国家自然科学基金(30700569)
- 作品数：8 被引量：26H指数：2
- 相关作者：杨述林李奎唐中林储明星戴鼎震更多>>
- 相关机构：中国农业科学院北京畜牧兽医研究所华中农业大学江苏省农业科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 鸡大肠杆菌(HJ20株)与人大肠杆菌(RHU845)P型菌毛同源性分析
- 2007年
- 运用Goldkey电脑软件对鸡源大肠杆菌与人源大肠杆菌P型菌毛蛋白结构基因序列、氨基酸序列、二级结构进行了比较分析,二者结构基因序列相似性82.5%。二者P型菌毛的信号肽序列基本相同,氨基酸序列相似性83.7%,并且菌毛蛋白在二级结构上存在较多的相似性。
- 王晓丽诸玉梅陈钟鸣夏兴霞戴鼎震
- 关键词：鸡源大肠杆菌同源性
- 猪TIMP-2基因克隆、序列特征和表达分析被引量：1
- 2009年
- 本研究分析了五指山试验用小型猪TIMP-2基因的分子特性和可能的生物学功能。将人TIM-P2 mR-NA全长序列在猪ESTs数据库中检索获得同源性较高的ESTs,用电子克隆结合RT-PCR方法克隆获得包含完整CDS区的猪TIMP-2基因cDNA序列,应用生物信息学方法分析了其核苷酸序列及其编码蛋白质分子结构特性,应用RT-PCR研究该基因在猪不同组织和发育时期的特异表达情况。结果,猪TIM-P2 cDNA序列全长790 bp,包括663 bp的完整开放阅读框,编码221个氨基酸。多序列比对和系统进化分析表明,该基因编码蛋白质与人(97%)、大鼠(97%)、小鼠(97%)等物种TIMP-2蛋白质具有较高的同源性。蛋白质序列预测分析发现,猪TIMP-2氨基酸序列理论等电点(pI)为7.65,相对分子质量(MW)为24.5 ku,它包括27AA的前导序列和194AA的成熟肽段,其前导序列比其它物种多1个亮氨酸(Leu)。结构功能预测发现其具有1个在种间高度保守的NTR_TIMP结构域和N端VIRAK保守序列,序列中存在的12个半胱氨酸(Cys)可以形成6对二硫键结构。表达谱分析表明TIMP-2基因在猪的多个组织和不同发育时期的表达量存在较大差异,在睾丸、垂体、胃、大肠、卵巢、子宫和90 d胚胎骨骼肌中高表达;而在心脏、小肠、脑、肝脏、成年猪骨骼肌中表达量极低;在肾脏、胸腺、脾、甲状腺3、3 d胚胎中中度表达。结果表明该基因在发生组织发育和重构活动相对活跃的组织器官和时期表达水平较高,亦符合其固有生物学功能。
- 黄宏刚肖邦任红艳唐中林杨述林崔文涛牟玉莲储明星李奎
- 关键词：TIMP-2电子克隆表达谱
- 猪PGAM2基因的克隆、序列特征及表达分析被引量：5
- 2008年
- 克隆了猪PGAM2基因的cDNA序列,并利用生物信息学方法进行分析。所得cDNA序列全长913 bp,包含1个完整的开放阅读框,编码253个氨基酸。序列分析表明,该基因预测编码蛋白与已报道的狗（97.6%）、人（96%）、黑猩猩（96%）、大鼠（94.5）和小鼠（94.1%）等物种的PGAM2蛋白高度同源其在N端和C端分别存在1个ATHR和QGKA模体,在14~15AA处存在1个信号肽切割位点,含有1个典型的碳水化合物运输和代谢（GPMA）保守结构域。该基因在猪胚胎骨骼肌发育过程中差异表达,且在通城猪和长白猪中呈现不同表达模式。在通城猪中,PGAM2基因呈波浪式表达,即妊娠65 d时表达水平最高,且各时间点表达水平差异极显著（P〈0.01）。在长白猪中呈上调表达模式,妊娠65和90 d时表达丰富,且极显著高于妊娠33 d（P〈0.01）。品种间比较来看,在妊娠33和65 d时两品种表达水平相当,但妊娠90 d时长白猪中的表达水平极显著高于通城猪（P=0.006）。
- 伍晓雄唐中林李勇杨述林储明星马月辉李奎
- 鸡致病性大肠杆菌Ⅰ型菌毛pilA基因重组蛋白的免疫原性研究
- 引言Ⅰ型菌毛是禽大肠杆菌的重要致病因子。为了证实菌毛亚单位蛋白具有天然菌毛相似的抗原性,同时为菌毛亚单位疫苗免疫保护试验提供理论基础,特进行本试验。
- 冯秀丽戴鼎震陈溥言刘青涛杨保收李守军
- 关键词：鸡致病性大肠杆菌免疫原性基因重组蛋白
- 文献传递
- 禽致病性大肠杆菌1型菌毛单克隆抗体的研究及其应用被引量：1
- 2007年
- 本试验用提取的禽致病性大肠杆菌1型菌毛免疫BALB/c小鼠,筛选获得2株单克隆抗体;经MSHA试验和Western-blot试验证明,它们是1型菌毛,其凝集价分别为25～26、28～29,ELISA效价分别为103、104～105;对46株带有1型菌毛的禽致病性大肠杆菌优势血清型分离株进行了检测,结果表明该单克隆抗体都与之发生特异性反应。
- 冯秀丽王晓丽陈钟鸣戴鼎震陈溥言
- 关键词：禽致病性大肠杆菌1型菌毛单克隆抗体ELISA
- 组织芯片及其应用的研究进展被引量：1
- 2011年
- 组织芯片(tissue microarray,TMA)是用于同步分析基因在多个组织样本中表达的高通量技术。作者综述了组织芯片的原理特点、发展历史及制作方法,概括了其应用领域,提出了目前存在的一些问题及其发展前景。
- 王睿琪杨述林谭林陈斌唐中林李奎
- 关键词：组织芯片生物芯片
- 猪MSTN前肽定点诱变载体在C2C12细胞中的表达被引量：1
- 2009年
- 本研究旨在克隆通城猪含有第1个内含子的MSTN前肽基因,构建真核定点诱变载体,并通过转染C2C12细胞验证载体表达的有效性。以通城猪血液样品中提取的DNA作为模板,PCR扩增得到含第1个内含子的MSTN前肽基因,扩增产物进行克隆、测序。再将目的片段定向克隆到去除了EGFP基因的pEGFP-N1表达载体上。通过定点诱变方法将前肽编码序列第76位天冬氨酸突变为丙氨酸,获得定点诱变载体pEGFP(-)-N1-ProMstnD76A,并瞬时转染C2C12细胞。转染48 h后,通过RT-PCR和Real-time PCR方法检测目的基因的表达情况。结果表明:本研究成功克隆了通城猪含第1个内含子的MSTN前肽基因,并对该基因进行定点诱变修饰,构建了真核表达载体,转染后其前体mRNA能在C2C12细胞中进行正确剪接,目的基因mRNA表达水平较高。这为猪MSTN前肽基因在体内表达的研究奠定基础,并为制备转基因猪提供有用的分子材料。
- 张晓玮崔文涛伍晓雄杨述林牟玉莲唐中林李奎
- 关键词：定点诱变真核表达
- 鸡大肠杆菌1型菌毛疫苗的免疫原性
- 2005年
- 将由DNA-Star软件分析得到的具有1型菌毛抗原差异性的鸡大肠杆菌M10(O11)、GX7(O78)及YR10(O18)株,分别经营养肉汤37 ℃、48 h大容量培养后,提取O18菌毛制成单价1型菌毛油乳剂亚单位疫苗,制备O18全菌灭活疫苗及O11、O78、O18多价灭活疫苗.将4周龄SPF鸡分别免疫接种O18菌毛油乳剂疫苗(每雏菌毛免疫量 200 μg)和O18菌毛菌体灭活疫苗,均隔离饲养至7周龄,进行后胸气囊攻毒.结果表明,未免疫鸡的死亡率为66.67%～88.88%;免疫鸡用同源菌株攻毒死亡率为0;用异源菌株YR17(O2)攻击后死亡率为6.25%～41.17%.另有SPF鸡免疫O11-O78-O18多价菌毛菌体灭活油乳剂疫苗,隔离饲养至7周龄同法攻击,结果显示,免疫鸡用同源混合菌株攻击的死亡率为13.33%,未免疫攻击的死亡率为70.00%;免疫鸡用异源菌株O2攻击的死亡率为3.33%,未免疫鸡为61.53%.表明多价菌毛1型灭活疫苗不仅具有良好的免疫原性,而且具有一定的交叉保护作用.
- 甘黎明王晓丽刘洪珍夏兴霞戴鼎震秦爱建
- 关键词：鸡大肠杆菌1型菌毛疫苗免疫原性
