国家自然科学基金(81372064) 作品数:13 被引量:149 H指数:8 相关作者: 姜丽萍 潘莹莹 王晓慧 谢浩煌 肖健 更多>> 相关机构: 温州医科大学 上海交通大学医学院附属新华医院 宁波市医疗中心李惠利东部医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 浙江省科技厅项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
Myoprotective effects of bFGF on skeletal muscle injury in pressure-related deep tissue injury in rats 被引量:8 2016年 Background:Pressure ulcers(PUs)are a major clinical problem that constitutes a tremendous economic burden on healthcare systems.Deep tissue injury(DTI)is a unique serious type of pressure ulcer that arises in skeletal muscle tissue.DTI arises in part because skeletal muscle tissues are more susceptible than skin to external compression.Unfortunately,few effective therapies are currently available for muscle injury.Basic fibroblast growth factor(bFGF),a potent mitogen and survival factor for various cells,plays a crucial role in the regulation of muscle development and homeostasis.The main purpose of this study was to test whether local administration of bFGF could accelerate muscle regeneration in a rat DTI model.Methods:Male Sprague Dawley(SD)rats(age 12 weeks)were individually housed in plastic cages and a DTI PU model was induced according to methods described before.Animals were randomly divided into three groups:a normal group,a PU group treated with saline,and a PU group treated with bFGF(10μg/0.1 ml)subcutaneously near the wound.Results:We found that application of bFGF accelerated the rate of wound closure and promoted cell proliferation and tissue angiogenesis.In addition,compared to saline administration,bFGF treatment prevented collagen deposition,a measure of fibrosis,and up-regulated the myogenic marker proteins MyHC and myogenin,suggesting bFGF promoted injured muscle regeneration.Moreover,bFGF treatment increased levels of myogenesis-related proteins p-Akt and p-mTOR.Conclusions:Our findings show that bFGF accelerated injured skeletal muscle regeneration through activation of the PI3K/Akt/mTOR signaling pathway and suggest that administration of bFGF is a potential therapeutic strategy for the treatment of skeletal muscle injury in PUs. Hongxue Shi Haohuang Xie Yan Zhao Cai Lin Feifei Cui Yingying Pan Xiaohui Wang Jingjing Zhu Pingtao Cai Hongyu Zhang Xiaobing Fu Jian Xiao Liping Jiang关键词:BFGF REGENERATION PI3K/AKT/MTOR PI3K/Akt/GSK3β信号通路及内质网应激蛋白在大鼠难免性压疮形成中表达变化 被引量:3 2014年 目的:探讨磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)/糖原合成激酶3β(GSK3β)信号通路及内质网(ER)分子伴侣在大鼠难免性压疮中的表达变化。方法:54只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组(Con组),1个周期受压组(1c组)、3个周期受压组(3c组)、6个周期受压组(6c组)、9个周期受压组(9c组)和恢复期1 d组、3 d组、5 d组、7 d组,每组各6只。取各时间点受压部位肌肉组织,行HE染色观察组织的形态变化,SABC免疫组织化学法检测受压组织caspase-3的表达;蛋白质印迹(Western blotting)法检测受压组织中ER分子伴侣及Akt、GSK3β的变化。结果:HE染色结果显示,与Con组比较,各受压组局部肌肉组织呈现逐步退化的病理改变,在恢复组病理现象仍然存在;受压组和恢复组caspase-3蛋白表达均高于Con组,棕黄色颗粒表达主要在胞浆;Western blotting法检测受压组织中ER分子伴侣发现,其蛋白表达总体上呈上升趋势;与Con组比,受压组和恢复组p-Akt蛋白表达呈先上升后下降的趋势;与Con组比,受压组p-GSK3β蛋白表达首先表现为先上升后下降的趋势,在恢复组表达呈先下降后上升趋势。结论:难免性压疮难以愈合的原因可能与受压肌肉细胞凋亡有关;ER应激及PI3K/Akt/GSK3β信号通路可能参与了难免性压疮损伤过程。 崔飞飞 张菊芳 吴海英 宋亚军 蒋美琴 翁玉英 姜丽萍关键词:难免性压疮 内质网分子伴侣 碱性成纤维生长因子对大鼠成肌细胞氧化应激损伤的作用及其机制 被引量:6 2017年 目的:探讨碱性成纤维生长因子(bFGF)下调氧自由基水平在大鼠成肌细胞氧化应激中的保护作用。方法:采用对数生长期大鼠成肌细胞,随机分为四组(n=6):正常对照组(control),单纯bFGF组(bFGF),氧化应激组(H_2O_2),干预组(bFGF+H_2O_2)。氧化应激组采用含100μmol/L H_2O_2的培养基继续孵育4 h。免疫组化检测B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)阳性沉积颗粒;免疫荧光观察活性氧自由基(ROS)水平、Bcl-2、B淋巴细胞瘤-2基因相关X蛋白(Bax)及细胞色素C(Cyt.C)表达;Western blot检测Cyt.C、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)蛋白表达情况。结果:与正常组比较,氧化应激组成肌细胞Bcl-2表达降低,ROS、Cyt.C表达显著增加(P<0.05)。与氧化应激组比较,bFGF干预后的成肌细胞Bcl-2表达增加,ROS及Cyt.C表达减少(P<0.05)。结论:bFGF对成肌细胞氧化应激具有保护作用,其机制可能与bFGF下调氧自由基水平、Bcl-2蛋白增加、Cyt.C表达减少有关。 毛挺挺 方红波 王晓慧 潘莹莹 谢浩煌 张宏宇 肖健 姜丽萍关键词:氧化应激 大鼠成肌细胞 BFGF 应用Braden量表联合近红外光谱仪评估ICU患者压疮发生的研究 被引量:53 2014年 目的探讨局部持续受压对组织血供的影响,评估患者压疮风险,为压疮早期监测提供依据。方法随机选取ICU住院患者117例,应用近红外光谱仪监测患者骶尾部组织氧饱和度,Braden量表进行压疮危险因素评估,采用灵敏度、特异度、阳性及阴性预测值和受试者工具特性曲线(ROC)评价近红外光谱仪对压疮的预测效果。结果有压疮者Braden评分为(12.23±1.67)分,未发生者为(13.14±1.48)分,差异有统计学意义(P<0.05)。随ICU住院时间的延长,骶尾部组织氧饱和度(rSO2)持续下降。Braden评分评为中、高度压疮危险组,患者局部rSO2测量显著低于轻度压疮危险组;ROC曲线下面积显示,局部组织rSO2参数对压疮判断优于Braden量表评分,两者结合可提高压疮早期判断的有效性和可靠性。结论应用近红外光谱法结合Braden量表评估有利于临床早期压疮的监测。 姜丽萍 张龙 陈丽莉 潘莹莹 崔飞飞关键词:重症监护病房 压疮 近红外光谱 压疮深部组织损伤动物模型的构建及其临床意义 被引量:11 2014年 目的构建大鼠深部组织损伤模型,观察和评价该模型的病理特点及临床意义。方法将25只雄性SD大鼠随机分为1个正常组和4个实验组,利用磁片循环压迫的方法,对4个实验组大鼠建立压疮深部组织损伤的动物模型,并从整体、组织和生化3个层次对压疮深部组织溃疡进行观察。结果正常组皮肤及肌肉组织肉眼及镜下观察结构完整;实验组受压组织初期出现轻度凹陷、水肿,但表面皮肤尚完整,随着时间延长,至第7天起逐渐出现少许破溃现象;进一步的病理切片观察显示皮肤、皮下、肌肉组织全层受损,各组均有大量炎症细胞浸润,复层鳞状上皮变薄,胶原纤维排列紊乱,层次欠佳,肌纤维广泛变性,横纹结构逐渐消失;镜下观察受压早期,第0天肌肉组织即已受损,且据第14天组的观察发现肌肉组织后期修复较皮肤缓慢;Tunel染色检测皮肤及肌肉组织凋亡情况,各实验组(第0、4、7、14天)与正常对照组比较,差异有统计学意义(均P<0.01)。结论利用磁片循环压迫的方法构建的压疮深部组织损伤动物模型具有组织坏死、炎症细胞聚集、细胞凋亡等特征,其病理变化符合压疮临床病理特点,且成模时间短,可控性强,是一种理想的用于研究压疮机制的动物模型。 谢浩煌 潘莹莹 王晓慧 毛挺挺 姜丽萍关键词:压疮 缺血再灌注 肿瘤坏死因子α与基质金属蛋白酶2及胶原在大鼠压疮皮肤组织中的表达及意义 被引量:10 2016年 目的观察TNF-α、基质金属蛋白酶2(MMP-2)及胶原在大鼠压疮局部皮肤组织中的表达,探讨压疮形成的可能机制。方法将40只SD雄性大鼠按随机数字表法分为正常对照组、受压3d组、受压5d组、受压7d组、受压9d组,每组8只。正常对照组大鼠不做任何处理;后4组大鼠应用缺血一再灌注磁片循环压迫的方式,在大鼠两侧后肢股薄肌处建立深部组织损伤模型(受压3d组)和压疮模型(另3组)。受压3d组大鼠仅受压3个循环;受压5d组、受压7d组、受压9d组大鼠在受压3个循环后,划破受压皮肤,后继续分别施压至5、7、9个循环。受压3d组大鼠于受压3d后(正常对照组大鼠于相同时间点),另3组大鼠分别于受压5、7、9d后,切取两侧后肢股薄肌中心部位处的皮肤组织。HE染色观察皮肤组织形态,Masson染色观察胶原纤维表达,免疫组织化学法检测Ⅳ型胶原、MMP-2表达,蛋白质印迹法检测TNF-α、磷酸化NF—κB表达。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果(1)正常对照组大鼠皮肤组织为复层鳞状上皮,皮肤结构清晰,无明显炎性细胞浸润;受压3d组大鼠上皮层次清晰,Fh较多,炎性细胞开始浸润;受压5d组、受压7d组、受压9d组大鼠随着受压时间延长,表皮增厚,Fb数量减少,炎性细胞浸润增强。(2)正常对照组大鼠皮肤组织中胶原纤维排列整齐,含量丰富。受压3d组大鼠皮肤组织中胶原纤维排列有序,表达量仍较高,与正常对照组大鼠相近(P〉0.05)。受压5d组、受压7d组大鼠皮肤组织中胶原纤维排列紊乱,表达量逐渐减少,均明显低于正常对照组(P值均小于0.01);受压9d组大鼠皮肤组织中胶原纤维表达量较受压7d组少量增加,但仍明显低于正常对照组(P〈0.01)。(3)正常对照组、受压3d组、受压5d组、受压7d组、受压9d组大鼠皮肤组织中Ⅳ型胶原� 王晓慧 毛挺挺 潘莹莹 谢浩煌 张宏宇 肖健 姜丽萍关键词:压力性溃疡 肿瘤坏死因子A 基质金属蛋白酶2 内质网应激相关蛋白及其介导的细胞凋亡在大鼠难免性压疮形成中的作用 被引量:8 2013年 目的探讨内质网应激(ERS)相关蛋白及其介导的细胞凋亡在大鼠难免性压疮形成中的作用。方法将40只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为正常对照组和1个受压周期组、3个受压周期组、6个受压周期组、9个受压周期组,每组8只。本实验模拟临床压疮的处理,向大鼠大腿股薄肌部位施加22.47kPa压力,持续施压2.0h,放松0。5h,即1个受压周期。1个受压周期组大鼠模拟压疮处理1次;3个受压周期组大鼠1d内模拟压疮处理3次;6个受压周期组大鼠每天模拟压疮处理3次,持续2d;9个受压周期组大鼠每天模拟压疮处理3次,持续3d;正常对照组大鼠未进行施压处理。模拟完成后,处死各受压组大鼠,取受压中心部位肌肉组织行HE染色观察组织形态学变化;Hoeehst33258染色检测每平方毫米受压肌肉组织中凋亡细胞核数量;蛋白质印迹法检测ERS相关蛋白即结合蛋白(BIP)、蛋白质二硫键异构酶(PDI)、转录因子CCAAT增强子结合蛋白同源蛋白(CHOP)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶12(caspase-12)的水平,数据以目的蛋白与内参照GAPDH灰度比值表示。正常对照组大鼠取相同部位肌肉组织进行上述检测。对数据进行单因素方差分析,两两比较行LSD-t检验。结果形态学观察显示,与正常对照组比较,各受压组大鼠局部受压肌肉组织呈现炎性细胞浸润、肌纤维溶解、空泡变性等病理改变。Hoechst33258荧光染色显示,1个受压周期组、3个受乐周期组、6个受压周期组、9个受压周期组大鼠每平方毫米受压肌肉组织中凋亡细胞核数量分别为(14.5±4.4)、(11.0±2.9)、(13.8±5.1)、(21.3±6.0)个,均明显多于正常对照组[(2.7±1.4)个,t值为4.223—6.000,P值均小于0.01]。蛋白质印迹法检测显示,正常对照组和1个受压周期组、3个受压周期组、6个受压周期组、9个受� 崔飞飞 潘莹莹 代彦丽 王周光 肖健 姜丽萍关键词:细胞凋亡 内质网 应激 压疮 外源性重组人碱性成纤维细胞生长因子对大鼠压疮深部组织损伤后肌肉修复的作用 被引量:8 2015年 目的探讨外源性重组人bEGF(rhbFGF)对大鼠压疮深部组织损伤(DTI)后肌肉修复的作用。方法将48只SD大鼠按随机数字表法分为正常对照组、损伤对照组、伤后4d组、伤后7d组、伤后14d组、伤后21d组,每组8只。正常对照组大鼠不做任何处理,后5组大鼠在两侧后肢股薄肌处建立压疮DTI模型。损伤对照组大鼠伤后不做任何处理;另4组大鼠在伤后即刻分别于左侧后肢股薄肌处皮下注射100μg/mL的rhbFGF0.1mL,右侧后肢股薄肌处注射等体积生理盐水(NS),隔天注射1次。损伤对照组大鼠于伤后即刻、正常对照组大鼠于相同时相点,另4组大鼠分别于伤后第4、7、14、21天切取两侧后肢股薄肌处肌肉组织。HE染色观察股薄肌组织形态,免疫荧光法检测成肌素表达,蛋白质印迹法检测肌肉结构蛋白肌球蛋白重链(MyHC)、磷酸化蛋白激酶B(Akt)、磷酸化哺乳动物雷帕霉索靶蛋白(mTOR)表达。对数据行单因素方差分析、LSD检验。结果(1)正常对照组大鼠股薄肌细胞胞核大小均匀、排列紧密、结构清晰,无明显的炎性细胞浸润;损伤对照组大鼠股薄肌出现肌细胞固缩、溶解断裂,结构紊乱的病理退化现象;伤后4d组、伤后7d组、伤后14d组、伤后21d组大鼠经rhbFGF处理的股薄肌细胞肿胀、炎性浸润、结构紊乱等病理损伤现象均较组内经NS处理的股薄肌减轻,肌细胞增殖数目增多。(2)正常对照组、损伤对照组大鼠股薄肌成肌素表达阳性细胞数分别为(28±17)、(424-28)个;伤后4d组、伤后7d组、伤后14d组大鼠经NS处理的股薄肌成肌素表达阳性细胞数分别为(100±50)、(196±87)、(460±110)个,经rhbFGF处理的股薄肌成肌素表达阳性细胞数分别为(174±34)、(717±182)、(613±122)个,各组大鼠经rhbFGF处理的股薄肌成肌素表达阳性细胞数明显多于组内经NS处理的� 谢浩煌 张宏宇 毛挺挺 王晓慧 潘莹莹 肖健 姜丽萍关键词:肌肉发育 成纤维细胞生长因子2 肌球蛋白重链 压疮 哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 Bcl-2和PCNA表达在大鼠成肌细胞氧化应激损伤中的作用 被引量:3 2017年 目的:探讨Bcl-2、PCNA等蛋白表达在成肌细胞氧化应激损伤中的意义。方法:将对数生长期成肌细胞进行分组,结合碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)预处理2 h及过氧化氢处理,分为正常对照(control)组、单纯bFGF组、氧化应激组(H_2O_2组)和干预组(bFGF+H_2O_2组)。免疫组化检测Bcl-2和Bax阳性沉积颗粒;免疫荧光观察成肌细胞形态及Bcl-2和Bax荧光表达;Western blot检测Bcl-2、PCNA等蛋白表达情况。结果:免疫荧光及免疫组化结果显示,与氧化应激组比较,干预组Bcl-2表达增加,Bax表达减少;Western blot显示,干预组Bcl-2和PCNA水平增加,Bax水平降低。结论:氧化应激诱导的大鼠成肌细胞损伤参与肌细胞病理进程。Bcl-2和PCNA表达上调可减轻成肌细胞损伤程度。 毛挺挺 郑亚华 方红波 谢鲁吉 张伟丹 姜丽萍关键词:氧化应激 碱性成纤维细胞生长因子 两性离子水凝胶敷料用于压疮创面的实验研究 被引量:9 2018年 目的观察两性离子(含磺酸甜菜碱甲基丙烯酸酯,SBMA)水凝胶敷料对大鼠压疮创面愈合的影响。方法取24只SD大鼠,根据压疮缺血-再灌注原理制作压疮模型。按随机数字表法将模型大鼠分为NS组、PEG组和SBMA组,每组8只,去除创面坏死组织后,分别采用生理盐水、含聚乙二醇甲基丙烯酸酯(PEG)水凝胶和两性离子水凝胶敷料处理创面,干预后第4、7、10、14天观察创面面积,干预后第7、14天观察组织结构及胶原沉积情况、免疫组织化学观察CD31、VEGF、Ki67、CK10表达。结果 SBMA组创面愈合率在各时间点显著高于其他两组(均P<0.05),且PEG组高于NS组(均P<0.05);干预后第7天SBMA组CD31、VEGF表达水平最高(P<0.05),第14天CD31、VEGF表达水平有所下降;上皮组织Ki67表达水平逐渐上升,SBMA组上升最快,PEG组次之,NS组最慢;三组均在第14天出现创面上皮化,相较于其他两组,SBMA组表皮分化程度最高。结论两性离子水凝胶敷料在促进压疮创面血管生成和再上皮化方面具有一定优势,能促进压疮创面愈合。 江仕爽 吴疆 王晓慧 李环 姜丽萍关键词:压疮 创面 水凝胶敷料 两性离子 动物实验