广西壮族自治区自然科学基金(08320152)
- 作品数:3 被引量:8H指数:2
- 相关作者:马志永邱亚峰彭丽娜李力徐永莉更多>>
- 相关机构:广西壮族自治区药用植物园中国农业科学院上海兽医研究所福建农林大学更多>>
- 发文基金:广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域:生物学医药卫生农业科学更多>>
- 小鼠Toll样受体9基因的克隆、表达及其活性的初步鉴定被引量:2
- 2010年
- 从小鼠巨噬细胞中提取细胞总RNA,采用RT-PCR技术扩增小鼠Toll样受体9(mTLR9)cDNA,构建真核表达质粒p3XFLAG-CMV-7.1-mTLR9,转染293T细胞,利用Western Blotting检测蛋白表达,并用双荧光素酶报告基因系统检测mTLR9对其介导的信号通路下游转录因子NF-κB转录活性影响.结果表明,本试验成功克隆到小鼠TLR9cDNA,构建的重组体转染细胞后表达的蛋白分子质量与预计相符,并能激活下游转录因子NF-κB的转录活性.
- 彭丽娜邱亚峰繆剑华李向东王晓杜袁经权王寿昆李力马志永
- 关键词:基因表达NF-ΚB转录活性
- 氧化苦参碱下调免疫细胞TLR7 mRNA的表达被引量:6
- 2011年
- 为了探讨氧化苦参碱对免疫细胞Toll-like receptor 7(TLR7)mRNA表达的影响,使用CCK-8试剂盒检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞的生长抑制作用。应用荧光定量PCR方法检测氧化苦参碱对RAW264.7细胞TLR7 mRNA及其下游因子TNF-αmRNA表达的影响;检测氧化苦参碱对小鼠脾脏淋巴细胞TLR7 mRNA及其下游因子MyD88、TRAF-6 mRNA表达的影响。结果显示,氧化苦参碱对RAW264.7细胞的半数抑制率为5.9 mg/mL。氧化苦参碱下调RAW264.7细胞TLR7、TNF-αmRNA表达;下调小鼠脾脏淋巴细胞TLR7、MyD88、TRAF-6 mRNA表达。由此得出,氧化苦参碱可下调免疫细胞TLR7mRNA的表达。
- 高小琪彭丽娜李力邱亚峰繆剑华徐永莉史子学邵东华魏建超马志永
- 关键词:氧化苦参碱荧光定量PCR
- 小鼠TOll样受体3基因的克隆及真核表达
- 2011年
- 采用RT-PCR方法从小鼠巨噬细胞中克隆小鼠Toll样受体3(TLR3)基因,基因测序表明获得了小鼠全长TLR3cDNA,构建了真核表达质粒p3XFLAG-CMV-7.1-TLR3。重组质粒转染293T细胞,Western blotting检测蛋白表达,表达蛋白质的相对分子量与预计相符。采用TLR3的阳性刺激物poly(I:C)刺激重组质粒转染的293T细胞,双荧光素酶报告基因系统检测发现能激活下游转录因子NF-κB的转录活性,并能诱导TLR3下游细胞因子IL-6和TNF-α的表达。小鼠TLR3基因的克隆和表达,为研究TLR3介导的信号通路及其在抗病毒免疫中的作用打下基础。
- 彭丽娜李力邱亚峰缪剑华王晓杜徐永莉史子学邵东华魏建超马志永
- 关键词:NF-ΚB基因表达信号转导