国家自然科学基金(81073152) 作品数:22 被引量:127 H指数:8 相关作者: 李灵芝 龚海英 李建宇 张永亮 高宏生 更多>> 相关机构: 武警后勤学院 天津市职业与环境危害生物标志物重点实验室 武警医学院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 中国博士后科学基金 天津市应用基础与前沿技术研究计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
蕨麻正丁醇部位对EAHY926内皮细胞缺氧损伤的保护作用 被引量:8 2012年 【目的】探讨蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤的保护作用。【方法】采用人脐静脉内皮细胞株(EAHY926)建立缺氧损伤实验模型,通过MTT法测定各实验组细胞代谢率;比色法测定乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)、细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性和NO浓度;放射免疫法测定内皮素-1(endothelin-1,ET-1)的活性。【结果】3.00 mg/ml、1.50 mg/ml和0.75 mg/ml蕨麻正丁醇部位均能显著减少缺氧损伤内皮细胞LDH的外漏量,并可显著提高细胞内SOD活性,增加NO分泌、减少ET-1的生成。【结论】蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤具有显著的保护作用,其机制之一可能是清除缺氧导致的内皮细胞自由基堆积,减少ET-1的释放,增加NO分泌,从而减轻内皮细胞损伤。 龚海英 张岭 李灵芝 李广策 吕琪 李建宇 陈莉关键词:内皮细胞 缺氧 一氧化氮 内皮素-1 蕨麻醇提取物对缺氧诱发的神经母细胞瘤细胞损伤效应的拮抗作用 被引量:5 2012年 目的探讨蕨麻醇提取物对硫代硫酸钠(Na2S2O4)诱发的人神经母细胞瘤(SH-SY5Y)细胞株缺氧损伤的拮抗作用。方法取处于生长对数期的SH-SY5Y细胞,分别设空白对照(D-Hank液)组、缺氧模型(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组及1、0.25、0.062 5 g/L蕨麻醇提取物拮抗缺氧(1 mmol/L连二亚硫酸钠)组,于5%CO2、37℃孵育4 h后,采用MTT试验检测细胞活性,测定上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力,采用悬浮芯片蛋白法测定细胞内单核细胞趋化因子-1(MCP-1)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、IL-10、γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、血管内皮生长因子(VEGF)水平7种细胞因子水平。结果与空白对照组比较,缺氧模型组和各剂量蕨麻醇提取物拮抗缺氧组SH-SY5Y细胞活性下降,LDH外漏量和空泡细胞率增大,MCP-1、IL-1β、IFN-γ和TNF-α水平升高,VEGF、IL-6和IL-10含量下降。与缺氧模型组比较,各剂量蕨麻醇提取物拮抗缺氧组细胞活性升高,LDH外漏量和空泡细胞率减少,细胞因子水平发生逆转,其中,MCP-1、IL-6、IFN-γ的改变以1 g/L组最为明显,IL-1β、IL-10、TNF-α、VEGF的变化以0.062 5 g/L组明显。结论蕨麻醇提取物可拮抗连二亚硫酸钠所致SH-SY5Y细胞缺氧损伤效应。 黄菲 高宏生 何文彤 唐琼琳 李素平关键词:硫代硫酸钠 乳酸脱氢酶 缺氧 细胞因子 一种高成活率培养大鼠原代心肌细胞的方法 被引量:1 2014年 【目的】探讨原代心肌细胞培养的条件和方法。【方法】取新生1~3d的SD大鼠心室肌,O.25%胰蛋自酶-0.02%EDTA消化后,培养于DMEM—F12培养液中,用差速贴壁法和化学抑制法相结合去除非心肌细胞。倒置显微镜下观察形态学变化,透射电镜观察细胞超微结构。【结果】培养的心肌细胞平均存活率(96.33±6.73)%,培养第4天细胞搏动率达(95.3±9.2)%,并出现单层同步搏动,具有典型的心肌细胞形态特征。【结论】本研究的心肌细胞培养方法操作简便,成活率高,是一种较为理想的原代心肌细胞培养方法。 龚海英 梁林 李灵芝 张永亮 李建宇关键词:心肌细胞 原代培养 急性高原病药物防治研究进展 被引量:21 2011年 急性高原病(acute mountain sickness,AMS)是高原地区独有的常见病。我国高原地区辽阔,海拔3 000 m以上的地区约占全国总面积的1/6,主要集中在青海、新疆、西藏等边疆地区。高原反应给高原军事行动及边境突发事件的处治带来了很多不利因素,尤其在玉树抗震救灾及藏区维稳行动中由于急进高原出现的高原反应对整个行动的不利影响尤为显著。因此,了解急性高原病的药物防治方法,对于更好地保障高原部队需要,增强部队战斗力,适应当前军事快速反应战略的需要很有必要, 李广策 董培 王鲁君 田军关键词:急性高原病 缺氧 药物防治 五环三萜类化合物抗HIV研究进展 被引量:3 2014年 为克服现有艾滋病治疗药物毒性大及易产生耐药性的缺点,近年来,不少学者以天然化合物为先导物进行结构改造,以期发现活性高、毒性小的新型抗艾滋病药物,其中,对五环三萜类化合物白桦酸、齐墩果酸、熊果酸C-3位羟基、C-28位羧基、以及C12-13位双键等基团进行结构改造的研究取得了一定进展,对治疗AIDS显示了巨大潜力。 张丽 李群林 李灵芝关键词:人免疫缺陷病毒 五环三萜 白桦酸 齐墩果酸 Effect of n-butanol Extract from Potentilla anserina on Hypoxia-induced Calcium Overload and SERCA2 Expression of Rat Cardiomyocytes 被引量:6 2012年 Objective To investigate the effect of n-butanol extract from Potentilla anserina(NP)intervention on hypoxia-induced Ca 2+ overload and SERCA2 expression of rat cardiomyocytes.Methods Primary cultured myocardial cell from SD neonatal rat(1-3 d)was used in the establishment of hypoxia model.After hypoxia for 3 h,the Ca 2+ concentration of myocardial cells was measured with fura-2/AM fluorescent probe,and the biochemical indicator intracellular Ca 2+ -ATPase was examined and the mRNA and its protective protein levels of the sarcoplasmic reticulum(SR)Ca 2+ -ATPases(SERCA2)were assayed with RT-PCR,Western-blotting,and immune-cytochemical staining in each group.Results The results showed that NP decreased Ca 2+ concentration, increased the activity of Ca 2+ -ATPase,and improved the mRNA and protein expression of SERCA2 in hypoxia-injured myocardial cells as compared with the model group.Conclusion These results indicate that NP could attenuate the Ca 2+ overload.The mechanism might be explained as that NP could elevate the SERCA2 level, increase the activity of myocardium in rats,and further enhance the capacity of SR Ca 2+ re-uptake. Ling-zhi LI Lu-jun WANG Yue WANG Ying CUI Jian-yu LI Li ZHANG Yong-liang ZHANG关键词:CARDIOMYOCYTE HYPOXIA 蕨麻正丁醇部位下调缺氧内皮细胞HIF-1α及ET-1表达 被引量:10 2015年 [目的]探讨蕨麻正丁醇部位对内皮细胞缺氧损伤的保护机制。[方法]采用人脐静脉内皮细胞(EA.hy926)建立缺氧损伤实验模型,实验设常氧对照组、缺氧模型组、高(3.00 g/L)、中(1.50 g/L)、低浓度(0.75 g/L)蕨麻正丁醇部位组,复方丹参(3.0 g/L)组。胎盘兰染色法测定各组细胞存活率;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测各组缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)m RNA和内皮素-1(ET-1)m RNA表达,免疫细胞化学染色及Western Blot方法检测HIF-1α蛋白表达。放免法测定培养基中ET-1的活性。[结果]与对照组比较,缺氧模型组细胞存活率显著降低,HIF-1α和ET-1m RNA及蛋白表达增加(P<0.01);蕨麻正丁醇部位各剂量组与缺氧模型组比较,细胞存活率显著升高,高、中、低剂量蕨麻正丁醇部位组、复方丹参组细胞HIF-1α和ET-1 m RNA及蛋白水平显著降低(P<0.01)。[结论]在缺氧状态下,蕨麻正丁醇部位可能通过HIF-1α途径调控靶基因的表达,从而发挥保护作用。 杨硕 张岭 龚海英 张永亮 李灵芝 高宏生关键词:内皮细胞 缺氧 POTENTILLA INDUCIBLE ENDOTHELIN-1 胃蛋白酶原检测在胃部常见疾病筛查中的价值探讨 被引量:2 2016年 【目的】检测在不同消化道疾病患者血清中胃蛋白酶原(pepsinogen,PG)I、PG II以及PGR(PG I/PG II)的水平,探讨PG I、PG II及PGR对于不同胃部疾病的临床诊断价值。【方法】根据内镜下所见不同消化道疾病的胃黏膜病变特点,将患者分为5组,即:非慢性胃炎组(内镜观察患者胃黏膜正常)、慢性胃炎组、胃溃疡组、十二指肠溃疡组及胃癌组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)的方法,测定173例4种胃部疾病及十二指肠溃疡患者的血清PG I、PG II、PGR及癌胚抗原(carcino-embryonic antigen,CEA)水平。【结果】(1)PG I:与非慢性胃炎组相比,慢性胃炎组、胃溃疡组及胃癌组患者血清PG I水平均明显降低(P<0.05)。(2)PG II:与非慢性胃炎组、慢性胃炎组以及胃溃疡组患者相比,胃癌组患者和十二指肠溃疡组患者血清PG II水平均明显升高(P<0.05)。(3)PGR:与非慢性胃炎组相比,慢性胃炎组、胃溃疡组、胃癌组及胃十二指肠溃疡组患者血清PGR值均明显下降(P<0.05)。(4)CEA:与非慢性胃炎组相比,胃癌组患者血清CEA水平明显升高(P<0.05)。【结论】PG I、PG II及PGR对于消化道疾病的辅助诊断具有重要的参考价值。 王彤 苏畅 李建宇 李灵芝关键词:消化道疾病 胃蛋白酶原I 胃蛋白酶原II 天然产物抗氧化活性体内外评价方法 被引量:8 2013年 准确评价天然产物的抗氧化活性是目前抗氧化研究领域中的热点问题。本文对天然产物抗氧化活性体内外评价方法及其基本原理进行综述,旨在为天然产物的抗氧化活性评价提供一套系统而有效的评价体系。 张文彬 龚海英 张丽 李灵芝关键词:抗氧化 急性高原缺氧大鼠肺组织损伤及其机制研究 被引量:5 2013年 【目的】通过建立低压缺氧模型,模拟急性高原缺氧损伤,观察不同缺氧时间点大鼠肺组织损伤情况。【方法】选取清洁级雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、缺氧6、12及24 h组。利用数控低压缺氧舱,建立急性高原缺氧损伤模型,通过HE染色观察大鼠肺组织形态学改变,利用干湿比重法检测肺组织含水量,采用生化手段检测血清乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)及过氧化氢酶(catalase,CAT)活性,应用Western blotting技术检测肺组织水通道蛋白(aquaporin,AQP)1/4的表达情况。【结果】HE染色:正常对照组可见多边形或圆形薄壁囊泡,边界清楚,肺泡上皮细胞间为薄壁肺泡隔,隔内可见毛细血管断面,各低压缺氧组肺泡上皮细胞明显肿大,肺泡壁增厚,肺间隔内毛细血管扩张;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺含水量显著升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高;与正常对照组相比,各缺氧组大鼠血清LDH活性显著升高(P<0.01),CAT活性显著下降(P<0.05或P<0.01);与正常对照组相比,各缺氧组大鼠肺组织中AQP1/4蛋白表达量均明显升高(P<0.01),且随缺氧时间的延长而逐渐增高。【结论】急性高原缺氧可造成实验大鼠肺水肿,且损伤程度与缺氧时间密切相关,其机制可能为上调水通道蛋白(AQP)1/4的表达所致。 祁玉婷 郭鹏 李建宇 高宏生 李灵芝关键词:高原缺氧 水通道蛋白1 水通道蛋白4