国家科技支撑计划(2006BAI23B01-3)
- 作品数：4 被引量：32H指数：3
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- 发文基金：国家科技支撑计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 14-3-3蛋白在细胞周期调节中的作用被引量：4
- 2007年
- 14-3-3是一个在真核细胞中广泛表达、功能复杂的蛋白家族,主要通过磷酸化依赖的方式与靶蛋白结合,从而发挥其调控作用。细胞周期的调节对维持基因组的稳定性至关重要。近年来的研究发现,14-3-3蛋白可以和越来越多的细胞周期调节蛋白相互作用,调节G2/M期和G1/S期转换,从而对细胞周期起调控作用。简要综述了14-3-3蛋白在细胞周期调节中的作用。
- 苑存忠杨蕾蕾滕艳杨晓
- 关键词：细胞周期激酶磷酸化
- 一种提取小鼠表皮总RNA的新方法
- 2007年
- 目的:建立一种从小鼠表皮组织提取高质量RNA的方法。方法:用热击法分离小鼠表皮,用TRIzol法提取RNA,用紫外分光光度计测定RNA的产率和纯度,用琼脂糖电泳和RT-PCR检测RNA的质量和完整性。结果:采用新方法提取的小鼠表皮总RNA,其D260nm/D280nm值为1.8～2.0,大于1.5,且RNA产率高于100μg/g;琼脂糖电泳出现5S、18S和28S等3条清晰的rRNA条带,而且28SrRNA条带的亮度约为18S的2倍;用新方法制备的总RNA可成功地用于RT-PCR实验。结论:采用热击法分离表皮并结合TRIzol法可提取到高质量、完整性好的小鼠表皮总RNA,并能用于相关的分子生物学实验。
- 苑存忠滕艳胡志上杨蕾蕾杨晓军
- 关键词：小鼠表皮TRIZOL法RNA提取
- 成骨细胞特异性表达Cre重组酶转基因小鼠的建立被引量：6
- 2007年
- 构建了含有骨钙素基因启动子、Cre重组酶基因和人生长激素基因polyA的转基因载体pOC-Cre,以显微注射的方法将4.6 kb的转基因片段OC-Cre导入小鼠受精卵。16只子代小鼠中经PCR和Southern杂交鉴定,有2只小鼠携带外源基因,整合率为12.5%。为了检测OC-Cre在转基因小鼠中表达的组织特异性,将转基因首建者小鼠与基因组上携带有LoxP位点的条件性Smad4基因敲除小鼠交配,PCR结果显示,仅在子代纯合型小鼠骨组织基因组中扩增出了Cre介导重组后的片段。将OC-Cre转基因小鼠与ROSA26报告小鼠交配,利用LacZ染色对双转基因阳性子代小鼠进行检测,结果显示Cre重组酶在成骨细胞中特异性表达并介导ROSA基因座LoxP位点间的重组。所有这些结果说明:所建立的OC-Cre转基因小鼠在成骨细胞中特异性表达Cre重组酶,并能在体内介导成骨细胞基因组上LoxP位点间的重组,是一种理想的研制成骨细胞特异性基因敲除小鼠的工具小鼠。
- 程萱翁土军谭晓红侯宁王健林福玉黄培堂杨晓
- 关键词：CRE转基因小鼠成骨细胞显微注射特异性表达
- 基因打靶技术:开启遗传学新纪元被引量：23
- 2007年
- 基因打靶技术作为最有效的定向修饰小鼠基因的技术手段在揭示基因的生理功能、研究人类疾病的遗传机制以及寻找新的药物靶标的过程中发挥着重要的作用。近年来,随着条件基因打靶技术的发展使基因失活可以限制在特定时段特定组织或细胞内。文章将主要介绍基因打靶技术的发展简史、近期进展以及在其他模式动物中的应用。
- 滕艳杨晓
- 关键词：基因打靶小鼠基因敲除
