吉林省自然科学基金(201115106)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：王娜赵超悦李江秦晖杨柳更多>>
- 相关机构：东北师范大学吉林大学口腔医院更多>>
- 发文基金：吉林省自然科学基金吉林省科技厅科技发展计划项目长春市科技局科研基金更多>>
- 相关领域：生物学理学更多>>
- EMMPRIN磷酸化突变质粒的构建及功能检测
- 2014年
- 利用聚合酶链式反应(PCR)定点诱变技术,对细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)的2个磷酸化位点进行突变,构建了EMMPRIN磷酸化位点突变质粒.对其功能进行检测发现,EMMPRIN磷酸化位点突变质粒可在细胞内正常表达.研究结果显示,突变质粒可抑制肿瘤细胞的增殖(P<0.05),表明EMMPRIN可能与肿瘤细胞的增殖相关.
- 赵超悦王娜王娟婧贺玺李江
- 关键词：点突变磷酸化
- EMMPRIN糖基化突变质粒的构建及功能检测被引量：1
- 2014年
- 目的:构建细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)糖基化位点突变质粒,探讨其与肿瘤细胞增殖的关系。方法:利用PCR定点诱变技术构建EMMPRIN糖基化位点突变质粒。突变成功后,对突变质粒进行功能检测,Western blotting法检测EMMPRIN蛋白表达;免疫荧光法检测细胞形态学变化;MTT法检测突变质粒与肿瘤细胞增殖的关系。结果:酶切鉴定和测序证实,将EMMPRIN序列中第44、152和186位的天冬酰胺突变成谷氨酰胺,成功构建EMMPRIN/GFP(N44Q)、EMMPRIN/GFP(N152Q)和EMMPRIN/GFP(N186Q)糖基化单点突变质粒;糖基化位点突变后,突变型细胞核分裂相显著减少,伪足数减少;MTT法检测,与对照组比较,野生型组细胞存活率明显升高(P<0.05);而EMMPRIN糖基化位点突变后,与野生型比较,EMMPRIN(N44Q)、EMMPRIN(N152Q)和EMMPRIN(N186Q)细胞存活率均明显降低(P<0.05)。结论:EMMPRIN突变型能抑制肿瘤细胞的增殖,且随作用时间增加,抑制作用减弱;EMMPRIN糖基化修饰与肿瘤细胞的增殖有关联。
- 赵超悦宋润敏秦晖王娜杨柳李江
- 关键词：细胞外基质金属蛋白酶诱导因子点突变糖基化细胞增殖
