国家自然科学基金(30872710)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：武晓静黄岚宋明宝姜洪匡春燕更多>>
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- Jagged1真核表达质粒构建及其对VSMCs增殖凋亡的影响被引量：2
- 2011年
- 目的构建大鼠Jagged1真核表达质粒,分析Jagged1过表达对血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecells,VSMCs)增殖和凋亡的影响。方法从带Jagged1全长基因质粒pBOS-SN3T中酶切获得目的基因,用载体pCMV-IRES-GFP构建重组质粒,转染至VSMCs。Western blot检测Jagged1蛋白表达变化,[3 H]-TdR掺入法检测细胞增殖,流式细胞仪(FACS)检测细胞凋亡。结果成功构建大鼠Jagged1真核表达载体并转染至VSMCs,经G418筛选后转染率可达90%以上,转染上调了VSMCs的Jagged1蛋白水平约6倍。转染p-rJagged1后VSMCs的增殖能力明显降低[(10 265±1 004)cpm/孔vs(17 584±1 587)cpm/孔,P<0.01],而凋亡明显增高[总凋亡率:(32.35±2.86)%vs(15.24±1.27)%;早期凋亡率:(22.47±2.54)%vs(10.22±0.98)%;P<0.01]。结论成功构建大鼠Jagged1真核表达质粒,过表达Jagged1可抑制VSMCs增殖并促进其凋亡。
- 钱德慧武晓静姜洪匡春燕王逵宋明宝黄岚
- 关键词：平滑肌细胞细胞增殖NOTCH通路
- 老年大鼠损伤血管过度增殖与内皮Jagged1表达的关系
- 2008年
- 目的探讨增龄促进大鼠损伤血管过度增殖与内皮Jagged1表达的关系。方法健康雄性SD大鼠（幼年3月龄，老年22月龄）40只随机分为对照组和胸主动脉球囊损伤组各20只，胸主动脉球囊损伤组分别于术后，术后7、14、28d（每个时间点老年与幼年组分别为5只）取靶血管行免疫组化染色观察内皮Jagged1和新生内膜增殖细胞核抗原（PCNA）的动态变化，计算28d时新生内膜与中膜比值。培养大鼠主动脉内皮和平滑肌细胞，用流式细胞法分析年龄对内皮Jagged1表达率的影响，并将内皮接种于下室、平滑肌和上室建立共培养体系，用^3H-TdR掺入和平滑肌迁移计数检测不同月龄大鼠内皮对血小板源生长因子（PDGF）刺激的平滑肌增生迁移的影响。结果老年大鼠新生内膜与中膜比值明显高于幼年大鼠（分别为0．35±0．02与0．28±0．01，P〈0．01）；与幼年大鼠比较，老年大鼠再生内皮Jagged1呈上调延迟并迅速下降的变化模式，而PCNA升高幅度大、维持时间长；流式细胞分析结果表明，老年大鼠内皮Jagged1表达率（46．6±6．3）％，低于幼年大鼠的（85．4±4．0）％，P〈0．05；PDGF（10ng／ml）能显著促进幼年和老年内皮组平滑肌细胞增生迁移，但与老年大鼠内皮共培养的平滑肌增生迁移更明显[^3H—TdR掺入：（26438±1857）cpm／孔与（16698±2076）cpm／孔，P〈0．05；迁移：（32±4）个／高倍视野与（18±5）个／高倍视野，P〈0．05]。结论老年大鼠血管损伤后内皮Jagged1上调障碍，与老龄促进平滑肌增生迁移密切相关，提示Jagged1可能参与了老龄加重损伤血管过度增殖的调控。
- 武晓静周骐孙爱军王克强邹云增葛均波
- 关键词：血管内膜内皮血管
