国家自然科学基金(30300421)
- 作品数：9 被引量：68H指数：5
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- Notch信号转导通路分子在MSC诱导分化为心肌细胞过程中的表达变化
- 目的了解 Notch 信号转导通路在 MSC 诱导分化为心肌细胞过程中可能的作用。检测诱导 MSC 分化为心肌细胞前后不同时间 Notch 信号转导通路分子的表达水平。方法利用乳鼠心肌细胞非接触共培养法诱导 MSCs 向...
- 单志新林秋雄李晓红邓春玉杨敏林曙光余细勇
- 关键词：心肌细胞MSC
- 文献传递
- 用siRNA抑制人基质金属蛋白酶1(MMP1)的表达
- 目的;动脉粥样硬化(AS)所致的心、脑血管疾病在人类死亡原由中占有重要的地位。大量研究已证实,基质金属蛋白酶(MMPs)可降解细胞外基质,软化纤维帽,使斑块趋向不稳定。为了获得能有效抑制MMP1表达的siRNA,分别设计...
- 单志新林秋雄余细勇郑猛谭虹虹符永恒杨敏刘晓颖林曙光
- 缬沙坦对心力衰竭心肌细胞收缩功能和钙瞬变的影响
- 2005年
- 目的:探讨缬沙坦对心力衰竭(HF)大鼠心肌细胞收缩功能和钙瞬变的作用。方法:结扎大鼠冠状动脉左前降支8周后,复制充血性HF模型,随机分为2组,即缬沙坦治疗组与HF对照组,分别用缬沙坦和安慰剂治疗,另设假手术组。治疗12周后,用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞,用共聚焦显微镜测定单个细胞的收缩功能和钙瞬变。结果:①HF对照组左室舒张末压(LVEDP)明显大于假手术组(P<0.01),左室最大收缩压(LVSP)血压和左室内压的最大上升/下降速率(±dp/dtmax)明显小于假手术组(P<0.05、P<0.05和P<0.01);而缬沙坦治疗组LVSP和±dp/dtmax明显高于HF对照组(P<0.05和P<0.01),LVEDP明显小于HF对照组(P<0.01)。②HF对照组的心肌细胞表面积和最大舒张长度均大于假手术组(P<0.01),缩短分数明显低于假手术组(P<0.05),经缬沙坦治疗后均有明显改善(P<0.01)。③HF对照组心肌细胞的钙瞬变明显低于假手术组(P<0.01),舒张末期钙浓度明显升高(P<0.05),钙浓度下降时间明显减慢(P<0.01),经缬沙坦治疗后均明显改善(P<0.01)。结论:缬沙坦治疗能明显改善充血性HF的心肌细胞收缩功能,可能与改善HF心肌细胞钙调控异常有关。
- 邓春玉林曙光王礼春陈文芳单志新薛玉梅钱卫民吴书林
- 关键词：心力衰竭心肌收缩钙通道
- 表达载体介导的反义RNA抑制人巨噬细胞移动抑制因子的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:研究表达载体介导的反义RNA对人巨噬细胞移动抑制因子(MIF)表达的抑制作用。方法:用亚克隆技术构建可转录MIF反义RNA的真核表达载体pcDNA3-antiMIF。用lipofectamine2000分别将pcDNA3、pcDNA3-antiMIF转染可表达MIF的HEK293(293-MIF)细胞,用Real-time定量PCR鉴定MIFmRNA表达水平。将pcDNA3-antiMIF转化人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),建立可表达MIF反义RNA的HUVECs(HUVECs-antiMIF)细胞。将MIF的真核表达载体pSecTag-MIF转染HUVECs-antiMIF,用Real-time定量PCR鉴定MIFmRNA的表达水平。结果:正确构建了MIF反义RNA的表达载体pcDNA3-antiMIF。MIF反义RNA对293-MIF细胞中MIF表达的抑制水平达32%(P<0.05)。建立稳定表达MIF反义RNA的HUVECs-antiMIF细胞株。HUVECs-antiMIF中MIF的表达受到抑制,表达水平降低40%(P<0.05)。结论:表达载体介导的反义RNA能有效地抑制MIF的表达,建立了稳定表达MIF反义RNA的HUVECs。
- 单志新林秋雄余细勇邓春玉杨敏符永恒谭虹虹郑猛林曙光
- 关键词：巨噬细胞游走抑制因子人脐静脉血管内皮细胞脂质体
- 巨噬细胞移动抑制因子-173G/C多态性与冠心病的相关性研究被引量：24
- 2006年
- 目的研究巨噬细胞移动抑制因子（macrophage migration inhibitory factor, MIF）基因MIF 5′非翻译区-173G／C多态性在中国南方汉族人群中的分布及与冠心病的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术，对汉族138例冠心病患者及163名正常人群MIF基因-173G／C位点进行研究，对于限制酶酶切结果再进行DNA测序鉴定。结果冠心病患者与正常对照中只检出-173GG和-173GC基因型，均未检出-173CC基因型。正常人群和冠心病患者的MIF-173G等位基因频率分别为0．966和0．917，MIF-173C等位基因频率分别为0．034和0．083，冠心病患者MIF-173GC基因型频率（0．167）明显高于对照组（0．068）（OR：2．764，95％CI：1．295～5．899；P=0．007）。结论MIF基因-173G／C位点多态性与冠心病有关，C等位基因可能是汉族人群冠心病的易感性标志。
- 单志新符永恒余细勇邓春玉谭虹虹林秋雄于汇民林曙光
- 关键词：冠状动脉粥样硬化性心脏病巨噬细胞移动抑制因子基因多态性
- 巨噬细胞移动抑制因子介导高糖刺激的心肌细胞GRK2表达及其作用机制被引量：4
- 2007年
- 余细勇陈红梅林秋雄李晓红单志新林曙光
- 关键词：病理学与病理生理学巨噬细胞移动抑制因子高浓度葡萄糖心肌细胞G蛋白偶联受体激酶
- 缬沙坦对心力衰竭大鼠心肌细胞钙通道和钠-钙交换体电流的影响被引量：7
- 2005年
- 目的 :探讨缬沙坦对心力衰竭大鼠心肌细胞钙通道和钠 -钙交换体电流的影响。方法 :结扎大鼠冠状动脉左前降支 8周后 ,复制心力衰竭模型 ,随机分 2组 ,即心力衰竭治疗组与心力衰竭对照组 ,分别用缬沙坦和安慰剂治疗 ,另设假结扎对照组。治疗 16周后 ,用急性酶解法获得单个大鼠心室肌细胞和标准全细胞膜片钳技术记录通道电流。结果 :(1)心力衰竭对照组左室舒张末压 (LVEDP)和细胞膜电容 (Cm)明显大于假结扎对照组 (P <0 0 5 ) ,左室最大收缩压 (LVSP)和左室内压的最大上升和下降速率 (±dp/dtmax)明显少于假结扎对照组 (P <0 0 5 ) ;而心力衰竭治疗组LVSP和±dp/dtmax明显高于心力衰竭对照组 (P <0 0 5 ) ,LVEDP和Cm明显少于心力衰竭对照组 (P<0 0 5 ) ,3组心率 (HR)和血压 (BP)无明显差异 (P >0 0 5 )。 (2 )心力衰竭对照组钙通道电流密度峰值明显少于假结扎对照组 (P <0 0 5 ) ,心力衰竭治疗组明显大于心力衰竭对照组 (P <0 0 5 ) ,但激活电位、峰电位和翻转电位差异均无显著 (P >0 0 5 )。 (3) 3组钙通道电流激活、失活和复活动力学特征均无显著差异 (P >0 0 5 )。 (4)心力衰竭对照组钠钙交换体电流密度明显大于假结扎对照组 (P <0 0 5 ) ,心力衰竭治疗组明显少于心力衰竭对照组 (P <0 0
- 邓春玉林曙光吴伟康钱卫民阮小薇吴书林
- 关键词：心力衰竭钠钙交换蛋白钙通道
- β_1肾上腺受体反义基因对高血压大鼠前肾素、血管紧张素Ⅱ的影响
- 2007年
- 目的观察β1肾上腺受体反义基因对肾性高血压大鼠血压、前肾素原 mRNA和血浆血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)的影响,探讨基因治疗降低血压的机制。方法制作两肾一夹肾性高血压模型,阳离子脂质体与β1反义寡核苷酸经鼠尾静脉注射。共聚焦检测荧光,鼠尾袖带法(tail-cuff法)测血压,半定量RT-PCR测定前肾素原 mRNA水平,放免法测定血浆AngⅡ水平。结果β1反义寡核苷酸可使血压下降维持4周,血压最大下降39mmHg;与高血压组比较,注射后第7天反义组的前肾素原 mRNA、AngⅡ水平无统计学意义;注射后第28天,反义组的前肾素原 mRNA、AngⅡ水平降低差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。结论以β1肾上腺受体为靶基因的反义基因治疗降压效果显著,其机制是先作用于交感神经系统再作用于肾素血管紧张素系统来发挥作用。
- 梁远红林曙光周燕王晋明王芳余细勇
- 关键词：基因治疗
- 腺病毒表达载体对MSC诱导分化能力的影响
- 目的了解腺病毒载体对 MSC 分化能力的影响,拟检测 MSC 感染腺病毒载体前和感染后不同时间保持分化的能力。方法利用表达绿色荧光蛋白(GFP)的重组腺病毒感染传至3代的人 MSCs,分别在感染后2,4,8和16 d 收...
- 林秋雄单志新李晓红邓春玉黄薇刘晓颖杨敏余细勇
- 关键词：腺病毒MSC
- 文献传递
- 基于荧光定量PCR扩增反应的SNP测定法被引量：9
- 2005年
- 建立一种利用荧光定量PCR扩增反应进行单核苷酸多态性(SNP)快速测定的方法.以人β肾上腺素受体2基因中的Arg16Gly为研究对象,利用荧光染料SYBRGreenⅠ标记定量PCR产物,通过PCR生长曲线和融解曲线分析结果进行SNP分型.为提高SNP测定的特异性,分别在野生型和突变型等位基因的特异性引物3′端倒数第3个碱基位置,引入了一个人为错配碱基,使引物的错误延伸率显著降低,大大提高了SNP分析的准确性.通过DNA测序验证荧光定量PCR对β肾上腺素受体2基因中Arg16Gly分型结果的准确率.实验结果表明,所建立的方法操作简便,结果准确,适合进行大规模样品的SNP检测工作.
- 单志新谭虹虹余细勇林秋雄
- 关键词：单核苷酸多态性实时聚合酶链反应
