魏松 嵇源源 杨珠英 王剑文关键词:原生质体诱变 竹红菌素 应用PC12细胞损伤模型筛选中药活性成分的研究进展 被引量:5 2013年 PC12细胞在形态生理生化及功能方面接近于神经元,可作为体外研究神经性疾病的细胞模型,筛选具有神经保护作用的中药活性成分。本文介绍了帕金森病和阿尔兹海默病等的PC12细胞损伤模型的建立方法,综述了近年来通过该模型筛选出的具有神经保护作用的植物提取物、黄酮、生物碱、酚酸、萜类和皂苷类化合物,为神经系统退行性疾病的天然药物开发研究提供参考。 嵇源源 楚小晶 王剑文关键词:PC12细胞 体外模型 葡萄细胞悬浮培养生产白藜芦醇 被引量:4 2013年 以巨峰葡萄果皮为外植体,在添加2.0 mg/L 6-苄基嘌呤(6-BA)和0.1 mg/L 2,4-二氯苯氧基(2,4-D)的B5培养基上诱导葡萄愈伤组织; 以50 g/L的初始接种量在添加1.0 mg/L 6-BA和0.05 mg/L 2,4-D的B5液体培养基上建立葡萄悬浮培养体系。在25~27 ℃下,摇床振荡暗培养(120~130 r/min)18 d后,葡萄细胞生物量和白藜芦醇含量达到最大值(16.17 g/L、95.69 μg/g干质量)。在培养第12天时,向培养基中添加100 μmol/L茉莉酸甲酯(MeJA),经过6 d处理,细胞中白藜芦醇含量达235.73 μg/g干质量。 龙小凤 郑丽屏 赵培飞 王剑文关键词:葡萄 悬浮细胞 白藜芦醇 茉莉酸甲酯 多壁碳纳米管对DNA的体外氧化损伤研究 2013年 目的观察多壁碳纳米管(multi-walled nanotubes,MWCNTs)对DNA超螺旋构型的影响和氧化损伤。方法选择不同浓度多壁碳纳米管(50~500μg/ml)与pBR322质粒DNA及小牛胸腺DNA(ct-DNA)作用,采用质粒DNA凝胶电泳和圆二色谱分析。结果多壁碳纳米管能够引起pBR322质粒DNA的损伤,其DNA损伤率(16%~42%)呈剂量-反应关系,多壁碳纳米管高浓度(500μg/ml)时DNA降解成线性条带。在活性氧清除剂-维生素C的作用下,DNA损伤率可由45.24%降低到18.64%。多壁碳纳米管可削弱DNA碱基之间的堆积作用,导致DNA解链。结论多壁碳纳米管可通过活性氧介导DNA损伤。 董婷 王剑文关键词:多壁碳纳米管 质粒DNA 圆二色谱 应用基因组改组技术选育竹红菌甲素高产菌株 被引量:3 2012年 以紫外(UV)与亚硝基胍诱变的竹黄菌(Shiraia bambusicola)菌株NU12和UV4为出发菌株,60℃处理5 min、紫外(距离30 cm,30 W)照射90 s进行双亲原生质体灭活,通过30%聚乙二醇PEG6000介导原生质体融合20 min。结合平板初筛和高效液相色谱(HPLC)分析进行复筛,通过3轮重组融合操作,筛选出6株高产竹红菌甲素的融合株。其中融合菌株FIII-21的竹红菌甲素产量达到80.4 mg/L,比原始出发菌株提高了58.9%~167.1%,且遗传稳定,具有较高的医药及工业应用价值。 董婷 潘魏松 赵一璐 雷晓珩 陈可嘉 王剑文关键词:竹红菌甲素 原生质体融合 活性氧参与多壁碳纳米管诱导的RAW264.7细胞毒性 被引量:6 2013年 碳纳米管以其独特的结构和性能,在生物医药和电子等领域广泛应用,而其生态安全性也成为科学界关注的焦点。为探究多壁碳纳米管(MWCNTs)诱导的细胞毒性机制,将小鼠肺泡巨噬细胞(RAW264.7)暴露于6个浓度梯度(0、25、50、100、150和200μg.mL-1)的MWCNTs中,应用噻唑蓝(MTT)法测定细胞存活率,用2’,7’-二氯荧光素二乙酸(DCFH-DA)荧光染色法测定细胞内活性氧的生产量,用流式细胞方法测定MWCNTs对细胞周期的影响。同时使用抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸(NAC)验证MWCNTs诱导的细胞氧化损伤的作用机理。结果显示,MWCNTs对RAW264.7的细胞毒性呈剂量依赖性。暴露于不同浓度的MWCNTs(25、50、100、150和200μg.mL-1)下24h后,细胞活力分别为对照的74%、62%、59%、51%和45%。MWCNTs对RAW264.7的周期阻滞作用主要发生在G0/G1期。200μg.mL-1的MWCNTs处理3h后活性氧较对照组上升6.6倍。NAC对MWCNTs细胞毒作用有明显的抑制作用,且NAC能减弱MWCNTs对RAW264.7的细胞周期阻滞作用。研究表明,活性氧能够介导MWCNTs对小鼠巨噬细胞RAW264.7的损伤,并且MWCNTS通过细胞周期G0/G1期的阻滞,诱导细胞凋亡。 董婷 嵇源源 王剑文关键词:多壁碳纳米管 活性氧 细胞毒性 细胞周期 内生青霉菌对黄花蒿组培苗生长和青蒿素合成的影响 被引量:9 2011年 从黄花蒿茎中分离得到了17株内生真菌,其中内生青霉菌(Penicilliumsp.Y2)能有效促进黄花蒿组培苗生长及青蒿素合成。内生青霉菌悬浮培养5d后,分别将培养液与菌丝匀浆后经过高压灭菌处理,或将培养液经过高压灭菌、过滤除菌处理获得3种内生菌诱导子(A、B和C)。结果表明,3种内生菌诱导子对植株生长、抗氧化酶活性及青蒿素合成都有促进作用,诱导子C青蒿素合成诱导效果最好,可促进黄花蒿组培苗的干重增长44.44%、可溶性糖含量提高38.24%,诱导超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性,从而提高青蒿素合成达58.86%,黄花蒿组培苗青蒿素含量达4.701mg.g-1(干重)。 袁亚菲 董婷 王剑文关键词:黄花蒿 青蒿素 内生真菌 诱导子