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携带新城疫病毒F基因DNA疫苗的减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性被引量：9: 2007年; 根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计1对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源NDV分离株JS5F基因(约1700bp),测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-F。pVAX1-F经脂质体转染COS-7细胞,间接免疫荧光试验检测出F基因在COS-7细胞中的表达产物。将pVAX1-F转化减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207,构建成功携带DNA疫苗的重组沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)。重组菌以109CFU/只的剂量2次免疫BALB/c小鼠,免疫小鼠可以检测到特异性针对NDVF蛋白的血清抗体和小肠粘膜抗体应答,SL7207(pVAX1-F)免疫组抗体水平显著高于SL7207(pVAX1)组(P<0.05)。将SL7207(pVAX1-F)以109CFU/只剂量口服免疫1日龄雏鸡,免疫保护试验结果显示,SL7207(pVAX1-F)免疫组对鸡具有良好的保护率(77.27%),与空白对照组和SL7207(pVAX1)空载体组之间存在显著性差异(P<0.05)。结果表明,该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能成功释放所携带的质粒,并能刺激机体产生免疫应答,可对NDV强毒攻击提供良好的免疫保护作用,提示该疫苗候选株对新城疫的控制有重要应用前景。; 潘志明焦新安唐丽华黄金林张辉张晓明张小荣刘秀梵; 关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒免疫原性

沙门氏菌感染的免疫应答被引量：3: 2005年; 巨噬细胞、中性粒细胞和树突状细胞等吞噬性细胞在对沙门氏菌感染的天然免疫应答过程中发挥着重要作用。在细菌感染的早期,这些细胞的数量增多,控制细菌的繁殖,并分泌产生细胞因子和趋化因子。感染沙门氏菌后,自然杀伤细胞、自然杀伤T细胞和TCRαβT细胞也会对感染发生迅速反应,且是γ干扰素的早期细胞来源。文章着重探讨了沙门氏菌感染天然免疫应答的细胞分子机理,为沙门氏菌病的预防控制提供新认识。; 潘志明黄金林唐丽华焦新安; 关键词：沙门氏菌天然免疫应答

以减毒鼠伤寒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的安全性与免疫效力被引量：8: 2004年; 将运送 H5亚型高致病力禽流感病毒 DNA疫苗的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌 X4 5 5 0 (p VAX1- HA)和 X4 5 5 0 (asd-p VAX1- HA )以 1× 10 1 0 CFU的剂量腹腔注射 1日龄 SPF白莱航雏鸡 ,结果表明 ,二者均具有良好的安全性。对 SPF白莱航鸡的免疫原性试验结果表明 ,这 2种细菌均能刺激鸡体产生高水平的肠道粘膜免疫应答 ,但是不能有效地激发血清抗体应答。对商品代伊莎褐蛋鸡的免疫效力试验初步结果显示 ,X4 5 5 0 (asd- p VAX1- HA)免疫鸡能够抵抗强毒的攻击 ,保护指数为 77.8% ,而 X4 5 5 0 (p VAX1- HA); 张小荣焦新安潘志明张晓明黄金林张如宽刘秀梵; 关键词：减毒鼠伤寒沙门氏菌 H5亚型 DNA疫苗安全性免疫效力

运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌载体系统被引量：12: 2002年; 减毒沙门氏菌通过自然感染的方式高效地将DNA疫苗直接运送给体内的抗原提呈细胞 (APCs)如树突细胞(DCs)和巨噬细胞 ,在粘膜和全身淋巴组织诱发以Th1型应答为主的细胞免疫和体液免疫 ,APCs尤其是DCs可能在其中起到了关键作用。减毒沙门氏菌已被应用于运送病毒、细菌和肿瘤DNA疫苗并取得一定效果 ,该途径所诱发的细胞免疫要强于肌注途径接种的相同DNA疫苗 ,原核表达的重组沙门氏菌和接种蛋白质抗原等免疫方法。; 张晓明潘志明等; 关键词：DNA疫苗减毒沙门氏菌树突细胞巨噬细胞免疫应答

携带新城疫病毒DNA疫苗的鼠伤寒沙门氏菌及其安全性与免疫效力: 根据GenBank中发表的新城疫病毒(NDV)融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株JS5 F基因,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pVAX1-...; 潘志明焦新安黄金林殷月兰唐丽华张辉张晓明张小荣刘秀梵; 关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒安全性免疫效力; 文献传递

原核真核双表达加强型绿色荧光蛋白质粒的构建被引量：10: 2003年; 将原核启动子 Ptrc和加强型绿色荧光蛋白 ( EGFP)基因从 EGFP原核表达质粒 p YA3 3 3 4-EGFP上切下 ,然后将其插入至真核表达质粒 p VAX1真核启动子 Pcmv的下游 ,构建成具有真核和原核启动子的双表达杂合质粒 p VAXD-EGFP,其长度为 3 82 3 bp。将 p VAXD-EGFP分别转化鼠伤寒沙门氏菌 X45 5 0和转染 COS-7细胞 ,应用流式细胞术、可见光谱扫描、SDS-PAGE测定 EGFP原核表达 ;应用荧光显微镜观察 EGFP在 COS-7细胞内的表达。重组鼠伤寒沙门氏菌 X45 5 0 ( p VAXD-EGFP)表达 EGFP的量与仅以原核方式表达 EGFP的 X45 5 0 ( p YA3 3 3 4-EGFP)相当 ;将质粒p VAXD-EGFP转染 COS-7细胞 ,EGFP可在 COS-7细胞核和胞浆表达 ,在荧光显微镜下发出强烈荧光。结果表明 :不仅成功地构建原核、真核表达集中于同一质粒的新型质粒 p VAXD-EGFP,而且原核、真核目的蛋白表达量达到很高水平。; 张晓明焦新安潘志明张小荣马丽顾健郭荣刘秀梵; 关键词：沙门氏菌 DNA疫苗

携带新城疫病毒DNA疫苗鼠伤寒沙门氏菌的安全性和免疫效力试验: 将重组减毒鼠伤寒沙门氏菌SL7207(pVAX1-F)分别以不同剂量口服免疫1日龄雏鸡,结果表明,重组菌SL7207(pVAX1-F)对雏鸡具有良好的安全性,且不影响鸡的增重。将重组菌SL7207(pVAX1-F)分别以...; 潘志明焦新安黄金林唐丽华张辉张成全刘秀梵; 关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒安全性免疫效力; 文献传递

携带新城疫病毒DNA疫苗减毒鼠伤寒沙门氏菌的构建及其免疫原性: 根据GenBank中发表的新城疫病毒融合蛋白(F)基因序列,设计一对引物,通过RT-PCR扩增出鹅源新城疫病毒分离株J55 F基因,约1700 bp,测序确认后,将其克隆入真核表达载体pVAX1,获得重组真核表达质粒pV...; 潘志明焦新安黄金林唐丽华张晓明张小荣刘秀梵; 关键词：减毒沙门氏菌 DNA疫苗新城疫病毒免疫原性; 文献传递

以减毒沙门氏菌运送的H5亚型禽流感病毒DNA疫苗的构建及其对小鼠的免疫原性被引量：16: 2004年; 根据GenBank中已发表的H5亚型禽流感病毒HA基因序列 ,设计一对引物 ,通过RT PCR扩增鹅源H5亚型高致病力禽流感病毒HA基因 ,测序确认后 ,将其克隆入真核表达载体pVAX1和asd pVAX1得到重组表达载体pVAX1 HA和asd pVAX1 HA。将重组质粒转染P815细胞 ,经间接免疫荧光试验证实 ,HA基因在细胞内得到了瞬时表达。进一步将重组质粒转化减毒鼠伤寒沙门氏菌X4 5 5 0得到两种运送DNA疫苗的重组沙门氏菌X4 5 5 0 (pVAX1 HA)和X4 5 5 0 (asd pVAX1 HA) ,以 1× 10 9CFU 只的剂量两次口服免疫BALB c小鼠 ,免疫小鼠不仅可以检测到HA特异性的血清抗体应答 ,而且还能抵抗稳定表达H5亚型禽流感病毒HA基因的P815肥大细胞瘤的攻击 ,说明该运送DNA疫苗的减毒沙门氏菌系统在体内能够成功释放所携带的质粒 ,并且能够刺激机体产生保护性免疫应答。; 张小荣焦新安潘志明张晓明刘秀梵黄金林张如宽; 关键词：减毒沙门氏菌 H5亚型禽流感病毒 DNA疫苗免疫原性小鼠

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