湖北省自然科学基金(2002AB121)
- 作品数：4 被引量：25H指数：4
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- 锝-99m标记survivin反义寡核苷酸肝细胞癌显像的实验研究被引量：11
- 2005年
- 目的研究放射性核素锝99m(99mTc)标记survivin反义寡核苷酸(ASON)显像诊断肝细胞癌的价值。方法用DNA合成仪合成18碱基单链survivinASON,在5′末端经氨基修饰后,以S乙酰基N羟基琥珀酰亚胺巯基乙酰基三甘氨酸(SacetylNHSMAG3)作为螯合剂对survivinASON进行99mTc标记,并对99mTcsurvivinASON在荷瘤(SMMC7721)裸鼠模型体内的生物学分布、肿瘤反义基因显像、肿瘤反义基因抑制显像进行了分析。结果肿瘤组织显像时间早,0.5h即已开始显影。99mTcsurvivinASON在肿瘤组织内的聚集程度随时间延长而逐渐增加,于4h时达到最大,肿瘤/对侧肢体肌肉比值分别为2.48±0.44(体外显像)和3.35±0.57(生物学分布)。正义寡核苷酸(SON)在肿瘤组织内的聚集各时间点均明显低于ASON,差异有统计学意义(P<0.01)。用未标记的survivinASON进行抑制后,99mTcsurvivinASON在肿瘤组织中的聚集明显减少,4h时的肿瘤/对侧肢体肌肉比值降为0.93±0.23,与抑制前的2.48±0.44相比有明显减低(P<0.01)。结论99mTcsurvivinASON可在荷瘤裸鼠模型的肿瘤组织中特异性聚集,为肝细胞癌的特异性诊断提供了一种可能的新方法。
- 高再荣张永学张凯军
- 关键词：放射性核素显像SURVIVIN反义寡核苷酸显像诊断肝细胞癌^99MTC标记
- MAG_3和DTPA用于^(99)Tc^m标记Survivin ASON的对比研究被引量：8
- 2004年
- 目的 比较巯基乙酰基三甘氨酸 (MAG3)和二乙烯三胺五乙酸 (DTPA)对99Tcm 标记Sur vivin反义寡核苷酸 (SurvivinASON)的影响。方法 用DNA合成仪合成 18碱基单链SurvivinASON ,在5′末端经氨基修饰后 ,分别用S 乙酰基 N 羟基琥珀酰亚胺 MAG3(S acetyl NHS MAG3)和环DTPA酸酐作为螯合剂 ,进行99Tcm 标记 ,并对其标记率、放化纯、比活度、稳定性、细胞摄取率和细胞清除率进行比较。结果 99Tcm MAG3 ASON和99Tcm DTPA ASON的标记率分别为 (6 5 2 2± 6 87) %和 (5 0 5 6±5 4 5 ) % ;放化纯分别为 94 %和 95 % ;比活度分别为 1190和 86 0kBq μg。室温条件下 ,与生理盐水保温 4h后 ,其放化纯均 >90 % ;与正常人血清保温 4h后 ,2种标记寡核苷酸均未见明显血清蛋白质结合。99Tcm MAG3 ASON在肝癌细胞中的摄取率高于99Tcm DTPA ASON(P <0 0 1) ,但两者在肝癌细胞中的摄取均明显高于正常肝细胞 (P <0 0 1)。结论 采用S acetyl NHS MAG3和环DTPA酸酐为螯合剂 ,用99Tcm 标记SurvivinASON可行 ,前者螯合效果优于后者。
- 高再荣张凯军张永学
- 关键词：^99TC^M标记^99TC^M-DTPAMAG标记率NHS
- 脂质体包裹^(99)Tc^m标记Survivin反义寡核苷酸的制备和体外研究被引量：10
- 2006年
- 目的研究脂质体包裹(99)~Tc^m 标记 Survivin 反义寡核苷酸(ASON)的制备方法及其在肝癌细胞中的表达。方法合成20碱基单链 Survivin ASON,全程硫代修饰,5’末端经氨基修饰,以双功能联结剂联肼尼克酰胺(HYNIC)为螯合剂,ASON 与 HYNIC 偶联后用(99)~Tc^m 标记,经 P4柱纯化后,用阳离子脂质体(lipofectamine2000)对纯化产物进行包裹,并对其标记率、放化纯、比活度、稳定性、细胞摄取率进行研究。结果 (99)~Tc^m O_4^-比活度为18.5、14.8和7.4 MBq/μg时,标记率分别为(63.10±1.15)%、(62.40±1.05)%和(58.90±3.01)%。脂质体包裹的(99)~Tc^m-HYNIC-ASON 放化纯为(94.47±3.32)%,以生理盐水、新鲜人血清孵育4 h 后放化纯分别为92.51%和92.70%。转染后6 h,经脂质体包裹(99)~Tc^m-HYNIC-ASON 的肝癌细胞摄取率达(66.21±0.46)%,明显高于未经脂质体包裹的 ASON[(25.17±1.08)%,t=23.979～98.858,P<0.01)]。结论以 HYNIC 作为螯合剂标记 ASON 方法可行,脂质体能明显增加细胞摄取 ASON。
- 沈艳霞高再荣张永学
- 关键词：寡核苷酸类反义同位素标记锝脂质体体外研究
- Survivin反义寡核苷酸的^(99m)Tc标记及在肝癌细胞中的表达被引量：4
- 2004年
- 目的 :研究放射性核素99mTc标记Survivin反义寡核苷酸 (ASON)的方法及在肝癌细胞中的动力学 ,探讨用于肝癌诊断的可能性。方法 :用DNA合成仪合成 18碱基单链SurvivinASON ,在 5′末端经氨基修饰后 ,用S acetyl NHS MAG3作螯合剂 ,进行99mTc标记SurvivinASON ,并对其标记率、放化纯、比活度、稳定性、细胞摄取率和细胞清除率进行了研究。结果 :99mTc MAG3 ASON的标记率为 65 .2 2 %,放化纯为 94%,比活度为 1190kBq/μg。室温条件下与生理盐水温育 4h后 ,其放化纯为 92 %。 3 7℃ 5 %CO2 条件下与新鲜人血清温育 4h ,未见明显的血清蛋白结合作用。肝癌细胞摄取率 10h达 12 .73 %,细胞滞留率 8h为 5 4.2 2 %。结论 :采用S acetyl NHS MAG3 作螯合剂标记Survivin ASON的方法可行 ,可获得较好的标记效果 ,99mTc survivin ASON在肝癌细胞中有较理想的摄取率 。
- 高再荣张凯军张永学
- 关键词：SURVIVIN基因反义寡核苷酸^99MTC肝癌细胞
