国家高技术研究发展计划(2002AA2Z341D)
- 作品数：5 被引量：84H指数：5
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- 相关机构：北京大学第一医院华中科技大学中日友好医院更多>>
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- 外排泵高表达和外膜蛋白缺失在铜绿假单胞菌对碳青霉烯耐药中的作用被引量：35
- 2006年
- 目的探讨铜绿假单胞菌(PA)外科监护室(SICU)分离株对碳青霉烯的耐药机制。方法用W estern印迹和逆转录PCR测定外膜蛋白OprD、OprN表达水平和基因m exA的mRNA水平;用PCR扩增IMP、VIM金属酶基因和主动外排系统M exAB-OprM调控基因m exR,并测序。结果从SICU分离的49株PA,42株对碳青霉烯耐药,其OprD表达除PA42外均有不同程度的降低或缺失,而正常表达OprD的7株菌,均对2种碳青霉烯敏感。27株菌高表达主动外排系统M exAB-OprM,高表达组对亚胺培南耐药率81.5%(22/27)与低表达组耐药率86.4%(19/22)比较差异无统计学意义(χ2=0.005,P=0.943);而高表达组对美罗培南耐药率44.4%(12/27)与低表达组耐药率13.6%(3/22)比较差异有统计学意义(χ2=5.417,P=0.020)。14株表达了M exEF-OprN,但表达组对亚胺培南和美罗培南耐药率与未表达组耐药率比较差异均无统计学意义(χ2=0.000,P=1.000)。8株高表达M exAB-OprM主动外排系统的调控基因m exR发生变异,其中7株出现氨基酸替换,1株提前出现终止密码子。未发现产IMP、VIM金属酶菌株。结论本院SICU分离的PA,对碳青霉烯耐药主要是由外膜蛋白OprD表达降低或缺失引起,与IMP、VIM金属酶无关;主动外排系统M exAB-OprM的高表达对美罗培南的耐药起重要作用;其高表达与调控基因m exR变异有关。
- 衣美英王鹏远黄汉菊刘玉村
- 关键词：铜绿细菌外膜蛋白质类主动外排系统
- 耐亚胺培南铜绿假单胞菌外膜孔蛋白与β-内酰胺酶研究被引量：23
- 2007年
- 目的探讨铜绿假单胞菌外科监护室分离株对碳青酶烯类抗菌药物耐药机制。方法琼脂稀释法测定抗菌药物最低抑菌浓度(MIC);提取β-内酰胺酶进行三维水解试验及等电聚焦电泳;紫外分光光度计测定酶活性;用PCR扩增IMP、VIM金属酶基因;用Western印迹分析外膜孔蛋白OprD2表达水平。结果从外科监护室分离的49株铜绿假单胞菌,有41株对亚胺培南耐药;耐药组34株菌产AmpC酶,其中8株同时产ESBLs酶,2株仅产ESBLs,未筛选出产金属酶菌株;亚胺培南耐药组酶活性(74.32±53.42)μmmol/mg与亚胺培南敏感组酶活性(8.7±16.16)μmmol/mg比较差异有统计学意义(P<0.01);耐药组OprD2表达均有不同程度的降低或缺失,而敏感组均正常表达OprD2,耐药组OprD2相对表达量(0.20±0.27)与敏感组(3.10±2.20)比较差异有统计学意义(P<0.01);未扩增出IMP、VIM金属酶基因。结论外膜孔蛋白OprD2表达降低或缺失以及高活性AmpC酶,是外科监护室耐亚胺培南铜绿假单胞菌的主要原因,与IMP、VIM金属酶关系不大。
- 衣美英刘迎春王鹏远刘玉村
- 关键词：铜绿假单胞菌亚胺培南外膜孔蛋白Β-内酰胺酶
- 多重耐药铜绿假单胞菌MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统的耐药作用被引量：12
- 2006年
- 目的探讨MexAB-OprM、MexXY-OprM主动外排系统(外排泵)在多重耐药铜绿假单胞菌耐药机制中的作用。方法选取25株外科监护室分离的多重耐药铜绿假单胞菌,用实时定量RT- PCR测定结构基因mexA、mexX的mRNA表达水平来判断MexAB-OprM、MexXY-OprM外排泵表达情况；用PCR分别扩增其调控基因mexR、mexZ,并对其产物测序,用Blast软件在GenBank与已知序列比较,研究其过度表达的机理。结果25株多重耐药铜绿假单胞菌中,14株高表达MexAB-OprM系统(56％),3株高表达MexXY-OprM系统(12％),这3株菌同时高表达2种外排泵。在8株mexA高表达的菌株中,5株菌发生mexR基因突变,出现氨基酸替代,1株mexR提前出现终止密码子,2株菌未发现mexR基因突变。2株mexX高表达的菌株均发生基因mexZ突变,出现氨基酸替代。结论主动外排系统MexAB-OprM、MexXY-OprM在多重耐药铜绿假单胞菌中过度表达,是此菌多重耐药机制之一；外排泵MexAB-OprM、MexXY-OprM高表达分别与调控基因mexR、mexZ发生变异有关,同时存在其他调控机制。
- 衣美英黄汉菊王鹏远刘玉村
- 关键词：多重耐药铜绿假单胞菌
- 健康老年肾对头孢哌酮/舒巴坦(1∶1)药代动力学的影响被引量：8
- 2007年
- 目的观察随年龄增长所致的肾功能减退对头孢哌酮(CFZ,第3代头孢类抗生素)/舒巴坦(SBT,β内酰胺酶抑制剂)药代动力学的影响。方法44名健康成年与老年受试者,每12h静脉给予CFZ/SBT各1g,共7次,采集末次给药后不同时间的血样,用HPLC方法测定血药浓度;肌酐清除率(Ccr)用Cockcroftand Gault法计算。结果老年男性和成年男性Ccr分别为(65.3±7.7),(106.0±21.6)mL·min-1(P<0.01);稳态时,CFZ:AUC分别为(256.3±72.0),(182.3±49.6)mg·h·L-1(P<0.01);Cmax分别为(102.0±15.3),(89.4±10.7)μg·mL-1(P<0.05);t1/2分别为(2.2±0.6),(1.5±0.5)h(P<0.01);CLT分别为(4.2±1.2),(5.8±1.2)L·h-1(P<0.01),Ccr与CLT、AUC、t1/2相关(γ分别为0.52、-0.40、-0.27,均P<0.01)。稳态时,SBT:AUC分别为(81.8±28.4),(33.7±6.7)mg·h·L-1(P<0.01);Cmax分别为(54.7±19.9),(28.0±4.8)μg·mL-1(P<0.01);t1/2分别为(1.4±0.4),(1.1±0.5)h(P>0.05);CLT分别为(13.7±4.9),(30.6±5.2)L·h-1(P<0.01),Ccr与CLT、AUC、t1/2相关(γ分别为0.52、-0.44、-0.47,均P<0.01)。两药的CLT比值:SBT/CFZ分别为(3.43±1.42),(5.52±1.52)(P<0.01)。说明老年人对CFZ/SBT清除下降,以SBT为显著。结论老年的肾功能轻度减退,可造成CFZ/SBT药代动力学改变,SBT更明显。
- 齐慧敏魏敏吉赵彩芸吕媛张朴刘燕李天云王鹏远刘玉村李家泰
- 关键词：肌酐清除率药代动力学
- 外科监护室耐药大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因型研究被引量：7
- 2004年
- 目的：了解外科监护室产生超广谱β-内酰胺酶(extended-spectram β-lactamases，ESBLs)的大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌的耐药性和基因型。方法：琼脂稀释法测定临床分离株的最小抑菌浓度(minimal inhibitory concentra-tion，MIC)值，分别用 TEM、SHV 和 CTX-M 的特异性引物扩增临床菌株和接合子的超广谱β-内酰胺酶基因。接合试验提取接合子质粒进行聚合酶链反应(polymerase chain reaction，PCR)，产物测序，确定基因类型。结果：93.5%的菌株含 CTX-M 基因，38.7%的菌株含 SHV 基因，87.1%的菌株含 TEM 基因。测序明确了 TEM-1，CTX-M-1，3，14，22等基因类型。结论：外科监护室大肠杆菌和肺炎克雷伯杆菌产超广谱β-内酰胺酶的基因以 CTX-M 为主。
- 王鹏远刘玉村赵敏孙丽颖罗文毅高红桥万远廉
- 关键词：肺炎克雷伯杆菌外科监护室CTX产超广谱Β-内酰胺酶合子
