国家自然科学基金(30300360)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 相关作者：关明苏伟陈波斌刘维薇徐翀更多>>
- 相关机构：复旦大学新乡医学院第三附属医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市医学重点学科(专科)建设项目上海市青年科技启明星计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 应用实时荧光PCR技术检测HBV YMDD变异被引量：3
- 2004年
- 目的 应用YMDD变异荧光PCR检测试剂盒检测乙型肝炎病毒 (hepatitisBvirus,HBV)聚合酶基因区的酪氨酸 蛋氨酸 天门冬氨酸 天门冬氨酸基序 (tyrosine methionine asparticacid asparticacid ,YMDD)变异 ,希望能够替代目前使用的测序方法。方法 对 4 7例血清标本使用荧光PCR技术检测YMDD变异 ,其YMDD变异结果与DNA测序结果进行比较。结果 荧光PCR方法测得YMDD野生株 2 8例 ,变异株 19例 ;与DNA测序结果完全一致 ,符合率为 10 0 %。结论 荧光PCR技术检测YMDD变异具有方便、快速、准确的特点。
- 季秀玲沈雪芳陈宇明关明
- 关键词：YMDD变异HBV荧光PCR技术血清标本野生株
- 重组色素上皮细胞衍生因子的制备及其对脑胶质瘤血管新生的影响被引量：2
- 2005年
- 目的 用大肠杆菌表达色素上皮细胞衍生因子(PEDF),及评价其在脑胶质瘤血管新生中的作用。方法 构建pET41 /PEDF表达载体,用金属亲和层析(HisTag)和阴离子交换层析纯化重组蛋白,并以管腔形成试验验证重组蛋白活性。同时,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血管内皮细胞生长因子(VEGF)与血小板反应素1 (TSP- 1)的变化。结果 用基因工程手段获得终产量为3 8mg/L,可抑制内皮细胞管腔形成的PEDF蛋白; PEDF可下调VEGF(减少1 8倍)和上调TSP -1(增高5 3倍)的表达。结论 PEDF可能是抑制脑胶质瘤新生血管形成的主要因素。
- 张弢关明吕元
- 关键词：色素上皮细胞衍生因子脑胶质瘤血管新生PEDF血小板反应素管腔形成
- 反义血管内皮细胞生长因子抑制裸鼠异体接种前列腺癌的生长和转移被引量：1
- 2005年
- 目的用反义血管内皮细胞生长因子(VEGF)转染前列腺癌LNCaPC42细胞,从体外和体内研究抑制细胞内VEGF的表达后对肿瘤生长、侵袭等生物学行为的影响。方法用3(4,5二甲基噻唑2)2,5二苯基四氮唑盐(MTT)方法测定体外反义VEGF转染的肿瘤细胞增殖。在体内分析,反义VEGF转染的肿瘤细胞皮下注射入裸鼠。根据公式体积=0.52×(宽)2×(长),计算肿瘤体积[13],以此绘制肿瘤生长曲线。用小鼠抗人CD31单克隆抗体经免疫组化检测肿瘤微血管密度。苏木精伊红(HE)染色检测肺转移结节。结果体外研究显示,反义VEGF显著抑制前列腺癌LNCaPC42细胞的增殖;与对照细胞比较发现,反义VEGF转染的细胞在裸鼠皮下致瘤能力减弱,肿瘤生长明显减慢;肿瘤微血管密度明显降低[(31±3.25):(14.25±3.40),P<0.05],且肿瘤肺转移也显著被抑制。结论体内外研究表明,反义VEGF通过抗肿瘤新生血管形成作用可显著抑制前列腺癌的生长和转移。结果提示抑制VEGF表达对前列腺癌治疗具有潜在价值。
- 苏伟王起印关明
- 关键词：前列腺癌血管内皮细胞生长因子
- 骨性关节炎患者血管内皮生长因子的表达被引量：2
- 2008年
- 目的检测骨性关节炎(OA)关节软骨中血管内皮生长因子(VEGF)的表达。方法应用SYBRG reenⅠ实时定量聚合酶链反应(PCR)检测20例OA和10例外伤患者关节软骨中VEGF mRNA表达,并用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定关节软骨组织VEGF含量。结果在OA和对照组患者软骨组织中都存在VEGF121、VEGF165和VEGF1893种亚型的mRNA表达,但OA的VEGF121和VEGF165表达高于对照组。ELISA定量显示,OA患者的软骨组织分泌VEGF较对照组明显升高[(31.27±7.81)ng/g总蛋白、(5.15±2.69)ng/g总蛋白,P<0.01)]。结论VEGF在OA的发病过程中起重要的作用。
- 苏伟谢文关明
- 关键词：骨性关节炎血管内皮生长因子实时聚合酶链反应
- 儿童急性淋巴细胞白血病患者肝癌缺失基因1启动子的异常甲基化被引量：4
- 2008年
- 目的 分别采用甲基化特异性PCR（MSP）检测儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）患者肝癌缺失基因1（deleted in liver cancer-1，DLC-1）启动子的甲基化水平，探讨DLC-1启动子甲基化用于判断儿童ALL预后的临床价值。方法 选择34例ALL患者骨髓，5例正常骨髓和T淋巴细胞白血病细胞系6T-CEM，分别采用MSP和焦磷酸测序法检测DLC-1启动子甲基化，并采用荧光定量PCR检测5-aza-2’-deoxycytidine处理6T-CEM细胞前后DLC-1的表达。结果 经MSP检测，21例ALL患者骨髓中存在DLC-1甲基化，而在正常骨髓中未发现该基因甲基化。采用焦磷酸测序法检测的结果与MSP法完全一致，而焦磷酸测序法能对DLC-1启动子上的CG位点甲基化进行定量，DLC-1基因的甲基化与年龄、性别、WBC计数、FAB分类、免疫学分型、临床分型等临床病理学参数无显著相关性（P〉0．05）。DLC-1基因甲基化阳性的18例获得完全缓解的ALL患者中有14例在12个月内复发，而甲基化阴性的12例获得完全缓解的ALL患者仅4例复发。采用5-aza-2＇-deoxycytidine在体外处理DLC-1甲基化细胞6T-CET后，可使DLC-1恢复表达，且呈剂量依赖性。结论 从儿童ALL患者中检测到DLC-1启动子存在高频率的异常甲基化，DLC-1甲基化对预测儿童ALL复发具有一定意义。同时证明焦磷酸测序法是一种敏感、简单，并能对DLC-1启动子甲基化进行定量检测的新方法。
- 关明徐翀刘维薇陈波斌
- 关键词：白血病淋巴细胞肿瘤抑制蛋白质类甲基化
