国家自然科学基金(30700624) 作品数:5 被引量:5 H指数:1 相关作者: 李莉娟 王敏 陈孝煊 王树云 吴志新 更多>> 相关机构: 华中农业大学 长江大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 引进国际先进农业科技计划 “十一五”国家科技支撑计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
斑点叉尾病毒(CCV)结构蛋白的鉴定 2012年 采用蔗糖密度梯度离心法分离纯化斑点叉尾病毒(Channel catfish virus,CCV),利用电喷雾-四级杆-飞行时间质谱(ESI-Q-TOF MS/MS)对得到的样品进行分析。结果共鉴定了13种结构蛋白,包含1种未报道过的结构蛋白ORF22。实验结果为进一步研究CCV结构蛋白的功能及蛋白质组学提供了参考。 毕鹏 吴志新 苏念 李莉娟关键词:CATFISH 结构蛋白 血红素加氧酶-1与病毒感染相互作用的研究进展 被引量:1 2013年 血红素加氧酶-1(Heme oxygenase-1,HO-1)是血红素代谢的限速酶,也称为热休克蛋白32(Heat shock protein 32,HSP32),能被多种刺激因素诱导表达,具有细胞保护作用。研究发现病毒感染可调控HO-1的表达,HO-1的上调表达也可对抗病毒的感染,进而发挥其对细胞的保护作用。尽管HO-1与病毒相互作用的分子机制尚不清楚,但是HO-1与病毒感染的相关性研究已取得了一些成果,可为病毒性疾病的治疗提供新的方法。从病毒感染对HO-1表达的影响和HO-1的表达对病毒感染的影响两方面阐述了HO-1与病毒相互作用的研究进展。 苏念 袁军法 李莉 李莉娟关键词:病毒感染 相互作用 斑点叉尾鮰疱疹病毒PCR-ELISA检测方法的建立 被引量:3 2009年 针对斑点叉尾鮰疱疹病毒(CCV)的ORF6基因设计引物和探针,PCR产物在扩增过程中标记地高辛,探针5′端用生物素标记,建立了CCV的敏感、快速、环保的PCR-ELISA检测方法。对反应条件进行了优化,并评估了该方法的特异性和敏感性。结果表明:该方法可特异性检测CCV DNA,与各对照均无交叉反应,具有高度特异性;该方法对CCV DNA的检测阈值为5 fg,敏感性是常规PCR检测方法的10倍。用此方法对人工感染样品进行检测,能够检测到感染组织中的CCV DNA。该方法能够定性和半定量检测CCV DNA,可用于斑点叉尾鮰疱疹病毒的检测、斑点叉尾鮰暴发性流行病的诊断。 杜玉东 陈孝煊 吴志新 王敏 刘迁 夏君 王树云 李莉娟关键词:PCR-ELISA 敏感性 特异性 斑点叉尾鮰病毒囊膜蛋白基因ORF6和ORF10的原核表达及抗体制备 2010年 为获得斑点叉尾鮰疱疹病毒ORF6和ORF10基因,设计特异性引物进行PCR扩增,成功构建pET-32a-ORF6和pET-32a-ORF10原核表达载体,经IPTG诱导后目的蛋白在大肠杆菌中成功表达并制备多抗,通过Western blot证明ORF10的抗体具有特异性,且ORF10为病毒的结构蛋白。 王树云 陈孝煊 王敏 周金敏 于艳梅 岳刚毅 李莉娟关键词:囊膜蛋白 原核表达 多克隆抗体 斑点叉尾鮰病毒ORF6基因的高效可溶表达及抗原性分析 被引量:1 2011年 利用GST融合基因表达系统表达GST-GP6融合蛋白,以质粒pMD19-T-ORF6为模板,扩增出ORF6基因片段,将其克隆至大肠杆菌表达载体pGEX-4T-2,将所构建的重组质粒pGEX-4T-2-ORF6转化E.coli ER2566,并诱导表达,采用GST蛋白纯化系统进行纯化,所得产物进行10%SDS-PAGE及Western blot鉴定。结果表明,大肠杆菌细胞经诱导高效表达出约42kD蛋白,其分子量与GST-GP6融合蛋白相符,表达产物以可溶的形式存在。Western blot分析表明,融合蛋白能够与斑点叉尾鮰病毒(Channel catfish virus,CCV)阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性。 刘玉林 王卫民 王敏 李莉娟关键词:ORF6基因 抗原性