国家自然科学基金(30472019) 作品数:11 被引量:29 H指数:4 相关作者: 郑建全 靳庆娥 马晓芸 戴薇薇 张树卓 更多>> 相关机构: 军事医学科学院 沈阳药科大学 北京化工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家重点基础研究发展计划 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 更多>>
大鼠背根神经节酸感受离子通道(ASICs)的药理学特性研究 被引量:5 2007年 目的研究大鼠背根神经节(DRG)细胞酸感受离子通道(ASICs)的电生理学和药理学特性。方法应用全细胞膜片钳技术,在急性分散的成年大鼠DRG细胞上记录并分析由不同浓度H+(降低pH值)诱发的ASICs电流。结果在266个大鼠DRG神经元上记录到由H+诱发的3种不同类型的ASICs电流,分别为ASIC1样电流(n=66,24·8%)、ASIC2样电流(n=81,30·4%)和ASIC3样电流(n=119,44·7%)。ASIC1样电流具有快速失活成份,衰减快;ASIC2样电流具有稳态失活成份,衰减十分缓慢;而ASIC3样电流具有快速失活与稳态失活双相成份。三者均不具有整流现象。此3种电流对细胞外H+表现出不同的敏感性,H+诱发电流的pH50分别是:ASIC1-like,pH5·82;ASIC2-like,pH5·18;ASIC3-like,pH6·24。氨氯吡咪以浓度依赖性方式可逆性阻断大鼠DRG神经元的ASICs,对3种ASICs电流的抑制效应差异有显著性。其IC50分别为:ASIC1-like,19·86μmol·L-1;ASIC2-like,42·73μmol·L-1;ASIC3-like,27·91μmol·L-1。结论成年大鼠DRG神经元细胞上表达了3种不同类型的ASICs,且其在表达率、H+敏感性、失敏以及氨氯吡咪敏感性等方面差异均有显著性。 艾平 刘振伟 戴薇薇 张树卓 郑建全关键词:酸感受离子通道 背根神经节 全细胞膜片钳 氨氯吡咪 酸感受离子通道亚基1a的研究进展 被引量:1 2007年 酸感受离子通道是一类由细胞外酸化所激活的阳离子通道,在胞外H+浓度增高时离子通道开放,形成H+门控电流。目前,已发现7个ASICs亚基,ASIC1a是其中之一。研究表明,ASIC1a在突触传递及其可塑性的调节、空间学习记忆、痛觉传导和缺血性脑损伤等生理和病理过程中起重要作用。该文对有关ASIC1a研究的最新进展作一综述,以增进对ASICs生物学功能和病理作用的了解。 靳庆娥 郑建全关键词:缺血 酸中毒 酸感受离子通道亚基3的研究进展 被引量:2 2006年 酸感受离子通道(ASIC)是对H+敏感的Na+选择性阳离子通道,在细胞外H+浓度增高时激活开放,形成H+门控电流。目前,已发现该通道有6个亚基,酸感受离子通道亚基3(ASIC3)是其中之一。研究表明,ASIC3在痛觉、伤害性刺激的感受、心肌缺血所致的心绞痛等病理过程中有重要作用,很可能成为药物研制的新靶标。 张颖 建全 王秋鹃关键词:酸感受离子通道 亚基 靶标 酸感受离子通道亚基1a敲减后的细胞抗酸性研究 被引量:5 2006年 目的:通过酸感受离子通道(ASIC)1 a表达抑制的细胞模型,探讨在酸性条件下ASIC1 a对细胞生长增殖的影响。方法:以大鼠神经胶质瘤(C6)为模型细胞,利用RNA i技术建立ASIC1 a表达抑制的细胞模型。通过绘制细胞生长曲线、集落形成试验、MTT试验和乳酸脱氢酶(LDH)释放试验来观察不同pH条件下,ASIC1 a表达抑制细胞和阴性对照细胞生长增殖能力的变化。结果:RNA i技术可明显抑制C6细胞ASIC1 a蛋白的表达。在正常pH条件下,ASIC1 a表达缺失对C6细胞的生长增殖没有显著影响。但在不同酸性条件下,ASIC1 a表达抑制细胞与阴性对照细胞相比对酸的耐受性明显提高,表现为细胞损伤减轻,存活数目明显增多。结论:C6细胞中有ASIC1 a,ASIC1b,ASIC2 a,ASIC2b和ASIC3亚基的表达。抑制ASIC1 a的表达不影响正常pH条件下细胞的生长增殖,但能明显提高细胞对酸的耐受性,提示ASIC1 a可能是潜在的抗酸靶分子。 靳庆娥 马晓芸 翁谢川 郑建全关键词:酸感受离子通道 RNAI C6 动物体内microRNAs与转录因子及剪接因子之间的相互调控 被引量:5 2009年 microRNA(miRNA)是一类长约22nt的非编码RNA,能通过与靶mRNA3′UTR结合而调控基因表达.动物体内的miRNA介导了一种新的基因表达调控模式,可在基因转录后水平负调控靶mRNA的转录或翻译.动物体内至少将近30%的基因表达受miRNA调节.随着对miRNA功能研究的逐渐深入,发现转录因子(transcription factor,TF)和剪接因子(splicing factor,SF)这两种基因表达的重要调节因子与miRNA之间存在着直接或间接的相互调控作用,为人们了解miRNA参与的复杂基因调控网络提供了新内容,同时也可为miRNA相关疾病的治疗提供重要线索. 庞剑会 任长虹 李稚锋 刘虎岐 张成岗关键词:MIRNA 剪接因子 转录因子 爪蟾卵母细胞表达的大鼠ASIC3电生理学特性研究 2007年 目的:研究大鼠酸感受离子通道亚基3(acid-sensing ion channel subunit 3,ASIC3)组成的同聚体离子通道的电生理学特性。方法:将编码ASIC3亚基的cRNA注射到爪蟾卵母细胞中以表达ASIC3离子通道,使用双电极电压钳技术记录H+诱发电流,分析电流的药理学和门控动力学特征,并观察了Ca2+、Na+及K+离子对H+诱发电流的影响。结果:在注射ASIC3亚基cRNA的爪蟾卵母细胞上,降低胞外液pH值可诱导出内向电流。pH值越小则H+诱发的电流幅度越大,pH50=5.83。H+诱发电流可被阿米洛利(氨氯吡咪)可逆性阻断,电流呈现快速和稳态失活,其失活常数分别为T1=(1.5±0.7)ms,T2=(364.5±1.3)ms。提高胞外Ca2+浓度可降低H+诱发的电流幅度,IC50=9.16 mmol/L。当细胞外液中无Na+时,H+基本上不能诱发出内向电流;当同时去除细胞外液中Na+和K+时,H+可诱发出外向电流。结论:成功建立了特异性表达大鼠ASIC3亚基同聚体离子通道细胞模型。ASIC3除了对Na+通透外,对K+具有一定程度的通透。胞外Ca+对ASIC3的开放具有抑制性作用。 戴薇薇 刘晓燕 闫海涛 靳庆娥 张景海 郑建全关键词:爪蟾卵母细胞 电生理学 PH CA^2+ 敲减酸感受离子通道1a致细胞抗酸性能力增强机制的初探 2008年 目的:通过酸感受离子通道(acid sensing ion channels,ASICs)1a敲减的细胞模型,探讨ASIC1a亚基表达抑制后细胞抗酸性能增强的可能机制。方法:使用RNA干扰技术,选择性敲减大鼠神经胶质瘤细胞(C6)和新生大鼠海马神经元中ASIC1a亚基,通过乳酸脱氢酶(LDH)释放实验,观察不同条件下细胞抗酸能力的改变。结果:在酸性条件下,敲减ASIC1a亚基可明显提高C6细胞的耐酸能力。使用ASICs非选择性拮抗剂氨氯吡咪与选择性敲减ASIC1a亚基相比,在提高C6细胞抗酸能力方面没有显著差异。提高胞外Ca2+浓度可加重pH值下降造成的细胞损伤。结论:与其他亚基相比,ASIC1a亚基与酸中毒造成的细胞损伤关系最为密切,其机制与胞外Ca2+内流有关,提示ASIC1a可能是潜在的抗酸靶分子。 靳庆娥 马晓芸 郑建全关键词:酸感受离子通道 钙内流 PH 酸敏感离子通道抑制剂的研究进展 被引量:5 2006年 酸敏感离子通道(ASICs)是一类由胞外H+激活的阳离子通道。已发现的6个ASICs亚基在触觉、痛觉、酸味觉以及学习记忆中有重要的生理作用,同时,它们参与某些病理反应,可以被神经肽、温度、金属离子以及缺血诱导产生的一些活性物质所调控。基于其病理作用,ASICs抑制剂的研发成为药物化学研究的热点之一。本文综述了近年来对ASICs的结构、生理和病理作用及几类ASICs抑制剂的最新研究进展,并进行了展望。 崔琳 杨日芳 郑建全 马润宇 恽榴红关键词:药物化学 药物设计 酸敏感离子通道 大鼠酸感受离子通道亚基2a表达质粒的构建及生物学特性考察 被引量:1 2008年 目的构建大鼠酸感受离子通道亚基2a(acid-sensingion channel subunit 2a,ASIC2a)的表达质粒并研究其组成的同聚体离子通道的生物学特性。方法使用分子生物学技术构建大鼠ASIC2a亚基表达质粒;通过体外转录技术,使编码ASIC2a亚基的cRNA在爪蟾卵母细胞内表达并在膜表面形成同聚体离子通道;使用双电极电压钳技术研究ASIC2a的生物学特性。结果在注射ASIC2a亚基cRNA的爪蟾卵母细胞上,降低胞外液pH值可诱导出内向电流。H+诱发的ASIC2a内向电流具有稳态失活成分可被氨氯吡咪可逆性阻断,其pH50为5.12。提高胞外Ca2+浓度可降低H+诱发的电流幅度,其IC50为11.98 mmol.L-1。当细胞外液中无Na+时,H+基本上不能诱发出内向电流;当同时去除细胞外液中Na+和K+时,H+可诱发出外向电流。结论成功构建ASIC2a表达质粒;ASIC2a除了对Na+通透外,对K+也有一定的通透性,胞外Ca2+抑制ASIC2a孔道的开放。 戴薇薇 刘晓燕 马晓芸 张树卓 张景海 郑建全关键词:爪蟾卵母细胞 PH值 钙离子