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山东省自然科学基金(2010ZRA16005)

作品数：3 被引量：4H指数：1
相关作者：沈志强董林谢金文王艳萍王金良更多>>
相关机构：山东省滨州畜牧兽医研究院更多>>
发文基金：山东省自然科学基金更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 3篇中文期刊文章

领域

  • 2篇农业科学
  • 1篇生物学

主题

  • 1篇蛋白
  • 1篇调节性
  • 1篇调节性T细胞
  • 1篇诊断试剂
  • 1篇诊断试剂盒
  • 1篇试剂
  • 1篇试剂盒
  • 1篇稳定剂
  • 1篇细胞
  • 1篇免疫
  • 1篇免疫抑制
  • 1篇节性
  • 1篇机体
  • 1篇间接ELIS...
  • 1篇N蛋白
  • 1篇PCV2
  • 1篇PRRSV
  • 1篇ELISA试...
  • 1篇ELISA试...
  • 1篇FOXP3

机构

  • 3篇山东省滨州畜...

作者

  • 3篇董林
  • 3篇沈志强
  • 2篇王艳萍
  • 2篇王金良
  • 2篇谢金文

传媒

  • 2篇中国兽医学报
  • 1篇中国动物传染...

年份

  • 2篇2012
  • 1篇2010
共 3 条 记 录，以下是 1-3
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排序方式：
Foxp3结构、功能及其在机体免疫抑制中的作用被引量：1
2010年
Foxp3特异性表达于胸腺、脾脏和淋巴结等淋巴器官和组织中的CD4+CD25+调节性T细胞(regulatory T cells,Treg)表面,在诱导CD4+CD25+Treg发育、分化与功能发挥中起重要的作用,它通过调控Treg的转录和蛋白表达参与机体稳态机体,在感染免疫、肿瘤免疫及自身免疫病中发挥重要作用。本文就Foxp3分子结构、功能及其在免疫抑制中的作用机制作一综述。
董林王艳萍王金良沈志强谢金文
关键词：FOXP3调节性T细胞免疫抑制
PRRSV重组N蛋白表达、纯化及间接ELISA检测试剂盒的研制被引量：2
2012年
采用RT-PCR扩增出大小409bp猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白基因(PRRSV N gene),将该基因克隆到表达载体pGEX-KG,构建重组表达载体pGEX-KG-N,转化表达菌株BL21(DM3)诱导表达,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组N蛋白获得了高效表达,融合蛋白相对分子质量为41 000,并具有良好的免疫学活性。扩大诱导培养,收集菌体,提取包涵体,用GST-Protein Purtification Kit亲和层析纯化目的蛋白,SDS-PAGE电泳检测纯度达到90%以上,可满足诊断抗原质量要求。用纯化PRRSV重组核衣壳蛋白GST-N为包被抗原,建立检测PRRSV血清的间接ELISA诊断方法,并组装ELISA试剂盒。优化后抗原最适包被质量浓度为2.5mg/L;血清最适稀释度为1∶100;对血清样本检测临界值为0.224;与美国IDEXX公司的HerdChek ELISA试剂盒符合率为92%,特异性为95%,敏感性为90%;与猪细小病毒、猪伪狂犬病病毒、猪乙型脑炎病毒、猪圆环病毒、猪瘟病毒等常见猪繁殖障碍病标准阳性血清无交叉反应。ELISA试剂盒批内和批间变异系数分别为3.44%～6.34%和5.04%～7.64%。置4℃条件保存12个月,试剂盒稳定性无明显改变。该试剂盒对350份临床疑似血清检出率为88.6%。研制的ELISA试剂盒为PRRSV临床血清抗体检测及流行病学调查提供了技术手段。
董林王艳萍谢金文沈志强祖立闯
关键词：PRRSVN蛋白ELISA试剂盒
PCV2ELISA诊断试剂盒稳定剂的筛选与应用被引量：1
2012年
为进一步提高猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)间接ELISA诊断试剂稳定性,以纯化的PCV2重组Cap蛋白0.625mg/L包被酶标板,通过经验法和方阵法将甘油、蔗糖、PEG4000、海藻糖、明胶、EDTA等组成不同配比的抗原包被、酶结合物和标准对照品稳定剂,通过在4℃和37℃条件下试剂盒的稳定性试验,使用4P拟合曲线等分析其效果,以期筛选出最佳稳定剂配组。结果显示,1%蔗糖、20%甘油、0.000 5%MgCl2和1%蔗糖、0.2%BSA、1.0%海藻糖、0.1%PEG4000、0.02mol/L PMSF及0.1%明胶、0.1%EDTA、1%海藻糖、8%甘油、1.3%氯化钠分别为最佳抗原包被、酶标抗体和标准对照品的稳定剂。使用该稳定剂组装的PCV2ELISA试剂盒放置在4℃条件下8个月和37℃条件下8d,其D450值4P数据分析R2值均在0.99以上,说明配制的试剂盒稳定剂对ELISA试剂具有良好的保护作用,在4℃条件下有效期可达8个月。
董林王金良张春玲沈志强
关键词：PCV2试剂盒稳定剂
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