国家自然科学基金(81130065)
- 作品数：9 被引量：30H指数：3
- 相关作者：吴宗贵梁春贺治青伍锋厉娜更多>>
- 相关机构：第二军医大学中国人民解放军中国人民解放军海军更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 丙烯腈对心肌细胞的毒性作用及机制研究被引量：1
- 2018年
- 目的研究不同浓度丙烯腈(ACN)对大鼠心肌细胞H9c2生长、增殖、坏死、凋亡的影响及可能的机制。方法 2013年1月一2015年6月于复旦大学附属金山医院中心实验室进行实验,经过初筛,选用ACN 5个不同浓度梯度设组,分别为0、30、100、300、1 000μg/ml组,各组与大鼠心肌细胞H9c2细胞共孵育24 h,并分别观察心肌细胞H9c2形态学、细胞活力检测、乳酸脱氢酶(LDH)活性检测、细胞凋亡与坏死,并检测心肌细胞内miRNA208a和miRNA21的表达。结果 ACN 100、300、1 000μg/ml组对心肌细胞活力随浓度上升而下降(F=31.675,P=0.000)。ACN 100、300、1 000μg/ml组心肌细胞的破坏导致LDH的释放随浓度上升而增加(F=76.126,P=0.000)。各浓度染毒组细胞以坏死为主,凋亡比例最高不超过4%,各组间比较心肌细胞坏死均有显著差异(=28.671,P=0.000),各组间细胞凋亡无显著差异(F=218.826,P=0.653)。各组间比较心肌细胞miRNA208a及miRNA21表达均有显著差异,各浓度ACN染毒均可引起心肌细胞miRNA208a及miRNA21表达的下调(F=8.525、7.451=0.000)。结论ACN对大鼠心肌细胞H9c2有明显毒性作用,在细胞形态、细胞活力以及细胞破坏导致释放的LDH活性、细胞坏死等方面均有显著影响,miRA208a及miRVNA21可能参与了ACN对心肌细胞毒性作用的调控。
- 梁鑫伍锋龚辉梁春吴宗贵
- 关键词：丙烯腈毒性作用心肌细胞
- 洛伐他汀联用格列本脲可改善高糖诱导损伤的HUVEC功能
- 2016年
- 目的:探讨洛伐他汀与格列本脲联合用药对高糖诱导损伤的人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的功能的影响及其机制。方法:以体外培养至第三代的HUVEC为研究对象,分四为:1空白对照组;2高糖组(33 mmol/L);3高糖组(33 mmol/L)+洛伐他汀(2μmol/L)组;4高糖组(33 mmol/L)+洛伐他汀(2μmol/L)+格列本脲(0.2μmol/L)组。用transwell小室法检测HUVEC的迁移功能,用细胞流式仪检测HUVEC内氧自由基(O^(2-))以及一氧化氮(NO)的表达水平。结果:与对照组相比,高糖组HUVEC迁移功能明显受损(P<0.01);洛伐他汀单独用药组及其与格列本脲的联合用药组均能改善高糖损伤的HUVEC的迁移功能(均为P<0.01)。流式结果显示,与对照组相比,高糖组HUVEC内O^(2-)水平明显增加而NO表达水平明显降低(均为P<0.01);两组给药组HUVEC内O^(2-)水平及NO表达水平相对于高糖组均有明显改善(均为P<0.01)。结论:洛伐他汀单独用药及其与格列本脲的联合用药均能改善高糖损伤的HUVEC的迁移功能,可能与改善细胞内氧化应激水平有关。
- 陈林王丹宁伍峰梁鑫贺治青梁春
- 关键词：糖尿病血管病变洛伐他汀格列本脲人脐静脉血管内皮细胞
- 病理环境下血管内源性修复干细胞功能异常的机制及干预研究
- <正>背景:血管损伤修复的平衡在动脉粥样硬化(AS)发生发展和稳定消退中发挥重要作用。除传统的血管内皮损伤后'由内而外'机制外,还存在血管外膜的'由外而内'修复,内源性修复干细胞-外周血内皮祖细胞和来源外膜的脂肪干细胞的...
- 梁春贺治青吴宗贵
- 文献传递
- 中性粒细胞与淋巴细胞比值评估冠心病预后被引量：7
- 2015年
- 固有免疫和适应性免疫共同参与了动脉粥样硬化病变的形成和发展。中性粒细胞在动脉粥样硬化斑块形成中发挥了重要作用。临床研究表明,中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil-lymphocyte ratio,NLR)具有快速、经济、相对稳定的优势,能客观地评价机体的免疫炎症状态。NLR在预测冠心病患者冠状动脉病变严重程度和心血管并发症方面的临床价值,越来越受到关注。
- 黄帅波代现良贺治青厉娜梁春吴宗贵
- 关键词：动脉粥样硬化冠状动脉粥样硬化性心脏病中性粒细胞淋巴细胞免疫
- 血红素结合蛋白与心血管相关疾病关系的研究进展被引量：2
- 2017年
- 血红素结合蛋白(Hx)是一种主要在肝脏中合成的血浆急性期糖蛋白,其与游离血红素具有高亲和力,介导循环中超载游离血红素的清除,该作用主要是通过与游离血红素形成复合物,经由特异性受体介导转入细胞降解而发挥抗氧化和减轻组织损伤的作用。研究表明,在多种疾病中Hx水平异常。特别是近年来,对于Hx的研究不断取得新的进展,极大展现出将其应用于心血管相关疾病治疗的临床潜力,诸如动脉粥样硬化、缺血性脑卒中、多发性硬化等,针对Hx的干预可显著改善上述疾病动物模型的预后。文章就Hx对心血管相关疾病的转归调控作用进行综述。
- 苏继源李奇恒贺治青梁春吴宗贵
- 关键词：血红素心血管疾病
- 晚期糖基化终产物对内皮祖细胞功能及成骨分化的影响被引量：2
- 2016年
- 目的观察糖尿病机体主要的晚期糖基化终产物亚型-Nε羧甲基赖氨酸修饰白蛋白(CMLs)对内皮祖细胞(EPCs)功能及成骨分化作用的影响。方法采用密度梯度离心法从外周单个核细胞中分离、培养得到EPCs,通过观察细胞形态和流式细胞仪检测细胞表面标记鉴定。进一步采用CCK-8增殖试剂盒、Annexin V-FITC/PI流式凋亡试剂盒、transwell小室迁移实验分别观察空白对照组、BSA对照组(100μg/mL)、不同浓度CML-BSA组(20μg/mL、40μg/mL、60μg/mL、80μg/mL、100μg/mL),共7组干预液对EPCs增殖、凋亡、迁移功能的影响。并检测成骨相关钙化基因BMP-2、ALP、RUNX-2和OCN的表达量,观察其对EPCs成骨分化能力的影响。结果与BSA对照组相比,CML-BSA能显著抑制EPCs增殖和迁移的能力,增加凋亡,促进其成骨分化(P<0.05),其中80μg/mL浓度变化最明显(P<0.05);与BSA对照组相比,CML-BSA能显著增加成骨相关钙化基因BMP-2、ALP、RUNX-2和OCN的表达量,呈现浓度依赖性递增,80μg/mL浓度变化最大(P<0.05),100μg/mL浓度呈现下降趋势(P<0.05)。结论 CMLs能抑制EPCs的增殖和迁移能力,增加其凋亡,显著促进EPCs成骨分化。深入研究有助于探索糖尿病血管钙化机制,为临床干预提供新靶点。
- 汪沁沁岳温恒伍锋贺治青梁春吴宗贵
- 关键词：糖尿病内皮祖细胞晚期糖基化终产物成骨分化
- 晚期糖基化终产物对脂肪干细胞功能、血管新生能力的影响及丹红注射液保护作用的实验研究被引量：3
- 2014年
- 目的观察糖尿病机体主要的晚期糖基化终产物亚型-Nε羧甲基赖氨酸修饰白蛋白[Nε-(carboxymethyl)lysine albumin,CMLs]对脂肪干细胞(adipose tissue-derived stem cells,ADSCs)功能及血管新生作用的影响及丹红注射液(Danhong Injection,DH)的保护作用。方法采用酶消法从人皮下脂肪组织中分离培养人ADSCs,并通过光学显微镜进行形态学观察、分化能力评估。进一步采用WST-1增殖试剂盒、Transwell小室、流式AnnexinⅤ-FITC/PI凋亡检测试剂盒以及人VEGF的ELISA试剂盒分别观察对照组、BSA组(60μg/mL)、CML-BSA组(60μg/mL)、DH组(100μL/mL)、联合用药组(60μg/mL CML-BSA加100μL/mL DH),共5组干预液对ADSCs增殖、迁移、凋亡和分泌功能的影响。并通过体外血管新生实验观察其对ADSCs血管新生能力变化情况的影响。结果与BSA组比较,CML-BSA组能显著抑制ADSCs增殖和迁移的能力,增加凋亡,减少VEGF的分泌,减弱其血管新生能力(P<0.05);与对照组比比较,100μl/mL DH能显著促进ADSCs增殖和迁移的能力,抑制其凋亡,增加VEGF的分泌,改善其血管新生能力(P<0.05);与CML-BSA组比较,联合治疗组能显著逆转CML-BSA对ADSCs增殖和迁移能力的抑制作用,改善CML-BSA对ADSCs凋亡的促进作用,增加VEGF的分泌,提高其血管新生能力(P<0.05)。结论 CMLs能抑制ADSCs的增殖和迁移能力,促进其凋亡,抑制其血管新生能力。DH能改善CMLs的作用。
- 伍锋贺治青纪睿圳王新梁春吴宗贵
- 关键词：丹红注射液脂肪干细胞晚期糖基化终产物血管新生
- 新型复方制剂斑晓胶囊对内皮祖细胞刺激活化的影响被引量：2
- 2015年
- 目的观察新型复方制剂斑晓胶囊对小鼠骨髓源性内皮祖细胞(endothelial progentor cells,EPCs)的刺激活化作用。方法以不同浓度的斑晓胶囊制剂处理小鼠骨髓源性EPCs细胞后,用CCK-8法检测细胞增殖,采用流式细胞术的方法鉴定内皮祖细胞表面抗原CD-34、VEGFR-2的表达,采用Transwell法检测EPCs迁移功能,采用Western blot法检测Bcl-2/Bax蛋白水平的变化。结果在所设加样量范围内,斑晓胶囊低剂量组和高剂量组与对照组相比,鼠源性EPCs的生长增殖能力增强(P<0.05),CD-34及VEGFR-2双阳性表达逐渐增多(P<0.05),Bcl-2蛋白水平上升,Bax蛋白水平下降,并呈浓度依赖性。结论斑晓胶囊可促进小鼠骨髓源性EPCs的增殖,其机制可能与通过提高Bcl-2/Bax比值,抑制细胞凋亡有关。
- 王贤吴宗贵
- 瑞舒伐他汀对晚期糖基化终产物修饰的低密度脂蛋白诱导肥大细胞活化的影响及其机制被引量：2
- 2021年
- 目的探讨瑞舒伐他汀对晚期糖基化终产物修饰的低密度脂蛋白(AGE-LDL)刺激肥大细胞活化的影响及相关分子机制。方法2019年6月—2020年12月于中国人民解放军海军军医大学中心实验室进行实验。以重组鼠白介素-3(rmIL-3)和重组鼠干细胞因子(rmSCF)体外诱导小鼠骨髓细胞向肥大细胞分化。收集细胞分为Control组(加入PBS)、不同浓度AGE-LDL组(0.5、5、50μg/ml)、n-LDL组、LPS组、不同浓度瑞舒伐他汀组(1、10、50 mmol/L),用不同浓度的瑞舒伐他汀及AGE-LDL预处理分化成熟的肥大细胞,分别用RT-PCR及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肥大细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素6(IL-6)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的基因表达和蛋白水平;采用Western-blot法检测瑞舒伐他汀及相关信号通路抑制剂对AGE-LDL刺激的丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路的影响。结果与Control组比较,AGE-LDL组可呈浓度依赖性地刺激肥大细胞分泌TNF-α、IL-6和MMP-9 mRNA表达,差异具有统计学意义(F=47.050、71.320、574.320,P均=0.000),其中50μg/ml亚组表达量最高,而非糖化低密度脂蛋白(n-LDL)组差异无统计学意义(P>0.05)。瑞舒伐他汀能够呈浓度依赖性抑制上述指标mRNA表达(F=63.050、33.610、68.480,P均=0.000),并抑制TNF-α、IL-6、MMP-9分泌(t/P=28.190/0.000、19.900/0.000、19.550/0.000)。AGE-LDL能够促进p38、ERK1/2、p65磷酸化(t/P=9.640/0.002、13.380/0.001、6.110/0.001),对JNK磷酸化则无影响(P>0.05);瑞舒伐他汀及ERK1/2抑制剂、NF-κB抑制剂能够下调相应信号通路磷酸化及炎性因子表达(瑞舒伐他汀组:t/P=4.470/0.004、6.330/0.001、3.640/0.011;PD98059组:t=14.500、12.670、18.180,P均=0.000;PDTC组:t=19.140、15.400、23.070,P均=0.000),而p38-MAPK抑制剂则无相应抑制作用(P>0.05)。结论瑞舒伐他汀能够抑制AGE-LDL刺激小鼠骨髓来源肥大细胞(mBMMCs)活化分泌炎性介质,其机制可能与抑制ERK1/2和NF-κB通路有关。
- 赵馨娜刘学波吴宗贵
- 关键词：动脉粥样硬化肥大细胞瑞舒伐他汀
- 丹蒌片改善急性高脂血症大鼠血脂紊乱的实验研究被引量：11
- 2014年
- 目的研究丹蒌片治痰为先法对实验性急性高脂血症大鼠血清胆固醇(TC)和三酰甘油(TG)水平的动态影响及其机制。方法取健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠48只,随机分为6组:空白对照组,模型对照组,低、中和高剂量丹蒌片组,瑞舒伐他汀组,每组8只。各组大鼠连续给药14d后,采用经尾静脉注射Triton WR-1339加高脂喂养的方法建立急性高脂血症大鼠模型,观察造模后48h内各项血脂指标的动态变化、肝脏脂质水平和肝脏相关脂质代谢基因表达水平。结果高剂量丹蒌片组大鼠注射Triton WR-1339后8、12、24、36和48h的血清TC和TG水平均显著低于模型对照组和瑞舒伐他汀组(P值均<0.05);中剂量丹蒌片组大鼠注射Triton WR-1339后24、36和48h的血清TC和TG水平均显著低于模型对照组(P值均<0.05),36和48h的血清TC和TG水平显著低于瑞舒伐他汀组(P值均<0.05);低剂量丹蒌片组大鼠注射Triton WR-1339后24、36、48h的血清TC水平和48h的血清TG水平均显著低于模型对照组(P值均<0.05),所有时间点的血清TC和TG水平与瑞舒伐他汀组的差异均无统计学意义(P值均>0.05);瑞舒伐他汀组大鼠注射Triton WR-1339后24、36、48h的血清TC水平显著低于模型对照组(P值均<0.05),两组间各时间点的血清TG水平的差异均无统计学意义(P值均>0.05)。实验终点高剂量丹蒌片组大鼠肝脏TC和TG水平均显著低于模型对照组和瑞舒伐他汀组(P值均<0.05)。高剂量丹蒌片组大鼠肝脏乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的相对表达量显著低于模型对照组和瑞舒伐他汀组(P值均<0.05),胆固醇7α-羟化酶(CYP7A1)的相对表达量显著高于瑞舒伐他汀组(P<0.05)。结论丹蒌片能有效地降低血清TC和TG水平,且不引起肝脏脂质沉积,其机制可能与增加肝脏CYP7A1表达和减少ACC合成有关。
- 纪睿圳俞诚虹贺治青伍锋梁春吴宗贵
- 关键词：高脂血症调节血脂
