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南京市医学科技发展项目(ykk05104)
作品数:
1
被引量:2
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相关作者:
王殿忠
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2008
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RNA干扰下调NF-κB p65基因表达诱导胰腺癌细胞株PANC-1的凋亡
被引量:2
2008年
目的运用RNA干扰(RNA interference,RNAi)技术下调胰腺癌细胞株PANC-1中NF-κB p65基因表达,并评价其对肿瘤细胞凋亡的影响。方法利用阳离子脂质体LipofectamineTM2000将化学合成的人NF-κBp65的小干扰RNA(small interference RNA,siRNA)转染入胰腺癌细胞株PANC-1中。采用RT-PCR法测定细胞内NF-κB p65mRNA的表达,酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测NF-κB亚单位p65的DNA结合活性的改变,运用Hoechst33258核染色、流式细胞仪和透射电子显微镜检测p65基因表达下调对PANC-1细胞凋亡的影响。结果化学合成的人NF-κB p65siRNA能有效地抑制PANC-1细胞中NF-κB p65mRNA的表达(P<0.01),同时ELISA结果显示,RelA siRNA组的p65亚单位与DNA结合活性明显低于对照组(P<0.05)。Hoechst33258核染色、流式细胞仪和透射电子显微镜检测发现下调p65基因表达能够诱导PANC-1细胞的凋亡。结论体外实验初步证明了NF-κB p65基因在胰腺癌细胞凋亡调控方面扮演重要角色,通过沉默其表达可诱导胰腺癌细胞的凋亡。
王殿忠
谢敏
潘一明
朱海涛
关键词:
RNA干扰
NF-ΚB
PANC-1细胞
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