安徽省自然科学基金(11040606M206)
- 作品数:5 被引量:12H指数:2
- 相关作者:钱中清何小燕姚春艳汪洪涛方芳更多>>
- 相关机构:蚌埠医学院蚌埠市第二人民医院蚌埠医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金:安徽省自然科学基金安徽省高校省级自然科学研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 结核分枝杆菌H37Ra株fbpC基因的克隆与表达被引量:1
- 2014年
- 目的:探讨克隆结核杆菌H37Ra菌株抗原fbpC基因及在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达。方法:通过聚合酶链反应扩增人结核杆菌弱毒性菌株H37Ra的编码基因fbpC,并定向克隆到原核表达载体pET-28a,通过酶切、聚合酶链反应和测序鉴定重组质粒,转化大肠埃希菌BL21(DE3)中,由异丙基硫代半乳糖苷诱导表达,十二烷基磺酸纳-聚丙烯酰胺和Western blot鉴定表达的重组蛋白。结果:成功构建了pET28a-fbpC重组质粒;在大肠埃希菌中表达了相对分子量约33 000的重组蛋白。结论:重组质粒pET28a-fbpC成功构建和表达,为fbpc反应原性、免疫诊断价值的研究提供参考。
- 马志刚钱中清
- 关键词:结核分枝杆菌克隆
- 重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞的氧化性损伤研究被引量:4
- 2013年
- 目的探讨重度子痫前期患者血清对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)造成的氧化性损伤。方法(1)HUVEC进行如下分组处理:20%健康孕妇血清刺激(正常血清组)、20%重度子痫前期患者血清刺激(PE组)、20%重度子痫前期患者血清+3×10^3U/ml过氧化氢酶共同刺激(PE+Cat组),并设置空白对照组,继续培养后,透射电镜观察细胞损伤情况,并用流式细胞仪检测凋亡相关蛋白AP02.7的表达情况。(2)激光共聚焦显微镜下,对HUVEC进行实时扫描的同时给予如下分组处理:正常血清组、PE组、PE+Cat组、加入100μmo]/LH2O2(阳性对照组),分别检测胞内活性氧簇(ROS)、Ca^2+及线粒体膜电位水平。结果(1)透射电镜下,PE组HUVEC的损伤明显,出现细胞膜脱落,并包裹细胞质形成自噬体,线粒体水肿,核固缩;但PE+Cat组的HUVEC虽然线粒体有轻度水肿表现,但嵴清晰可见,细胞核形态基本正常,细胞损伤明显改善。PE组的HUVEC中AP02.7的表达率为(37.8±1.1)%,与空白对照组[(13.4±1.1)%]、正常血清组[(13.5±1.5)%]比较显著升高,差异均有统计学意义(P〈0.01);而PE+Cat组AP02.7表达率为(19.2±1.6)%,显著降低,与PE组比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。(2)激光共聚焦显微镜下PE组的HUVEC胞内ROS、Ca^2+荧光强度变化幅度分别为12.0±1.3、4.1±0.7,而正常血清组分别为1.1±0.4、0.6±0.4,PE+Cat组分别为1.5±0.5、0.9±0.5,PE组分别与正常血清组、PE+Cat组比较,差异均有统计学意义(P〈0.01)。PE组的HUVEC线粒体膜电位荧光强度在扫描120S时有显著降低,而正常血清组、PE+Cat组变化不明显。结论重度子痫前期患者血清通过促进ROS生成,增强Ca^2+超载水平和降低线粒体膜电位对血管内皮细胞造成氧化性损伤。
- 钱中清李新萍王才智何小燕方芳
- 关键词:先兆子痫脐静脉内皮细胞
- 减毒结核分枝杆菌H37Ra感染小鼠模型的实验研究被引量:3
- 2016年
- 目的:研究减毒结核分枝杆菌(M.tb)H37Ra感染小鼠模型及其病理损伤的机制。方法:将清洁级Balb/c小鼠分为对照组和M.tb模型组,各3只。将H37Ra按照每只小鼠1×106CFU的剂量,经尾静脉注射感染小鼠,分别于感染7、14和21 d后,无菌操作取小鼠肺和脾脏组织,测量肺和脾脏的脏器系数,匀浆后行活菌培养;肺和脾脏组织冷冻切片,行HE染色观察病理损伤情况。结果:小鼠感染M.tb 14和21 d后,脾脏脏器系数均较感染7 d后显著升高(P<0.01和P<0.05)。感染7 d后,肺和脾脏组织匀浆均可检出活菌,脾脏组织H37Ra活菌量明显高于肺脏,并随感染时间逐渐增加;感染14 d后,肺组织病理观察可见明显感染性病变损伤。结论:M.tb H37Ra经尾静脉注射感染小鼠模型可造成部分结核病样病理性损伤。
- 张爱霞江京娣吕静竹汪洪涛宋传旺姚春艳钱中清
- 关键词:小鼠
- 子痫前期患者血清中H2O2与中性粒细胞及T淋巴细胞活化的关系被引量:2
- 2011年
- 大量研究证实,子痫前期孕妇存在系统性的高氧化应激状态及炎症性免疫活化。研究发现,子痫前期孕妇血清中存在高水平的氧化应激产物H2O2,其可能来源于氧化应激性胎盘组织及外周大量活化的中性粒细胞。血管内皮细胞损伤和功能紊乱被认为是子痫前期疾病进展中的关键环节,
- 钱中清曾耀英王才智汪洪涛姚春艳
- 关键词:T淋巴细胞活化中性粒细胞子痫前期孕妇血清H2O2血管内皮细胞损伤
- 自噬与巨噬细胞功能的关系研究进展被引量:2
- 2017年
- 自噬普遍存在于大部分真核细胞中,是一种进化保守的细胞内降解系统和重要的免疫防御机制,在抗细胞内寄生病原体免疫应答中发挥重要功能[1-2]。按吞噬物进入溶酶体的途径,自噬可分为巨自噬、微自噬和分子伴侣介导的自噬3种类型[3]。细胞通过自噬可以消除、降解和消化受损、变性、衰老和失去功能的细胞、细胞器、变性蛋白质以及核酸等生物大分子,为细胞的重建、再生和修复提供必须原料,实现细胞的再循环和再利用,在机体的免疫、感染、炎症、肿瘤、心血管病、神经退行性疾病等发病过程中具有十分重要的作用[4]。
- 何小燕钱中清
- 关键词:巨噬细胞自噬TOLL样受体