国家自然科学基金(30772570)
- 作品数：7 被引量：16H指数：3
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- 重构新型血管内皮生长因子在毕赤酵母中的表达、纯化与功能鉴定
- 2010年
- 血管内皮细胞生长因子为内皮细胞特异的刺激因子,在缺血治疗中具有应用前景.本文通过PCR的方法将VEGF165纤溶酶酶切位点突变并将肝素结合域融合到VEGF165的C末端,且将其进行了酵母表达,并纯化了酵母表达产物,对它的生物活性进行了初步鉴定.结果表明,改构的VEGF可形成蛋白二聚体,且仍保留体外刺激血管生成的能力.VEGF的重构成功与表达产物的获得,为进一步研究其功能奠定了基础.
- 张会勇孟雨菡刘景晶曹荣月李泰明
- 关键词：酵母血管内皮生长因子
- S-腺苷蛋氨酸抗小鼠H22肝癌作用研究
- 2011年
- 探讨S-腺苷蛋氨酸(SAM)能否抑制小鼠H22肝癌。通过建立H22小鼠肝癌模型,SAM预防及治疗,检测皮下抑瘤率、皮内肿瘤微血管新成、肺转移等指标对其抗肿瘤作用机理进行部分探讨。结果显示,SAM对H22肿瘤攻击起到有效地保护作用,与PBS阴性对照组相比,预防组和治疗组肿瘤生长缓慢,平均瘤重显著降低(P<0.01),抑瘤率达到70%以上;有效地抑制了小鼠皮内模型中的微血管新生(P<0.01);同时在一定程度上减少了小鼠的肺转移(P<0.05)。SAM通过抑制肿瘤血管生长表现出有效的抑制小鼠H22肝癌作用。
- 姚毅张宇张帆侯景罗新龙曹荣月金亮吴洁刘景晶
- 关键词：S-腺苷蛋氨酸H22肝癌抑制血管生成肺转移
- 一种新型速效人胰岛素类似物的制备及药效学研究被引量：3
- 2009年
- 制备一种新型速效胰岛素类似物PInsulin(PIns),利用Autoflex ToF/ToF质谱法对其进行鉴定,采取福林-酚试剂法测定其浓度;以人胰岛素、赖脯胰岛素作为对照品肌肉注射测定其对雄性SD大鼠的降血糖作用,并通过分子筛层析法考察其自聚合性质。质谱法测得PIns的Mr为6286.50,浓度为0.227mg/ml;动物实验表明注射PIns后,大鼠血糖降至最低基础血糖浓度百分数和恢复至基础血糖浓度所需时间均显著小于人胰岛素(P<0.01);注射PIns后基础血糖浓度百分数的最低值与人胰岛素相当;分子筛层析法结果显示PIns的滞留时间大于人胰岛素,表明PIns自身聚合能力低于人胰岛素,是一种具有良好发展前景的新型速效胰岛素类似物。
- 尤科军鲁勇林明孔婧曹荣月刘景晶范豪宗莉
- 关键词：胰岛素类似物降血糖
- VEGF183(132-158)肽段作为蛋白缓释药物载体的细胞外基质结合研究被引量：2
- 2010年
- 人血管内皮生长因子VEGF183(132-158)肽段含有细胞外基质结合序列与纤溶酶、基质金属蛋白酶以及uPA酶裂解位点,研究该肽段作为一种蛋白药物的缓释载体,在体内既可和细胞外基质结合,又可在体内的相应酶作用下,缓慢释放。该研究以绿色荧光蛋白GFP为指示分子,进一步采用加端PCR方法将VEGF183(132-158)肽段连到GFP的C端,原核表达并纯化该融合蛋白,通过与琼脂糖肝素柱结合实验与冷冻切片的荧光显微镜观察,发现该肽段赋予了GFP蛋白结合琼脂糖肝素柱与细胞外基质的功能,GFP融合蛋白的获得为下一步的体内释放研究打下了基础。
- 张会勇鲁勇孟雨菡曹荣月刘景晶李泰明
- 关键词：细胞外基质
- 佐剂增强的肿瘤细胞裂解物疫苗抗小鼠H22肝癌作用被引量：3
- 2012年
- 以鼠源肝癌H22全细胞裂解物为抗原,通过化学偶联白喉毒素(DT)和串联重复的T辅助表位mH-SP70407-426肽段,混合OK432(链球菌A群)制成肿瘤全细胞疫苗H22-DT-M2-OK432(HDTMOK)。治疗性免疫结果显示,疫苗激发的免疫应答对H22肿瘤起到了有效的抑制作用。为进一步提高该疫苗的抗肿瘤效果,用偶联的疫苗制备免疫刺激复合物(ISCOM),并验证其抑瘤效果。治疗性免疫结果显示,与PBS组相比,ISCOM疫苗组平均瘤重和瘤体积显著降低(P<0.01),同时有效地抑制了小鼠皮内肿瘤模型中的血管新生(P<0.01);ELISA法从血清中检测到高滴度的抗体。且与HDTMOK疫苗相比,ISCOM疫苗抑瘤作用提升显著(P<0.05)。HDTMOK能有效抑制小鼠肝癌实体瘤生长,佐剂配伍后的疫苗对H22的抑制更为显著,能够有效提升肿瘤全细胞疫苗的抗肿瘤能力。
- 刘彬邢芸张秀华王泽宇路蕾葛驰宇张龙刘景晶曹荣月
- 关键词：H22肝癌肿瘤细胞疫苗佐剂
- 不同调控元件驱动下菊欧氏杆菌纤维素酶celY基因在大肠杆菌中表达的研究被引量：7
- 2012年
- 目的:以菊欧氏杆菌(Erwinia chrysanthemi)基因组DNA为模板,通过PCR方法找到了该菌的β-1,4-内切葡聚糖酶celY基因及其调控元件并克隆至pUC19载体。为提高纤维素酶celY基因在原核细胞中的分泌表达量,比较了由不同启动子和信号肽调控的celY基因在大肠杆菌中的表达水平。方法:分别构建了由脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽调控的多种表达载体与由纤维素酶celY基因自身的启动子和信号肽调控的表达载体相比较。结果:由脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽调控的表达载体都不同程度提高了celY基因的分泌表达量。结论:脂蛋白启动子、T7启动子、果胶酶信号肽都不失为构建强分泌表达载体的可选元件。
- 陈科黄潇路蕾邢芸侯景吴洁刘景晶
- 关键词：纤维素酶启动子信号肽分泌表达
- VEGF165过表达对小鼠乳腺癌及肿瘤周边皮肤血管生成模式的影响研究被引量：1
- 2010年
- 已证实乳腺癌细胞表达有VEGF165的第3个受体NRP1,但目前在乳腺癌细胞中过表达VEGF165对肿瘤周围血管生成模式的影响尚未有人研究.通过脂质体转染的方法得到稳定转染过表达VEGF165的细胞克隆,皮内接种研究其对周围皮肤生血管模式的影响.结果显示VEGF165在乳腺癌中过表达可使肿瘤周围皮肤产生树状血管生成模式,且会诱导不成熟的血管生成并致出血.稳定过表达VEGF165的乳腺癌克隆的建立,为进一步研究过表达VEGF165对乳腺癌的影响奠定了基础.
- 张会勇刘景晶张笑岩曹荣月李泰明
- 关键词：乳腺癌VEGF过表达
