广西壮族自治区自然科学基金(2012GXNSFAA053082)
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
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- 相关机构：广西医科大学第一附属医院广西壮族自治区人民医院玉林市第一人民医院更多>>
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- 载脂蛋白E拟肽对EAE小鼠的髓鞘和轴突损伤的影响被引量：7
- 2012年
- 目的探讨载脂蛋白E(ApoE)拟肽对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠中枢神经系统髓鞘脱失和轴突损伤的影响。方法以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽(MOG35-55)为抗原建立EAE模型。将40只雌性C57BL/6J小鼠随机分为4组,即正常组、EAE组、正常治疗组和EAE治疗组,两个治疗组皮下注射ApoE拟肽。免疫组化法检测髓鞘碱性蛋白(MBP)和神经丝轻链(NF-L)的表达。结果 EAE治疗组中脑和脊髓的MBP和NF-L的表达均高于EAE组(P<0.05)。结论 ApoE拟肽可能对EAE的髓鞘和轴突的损伤有保护作用。
- 韦俊杰郑明华梁培霄陶敏唐玉兰
- 关键词：载脂蛋白E实验性自身免疫性脑脊髓炎髓鞘碱性蛋白
- 利用基因表达芯片探索多发性硬化的关键基因和通路
- 2019年
- 目的以GEO数据库中GSE21942系列芯片数据为分析对象,分析多发性硬化(MS)中的高通量基因表达来获得差异表达的基因,筛选出与多发性硬化相关的关键基因和通路。方法利用R语言与DAVID、STRING等方法对差异表达的基因进行GO和KEGG富集分析,构建和分析蛋白质-蛋白质相互作用网络。结果 88个基因被鉴定为差异表达的基因,其中76个基因(86.4%)上调,12个基因(13.6%)下调。Pathway通路分析显示,差异表达基因主要与造血细胞谱系、B细胞受体信号通路、破骨细胞分化、氮代谢等有关,进一步分析筛选出ALAS2、CA1、SNCA、HBB、IL8等核心基因,这些基因在血红素生物合成、突触传递、神经退行性疾病、血脑屏障破坏等生物功能中起重要作用。结论与健康人相比,多发性硬化样本中相关靶基因表达有较大差异,这些数据可能为多发性硬化相关的发病机制和临床治疗提供新思路。
- 黄帆唐玉兰廖韦静邝慧敏蓝岚
- 关键词：多发性硬化基因芯片差异表达基因生物标志物
- 载脂蛋白E拟肽对实验性变态反应性脑脊髓炎小鼠基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1表达的影响被引量：5
- 2016年
- 目的探讨载脂蛋白E（ApoE）拟肽对实验性变态反应性脑脊髓炎（EAE）小鼠基质金属蛋白酶-9（MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）表达的影响。方法将30只雌性C57BL/6J小鼠随机分为ApoE拟肽组、EAE组和正常组,每组10只小鼠。EAE模型通过以髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55为抗原诱导。ApoE拟肽组在免疫后第2 d到30 d每隔2 d按5 mg/（kg·d）背部皮下注射Apo E拟肽。EAE组和正常组均以等体积生理盐水替代。免疫后第0-35 d每日对小鼠进行神经功能评分。免疫后第35d解剖小鼠,分离大脑和脊髓并行HE染色。采用免疫组化染色法检测各组小鼠大脑、脑干和脊髓的MMP-9和TIMP-1的表达。结果正常组小鼠均未发病。ApoE拟肽组、EAE组的小鼠全部发病,但各有1只小鼠发病后死亡。ApoE拟肽组与EAE组的发病潜伏期差异无统计学意义（P=0.72）。ApoE拟肽组的神经功能评分在峰值和慢性期（第35 d）均明显低于EAE组（均P〈0.05）。HE染色示,正常组未见炎症细胞浸润;EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓均有不同程度的炎性细胞浸润,以脑干和脊髓较为明显;ApoE拟肽组小鼠CNS炎性细胞浸润相对于EAE组明显减少。EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓的MMP-9表达均高于正常组（均P〈0.05）。ApoE拟肽组小鼠大脑和脊髓的MMP-9表达要明显低于EAE组（均P〈0.05）,其中ApoE拟肽组小鼠中脑和脊髓的MMP-9表达与正常组相比无明显差异（均P〉0.05）。正常组小鼠脊髓TIMP-1的表达明显高于EAE组和Apo E拟肽组（均P〈0.05）。而ApoE拟肽组与EAE组小鼠大脑、脑干和脊髓TIMP-1表达的差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论 ApoE拟肽能通过抑制大脑和脊髓MMP-9的表达改善EAE小鼠的症状。
- 韦俊杰郑明华杨程程韦云飞李家鑫陶敏唐玉兰
- 关键词：实验性变态反应性脑脊髓炎多发性硬化金属蛋白酶-9基质金属蛋白酶组织抑制因子-1
- 载脂蛋白E缺乏对小鼠星形胶质细胞损伤的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨载脂蛋白E(Apo E)对脊髓切片培养模型中脂多糖(LPS)诱导的星形胶质细胞损伤的影响。方法:用振动切片机横向切取生后7 d大的C57BL/6 Apo E基因敲除型(Apo E-/-)及野生型(WT)小鼠脊髓切片进行培养,培养至第7天加入LPS共孵育5 d建立模型组(Apo E-/-LPS组、WT-LPS组),同时设立不加LPS的正常对照组。用免疫荧光检测脊髓片水通道蛋白-4(AQP4)、胶原纤维酸性蛋白(GFAP)及小胶质细胞标记物Iba1的表达,分别用ELISA和硝酸还原酶法测定培养液中TNF-α和NO的浓度。结果:模型组均出现AQP4和GFAP的表达缺失,即星形胶质细胞的损伤,且Apo E-/-LPS组的脊髓片损伤积分比WT-LPS组高(P<0.05);与正常对照组比较,模型组Iba1的表达及TNF-α、NO的浓度均升高(P<0.05),且Apo E-/-LPS组TNF-α和NO的浓度均高于WT-LPS组(P<0.05)。结论:Apo E缺乏加重星形胶质细胞的损伤,可能是通过促进小胶质细胞分泌促炎性介质而发挥作用。
- 蒙晓珍韦俊杰唐玉兰杨程程龚靖孙淑君
- 关键词：载脂蛋白E星型胶质细胞小胶质细胞炎症介质
- 视神经脊髓炎星形胶质细胞损害与患者功能缺损的关系被引量：10
- 2016年
- 目的:探索视神经脊髓炎(NMO)星形胶质细胞(AS)的损害与NMO发病的关系,明确AS的损害与患者功能缺损严重程度的相关性。方法:用ELISA法检测30例NMO患者急性期脑脊液(CSF)和血清中水通道蛋白4抗体(AQP4-Ab)、胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、载脂蛋白E(Apo E)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)各项指标水平,并与对照组比较。并分析NMO组CSF各项指标水平与CSF AQP4-Ab、急性期扩展残疾状态量表(EDSS)评分的相关性。结果:(1)NMO组CSF及血清中AQP4-Ab、GFAP、IL-6水平明显高于对照组(P<0.05),但Apo E、IL-10水平低于对照组(P<0.05);(2)NMO组CSF GFAP、Apo E、IL-6、TNF-α水平较血清高(P<0.05),AQP4-Ab、IL-10水平均较血清低(P<0.05);(3)CSF GFAP、IL-6与AQP4-Ab水平呈正相关(r分别为0.749、0.526,均P<0.05),Apo E、IL-10水平与CSF AQP4-Ab水平呈负相关(r分别为-0.571、-0.676,均P<0.05);(4)CSF AQP4-Ab、GFAP、IL-6水平与急性期EDSS评分呈正相关(r分别为0.688、0.708、0.737,均P<0.05),Apo E、IL-10水平与急性期EDSS评分呈负相关(r分别为-0.663、-0.676,均P<0.05)。结论:NMO存在AS损害,且其损害程度可能与患者功能缺损有关;AQP4-Ab、GFAP、IL-6可能对NMO的发病及疾病加重起重要的作用;Apo E、IL-10减少有可能加重NMO的损伤。
- 陈小玲雷茵唐玉兰杨程程赵伟佳
- 关键词：视神经脊髓炎胶质纤维酸性蛋白载脂蛋白E
- 载脂蛋白E对实验性自身免疫脑脊髓炎IL．17、IL-6、TNF-α表达的影响被引量：4
- 2016年
- 目的探讨载脂蛋白E（ApoE）对实验性自身免疫脑脊髓炎（EAE）白介素17（IL-17）、白介素6（IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）表达的影响。
方法选取10只ApoE基因敲除的C57BL/6J小鼠设为ApoE基因敲除组（ApoE-/-组），同时将40只正常C57BL/6J小鼠按随机数字表法分成野生组（WT组）、ApoE拟肽（COG1120）治疗组、生理盐水组和正常对照组，每组10只。ApoE-/-组、WT组、COG112治疗组和生理盐水组均采用背部皮下多点注射完全抗原（MOG35-55的PBS缓冲液与等量的含卡介苗的完全弗氏佐剂混合而成）方法诱导制作EAE模型，正常对照组用生理盐水代替MOG35-55。COG112治疗组在第2-35天每隔2天背部皮下注射COG112 5 mg/（kg·d），生理盐水组用生理盐水代替COG112。在第0-35天对各组小鼠进行神经功能缺损评分；第35天评分后大脑和脊髓取材，应用HE染色观察炎性细胞浸润情况，应用免疫组化染色检测IL-17、IL-6、TNF-α表达水平。结果ApoE-/-组神经功能缺损峰值评分较WT组明显增高，COG112治疗组神经功能缺损峰值评分较生理盐水组明显降低，差异均有统计学意义（P〈0.05）。ApoE-/-组的炎性细胞浸润程度重于WT组，COG112治疗组的炎性细胞浸润程度较生理盐水组轻。ApoE-/-组、WT组、COG112治疗组和生理盐水组小鼠大脑和脊髓IL-17、IL-6、TNF-α平均吸光度值均明显高于正常对照组，差异均有统计学意义（P〈0.05）；ApoE-/-组小鼠大脑和脊髓IL-17、IL-6、TNF-α平均吸光度值均明显高于WT组，COG112治疗组小鼠大脑和脊髓IL-17、IL-6、TNF-α平均吸光度值均明显低于生理盐水组，差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论ApoE缺乏会加重EAE炎性细胞浸润及增加IL-17、IL-6、TNF-α表达；ApoE拟肽的干预可减少炎性细胞浸润及IL-17、IL-6、TNF-α表达，从而在EAE的免疫炎症反应中起保护作用。
- 雷茵韦俊杰唐玉兰杨程程郑明华赵伟佳韦云飞陶敏
- 关键词：载脂蛋白E白介素17白介素6肿瘤坏死因子-Α
- NMO-IgG对谷氨酸及其受体NMDAR1与NMDAR2B表达的影响被引量：2
- 2016年
- 目的:研究视神经脊髓炎(NMO)小鼠脊髓体外模型中谷氨酸(Glu)浓度及N-甲基-D-天冬氨酸受体(NMDAR,NR)NR1及NR2B亚单位表达量是否发生改变,探讨NMDA受体介导的Glu兴奋毒性作用参与NMO致病机制的可能性。方法:1提取NMO患者血浆中水通道蛋白4(AQP4)自身抗体(NMO-IgG);2用提纯后的NMO-IgG干预C57BL/6乳鼠脊髓片(脊髓薄片300μm),培养制成NMO组,通过检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、AQP4评估NMO模型建立是否成功,并进行缺损评分,同时设置不加NMO-IgG和补体的对照组。3比色法检测各组培养液Glu浓度,用免疫组织荧光检测脊髓NR1及NR2B亚单位表达。结果:1NR1、NR2B在NMO组表达量显著高于对照组(P<0.05);2NMO组与对照组Glu浓度比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:NMO-IgG促进小鼠脊髓NMDAR亚单位NR1、NR2B表达;NMDAR可能参与NMO致病。
- 孙淑君蒙晓珍龚靖李一锋唐玉兰韦云飞
- 关键词：视神经脊髓炎水通道蛋白4N-甲基-D-天冬氨酸受体谷氨酸
- 载脂蛋白E影响星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9表达的机制研究被引量：5
- 2020年
- 目的探讨载脂蛋白E(ApoE)影响星形胶质细胞基质金属蛋白酶-9(MMP-9)表达的机制。方法(1)体外培养C57BL/6J种属的野生型(WT)和ApoE基因敲除型(ApoE-/-)乳鼠的星形胶质细胞,利用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)抗体行免疫荧光染色鉴定星形胶质细胞。(2)将WT和ApoE-/-乳鼠星形胶质细胞分别分为空白对照组(Control组)、阴性对照组(NC组)和阳性沉默组(KD组),Control组不加任何病毒,NC组加入阴性对照慢病毒,KD组加入沉默p65基因的阳性慢病毒,用siRNA慢病毒沉默星形胶质细胞核因子-κB(NF-κB)p65基因,抑制NF-κB信号转导,应用Western blot检测NF-κB p65蛋白的表达,ELISA法检测细胞MMP-9和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的浓度。(3)用TNF-α刺激上述各组细胞24h,ELISA法检测刺激前后各组细胞MMP-9的浓度。结果(1)KD组两种细胞NF-κB p65蛋白的表达水平、MMP-9和TNF-α的浓度均显著低于Control组和NC组(P<0.05);而Control组和NC组细胞NF-κB p65蛋白的表达水平、MMP-9和TNF-α的浓度间的差异无统计学意义(P>0.05)。(2)ApoE-/-细胞MMP-9和TNF-α的浓度在Control组和NC组中均高于WT细胞(P<0.05);而在KD组中与WT细胞无明显差异(P>0.05)。(3)TNF-α刺激24h后,Control组和NC组两种细胞MMP-9的浓度均升高(P<0.05);而KD组MMP-9的浓度无明显变化(P>0.05)。结论ApoE可能通过TNF-α/NF-κB信号通路影响星形胶质细胞MMP-9表达,从而影响血脑屏障的完整性。
- 蓝岚黄帆唐玉兰张栋亮刘秋红罗春芳
- 关键词：载脂蛋白E星形胶质细胞MMP-9TNF-ΑNF-ΚB信号通路
- 载脂蛋白E在神经系统脱髓鞘疾病发病机制中的作用被引量：1
- 2015年
- 载脂蛋白E(apolipoprotein E,ApoE)是神经系统内主要的载脂蛋白,具有参与转运脂质、调节免疫、保护血-脑脊液屏障及抑制神经元凋亡等多种生物学活性,在多种神经系统疾病中发挥重要作用。本文就ApoE在神经系统脱髓鞘疾病,特别是在多发性硬化和吉兰-巴雷综合征发病中的主要作用进行综述。
- 蒙晓珍唐玉兰
- 关键词：载脂蛋白E多发性硬化吉兰-巴雷综合征
- 载脂蛋白E对EAE星形胶质细胞的影响被引量：4
- 2015年
- 目的探索载脂蛋白E(apolipoprotein E,apo E)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental autoimmune encephalomyelitis,EAE)模型小鼠病灶星形胶质细胞的影响。方法采用MOG35-55诱导apo E基因敲除的C57BL/6小鼠(apo E-/-EAE组)及野生型C57BL/6小鼠(普通EAE组),建立EAE模型。取免疫后35 d的EAE小鼠的大脑及脊髓切片,行HE染色,免疫组织化学染色法观察各组小鼠水通道蛋白4(AQP4)和胶质纤维酸性蛋白(GFAP)的表达。结果 apo E-/-EAE组和普通EAE组大脑和脊髓AQP4、GFAP的表达量均高于正常对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);apo E-/-EAE组大脑和脊髓AQP4、GFAP表达量均高于普通EAE组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 EAE中存在星形胶质细胞水肿、增生,apo E缺乏可以加重这一病变。
- 杨程程韦俊杰唐玉兰郑明华韦云飞
- 关键词：载脂蛋白E实验性自身免疫性脑脊髓炎水通道蛋白4胶质纤维酸性蛋白
