国家自然科学基金(30271516)
- 作品数：10 被引量：29H指数：3
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- 塞来昔布对大肠癌细胞株HT-29增殖和凋亡的影响被引量：1
- 2004年
- 目的 :体外观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT 2 9细胞增殖和凋亡的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法采用噻唑蓝 (MTT)比色法 ,流式细胞仪 (FCM)、吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜、Western印迹法等技术 ,研究塞来昔布对HT 2 9细胞增殖抑制的影响。结果 :体外塞来昔布抑制HT 2 9细胞生长 ,呈浓度和时间依赖性。DNA直方图示典型的亚二倍体“凋亡峰” ,凋亡率在 (7.31± 2 .37) %～ (4 8.30± 2 .86 ) % ;塞来昔布使G0 /G1期细胞比例升高 ,S期和G2 /M期比例下降 ,呈一定剂量效应关系。典型的凋亡形态学改变 :细胞体积缩小、细胞核固缩、凋亡小体形成等。凋亡比例呈剂量和时间依赖。塞来昔布下调细胞周期素依赖蛋白激酶CDK2 ,CDK4蛋白表达、上调细胞周期素依赖蛋白激酶抑制因子P2 1WAF1/CIP1蛋白表达。结论 :塞来昔布抑制HT 2 9细胞增殖、诱导凋亡可能与阻止细胞周期进展有关。
- 彭杰张桂英肖志强
- 关键词：塞来昔布大肠癌细胞株细胞凋亡细胞增殖CDK2
- 选择性COX-2抑制剂对大肠癌细胞生长的影响被引量：4
- 2004年
- 目的 观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT -2 9细胞增殖和凋亡的影响 ,为治疗结肠癌寻找安全有效的化疗药物。方法 采用噻唑蓝 (MTT)比色法 ,流式细胞仪 (FCM)、吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜等技术 ,研究塞来昔布对HT -2 9细胞增殖和凋亡的影响。结果 MTT比色法显示体外塞来昔布抑制HT -2 9细胞生长 ,呈浓度和时间依赖性。FCM结果显示典型的亚二倍体“凋亡峰” ,凋亡率在 ( 7 3 1± 2 3 7) %～ ( 4 8 3± 2 86) %;使G0 /G1 期细胞比例升高 ,S期和G2 /M期比例下降 ,呈一定剂量依赖关系。荧光显微镜下见典型的凋亡形态学改变 :细胞体积缩小、细胞核固缩、凋亡小体形成等。凋亡比例呈剂量和时间依赖。结论 体外塞来昔布抑制HT -2 9细胞增殖 ,并诱导细胞凋亡。
- 彭杰张桂英肖志强
- 关键词：选择性COX-2抑制剂大肠癌细胞生长细胞增殖细胞凋亡
- 吲哚美辛对结肠癌细胞成瘤裸鼠作用的蛋白质组学研究
- 2006年
- 目的研究吲哚美辛对人结肠癌细胞系HCT116成瘤裸鼠蛋白质表达谱的影响,寻找吲哚美辛抗结肠癌作用的相关蛋白。方法应用固相pH梯度双向凝胶电泳技术分离吲哚美辛处理组和未处理组HCT116成瘤裸鼠瘤组织的总蛋白,胶体考马斯亮蓝染色,图像扫描获取凝胶电泳图谱后,分析比较两组间差异表达的蛋白质,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测得经胶内胰酶酶解的差异蛋白点的肽质指纹图谱,用Mascot软件查询数据库。结果所获双向凝胶电泳图谱分辨率高、重复性好, 蛋白质点数约1100,吲哚美辛处理组与未处理组的匹配率分别为96．0％和93．6％。两组间共有31个差异表达蛋白点,吲哚美辛处理组有6个蛋白质点表达上调,25个表达下调。获得18张肽质指纹图,经查询数据库初步鉴定12个蛋白质,多数蛋白与肿瘤增殖、浸润、凋亡和肿瘤免疫等相关,包括半乳糖凝集素-1、膜联蛋白及转录因子等。结论吲哚美辛对HCT116结肠癌细胞成瘤裸鼠的作用可能与多种蛋白直接或间接相关,这些蛋白的研究有助于进一步阐明吲哚美辛抗结肠癌作用机制及肿瘤治疗药物新型靶标的发现。
- 张桂英王郁杰肖志强王红梅程艳丽
- 关键词：吲哚美辛结肠癌蛋白质组学质谱
- 塞来昔布诱导大肠癌细胞凋亡与细胞色素C依赖性信号途径活化相关被引量：11
- 2004年
- 目的 观察塞来昔布对大肠癌细胞株HT 2 9的凋亡诱导作用 ,并通过分析塞来昔布作用后的HT 2 9细胞的细胞色素C、Caspase 9和多聚ADP核糖多聚酶 (PARP)蛋白表达的变化 ,探讨其诱导大肠癌细胞凋亡的分子机制。方法 大肠癌细胞凋亡用吖啶橙 /溴化乙啶染色结合荧光显微镜、流式细胞仪 (FCM )技术测定 ,细胞色素C、Caspase 9和PARP蛋白表达用Western印迹技术检测。 结果 荧光染色法显示塞来昔布在 0～ 12 0 μmol/L呈浓度和时间依赖性诱导HT 2 9结肠癌细胞凋亡。FCM结果显示典型的亚二倍体“凋亡峰” ,凋亡率分别为 (7.31± 2 .37) %～ (4 8.30± 2 .86 ) %。塞来昔布诱导线粒体释放细胞色素C入胞质 ,激活Caspase 9,继而裂解活化PARP。结论 塞来昔布可诱导大肠癌细胞株HT 2 9细胞凋亡 ,其机制涉及细胞色素C依赖性凋亡调节信号通路。
- 张桂英彭杰肖志强唐发清
- 关键词：塞来昔布大肠癌细胞细胞色素CCASPASE-9PARP信号途径
- 吲哚美辛对人结肠癌HCT116和SW480细胞的影响被引量：3
- 2004年
- 目的 :探讨吲哚美辛对人结肠癌HCT116和SW4 80细胞的影响。方法 :体外培养细胞 ,采用MTT法分别检测吲哚美辛作用后两系细胞的生长情况 ,计算半抑浓度 (IC50 ) ;体内建立裸鼠皮下移植瘤模型 ,喂服吲哚美辛 3mg/ (kg·d)共 4周 ,隔日测瘤结节体积及鼠重 ,评价吲哚美辛的抑瘤效果。结果 :吲哚美辛作用于结肠癌HCT116和SW4 80细胞 4 8h后 ,细胞的生长均受到明显抑制 ,呈剂量依赖效应 ,IC50 分别为 (318.2± 12 .7) μmol/L和 (70 1.4± 2 9.5 ) μmol/L ;吲哚美辛显著减慢裸鼠皮下移植瘤的生长 ,用药 4周后抑瘤率达 4 4 .6 % ,未见明显毒性反应。结论 :吲哚美辛能抑制不表达环氧合酶的人结肠癌细胞 (HCT116和SW4 80 )生长 ,间接说明其抗癌作用不完全依赖环氧合酶途径 。
- 王红梅张桂英
- 关键词：吲哚美辛结肠癌HCT116细胞SW480细胞环氧合酶
- 吲哚美辛抗人结肠癌HCT116细胞双向电泳蛋白质表达谱的差异分析被引量：1
- 2005年
- 目的 分析吲哚美辛(indomethacin,IN)对人结肠癌细胞系HCT116蛋白质表达谱的影响,为研究IN抗结肠癌作用的相关蛋白提供新的方法。方法 应用固相pH梯度(immobilizedpHgradient,IPG)双向凝胶电泳技术(two dimensionalgelelectro phoresis,2 DE)分离IN 处理组和未处理组HCT116细胞的总蛋白,银染显色,ImageMaster2D图像分析软件比较分析IN 处理组和未处理组HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱并识别差异表达的蛋白质。结果 获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT116细胞系的双向凝胶电泳图谱, IN 未处理组与处理组蛋白质点数为:1256±50,1169±36;匹配率为:93.0%,90.6%。IN 未处理组的3块胶在蛋白质点位置上有较好的重复性,不同胶间蛋白质点在等电聚焦(isoelectricfocusing,IEF)方向的偏差是0.896±0.177mm,在十二烷基磺酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodiumdo decylsufate polyacrylamidegelelectrophoresis,SDS PAGE)方向的偏差为1.106±0.289mm。比较分析IN 处理组和未处理组HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱,发现IN 处理组和未处理组共有45个差异点,IN 处理组有9个蛋白质点表达上调,34个蛋白质点表达下调,2个蛋白质点仅在IN 未处理组表达。结论 首次建立了IN 处理和未处理HCT116细胞的双向凝胶电泳图谱,识别?
- 程艳丽张桂英肖志强
- 关键词：吲哚美辛蛋白质组HCT116细胞
- 吲哚美辛抗人结肠癌细胞系HCT116的功能蛋白质组研究被引量：2
- 2004年
- 目的 探讨吲哚美辛 (IN)对人结肠癌细胞系HCT116蛋白质表达谱的影响及其抗结肠癌的作用机制。方法 应用固相 pH梯度双向凝胶电泳 (2 DE)技术分离IN治疗组和对照组HCT116细胞的总蛋白 ,银染显色 ,采用ImageScan扫描获取电子图像 ,ImageMaster 2D图像分析软件分析 2组的2 DE图谱并识别差异表达的蛋白质。应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 (MALDI TOF MS)得到相应的肽质量指纹图谱 ,分析并鉴定差异蛋白质。结果 获得了背景清晰、分辨率高、重复性好的HCT116细胞系 2 DE图谱 ,对照组蛋白质点数为 12 99± 5 5 ,其匹配率为 94 .2 % ;IN治疗组蛋白质点数为 12 0 8± 4 7,其匹配率为 91.0 %。两组共有 4 5个差异蛋白质点 ,其中 ,治疗组有 9个蛋白质点表达上调 ,34个蛋白质点表达下调 ,2个蛋白质点仅在对照组表达。对差异蛋白质点进行了肽质指纹图分析发现 ,IN可通过BfL 1蛋白诱导HCT116细胞凋亡 ,并鉴定出一些与细胞凋亡、细胞周期及信号转导相关的蛋白质。结论 IN可通过BfL 1等多种途径诱导HCT116细胞的凋亡并抑制其增殖。
- 程艳丽张桂英肖志强李萃陈松
- 关键词：吲哚美辛结肠癌癌细胞系HCT116蛋白质组
- 吲哚美辛抑制结肠癌移植瘤生长和微血管形成的实验研究被引量：8
- 2004年
- 目的研究非甾体抗炎药吲哚美辛对人结肠癌HCT116移植瘤生长和微血管形成的影响。方法建立人结肠癌裸鼠皮下移植瘤模型。随机分组:治疗组喂服吲哚美辛(3 mg·kg-1·d-1),对照组给予相应体积溶剂(0.2%二甲亚砜-生理盐水溶液)。4周后处死动物,采用免疫组化法检测肿瘤微血管密度(MVD)及肿瘤组织中血管内皮生长因子(VEGF)的表达,鼠抗人CD34标记微血管。结果治疗组与对照组皮下移植瘤体积分别为(458.89±32.07)mm3和(828.21±31.59)mm3(P<0.05),治疗组肿瘤生长受到明显抑制;瘤组织中MVD分别为19.50±5.32和37.40±4.93(P<0.001),VEGF的表达强度分别为1.19±0.17和1.90±0.48(P<0.01),MVD与VEGF变化呈正相关(rs=0.714,P<0.05)。实验结束时未见明显毒性反应。结论吲哚美辛能通过抑制肿瘤微血管形成发挥抗瘤作用,其机制可能与抑制VEGF的表达有关。
- 王红梅张桂英
- 关键词：吲哚美辛结肠癌移植瘤微血管形成非甾体抗炎药
- 吲哚美辛对结肠癌细胞中细胞周期蛋白的影响被引量：1
- 2005年
- 目的体外观察吲哚美辛对含突变型p53的SW480细胞及经野生型p53转染的结肠癌细胞株SW480(wtp53/SW480)的影响,探讨吲哚美辛抗结肠癌作用的分子机制。方法不同浓度的吲哚美辛作用于细胞株,采用Western斑点免疫印迹方法,分别检测SW480细胞及wtp53/SW480细胞中CDK2、CDK4和p21WAF1/PIC1蛋白的表达水平。结果吲哚美辛作用于wtp53/SW480细胞24h后,其CDK2、CDK4蛋白表达水平随吲哚美辛浓度的增加而逐渐下调,呈浓度依赖性,以600/μmol/L时抑制作用最强;而p21WAF1/PIC1蛋白表达水平上调,其表达水平随着一定范围内吲哚美辛浓度的增加而逐渐上调,以400μmol/L吲哚美辛时作用最强,600/μmol/L时回到基础水平。在未经转染的SW480细胞中CDK2、CDK4和p21WAF1/PIC1蛋白表达没有发生明显改变。结论吲哚美辛抗结肠癌作用部分分子机制可能是通过下调CDK2、CDK4蛋白的表达和上调p21WAF1/PIC1蛋白来实现且存在p53-p21WAF1/CIP1依赖途径。
- 徐美华张桂英
- 关键词：吲哚美辛结肠肿瘤SW480细胞
- 结肠癌细胞裸鼠成瘤组织双向凝胶电泳图谱的建立与优化被引量：1
- 2008年
- 目的建立吲哚美辛处理与未处理组结肠癌HCT116细胞裸鼠成瘤组织的双向凝胶电泳图谱。方法用双向凝胶电泳技术分离吲哚美辛处理与未处理组的裸鼠瘤组织总蛋白,银染及胶体考马斯亮蓝染色,Image Scanner扫描仪扫描凝胶。结果获得了背景清晰、重复性好的双向凝胶电泳图谱,两种染色凝胶相比,上样量增加的胶体考马斯亮蓝染色凝胶蛋白质点数目及丰度增加。结论双向凝胶电泳图谱的建立与优化为研究吲哚美辛抗结肠癌作用奠定了基础。
- 王郁杰张桂英肖志强
- 关键词：双向凝胶电泳结肠癌吲哚美辛
