辽宁省科技厅科技攻关项目(2008408002-2)
- 作品数：4 被引量：8H指数：2
- 相关作者：张梅英吴红联王惟王禄增吕相川更多>>
- 相关机构：中国医科大学更多>>
- 发文基金：辽宁省科技厅科技攻关项目辽宁省教育厅高等学校科学研究项目国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 5-脂氧化酶代谢通路与动脉粥样硬化的关系被引量：2
- 2009年
- 5-脂氧化酶催化花生四烯酸生成5-羟基廿碳四烯酸和白三烯等花生酸类物质,其中后者是炎症反应和变态反应的调停者。近年来研究发现5-脂氧化酶代谢途径与动脉粥样硬化密切相关,本文结合国内外文献,就5-脂氧化酶代谢途径与动脉粥样硬化的关系作一综述。
- 黄昊张小围张梅英
- 关键词：5-脂氧化酶代谢通路动脉粥样硬化
- 5-脂氧化酶与动脉粥样硬化的研究进展被引量：4
- 2009年
- 动脉粥样硬化(AS)及其并发症是当今世界上导致死亡的最常见的病因之一。AS发病机制有多种学说,其中动脉粥样硬化是一种慢性炎症性疾病的学说已为广大学者所接受。白三烯(LTs)是促进炎症反应的脂类调控因子,在心血管组织中具有强烈的致炎作用,5-脂氧化酶(5-LO)能够氧化花生四烯酸生成LTs等花生酸类物质。近年对动脉粥样硬化的研究中发现5-LO途径及其下游产物LTs对AS的形成、发展及动脉粥样硬化斑块的不稳定性有重要作用。本文结合国内外文献,对5-LO基因结构、蛋白结构和代谢活性等生物学特性以及5-LO及其下游产物与动脉粥样硬化发生、发展的关系进行了总结,对了解和研究动脉粥样硬化疾病及其治疗具有重要意义。
- 吴红联张梅英
- 关键词：动脉粥样硬化5-脂氧化酶白三烯炎症
- 5-LO真核表达载体的构建及其在RAW264．7细胞中的表达的初步研究
- 2010年
- 目的构建5-LO真核表达载体并初步研究其在RAW264．7细胞中的表达，为建立5-LO高表达转基因小鼠模型提供表达载体。方法从人全血标本中提取细胞总RNA，以逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）法扩增5-LO基因，分别构建5-LO目的基因的克隆载体与表达载体，提取质粒，进行酶切、PCR和DNA测序鉴定，将重组融合表达载体pEGFP-5-LO稳定转染RAW264．7细胞，RT-PCR、western blot方法检测pEGFP-5-LO的表达情况。结果构建了重组克隆载体pUCm-5-LO和真核表达载体pEGFP-5-LO，经酶切、PCR及测序鉴定正确；转染细胞后，在荧光显微镜下观察到pEGFP-5-LO融合蛋白的表达，RT—PCR和Westemblot结果表明转染pEGFP．5-LO的RAW264．7细胞中有5-LO的表达。结论成功克隆了5-LO基因，构建的表达载体pEGFP-5-LO在RAW264．7细胞中表达5-LO蛋白，为进一步5-LO高表达转基因鼠模型的建立和临床应用奠定了基础。
- 吴红联张梅英王惟王禄增
- 关键词：5-脂氧化酶基因克隆真核表达RAW264.7细胞
- 5-脂氧化酶转基因小鼠模型的制备被引量：2
- 2010年
- 目的建立5-脂氧化酶(5-LO)转基因小鼠进行动脉粥样硬化的发病分子机制的研究。方法通过显微注射的方法,将5-脂氧化酶基因片段(6.8 kb)导入BDF1受精卵雄原核并移植到同期受孕的假孕母鼠输卵管中,对产出仔鼠的鼠尾组织DNA进行PCR、Southern blot检测,对9、20、24号转基因小鼠分别提取腹腔细胞、骨髓细胞及脾、肾组织总RNA和蛋白,并采用RT-PCR、Western blot方法进行转录水平检测和蛋白表达检测。结果共产生25只子代小鼠,经PCR和Southern检测获得7只阳性小鼠,经RT-PCR和Western blot检测结果表明,9、20、24号转基因小鼠腹腔细胞、骨髓细胞、脾、肾5-LO和5-脂氧化酶激活蛋白(FLAP)在RNA和蛋白水平表达均高于正常BDF1对照小鼠,且统计学分析腹腔细胞、骨髓细胞表达均具有显著差异(P<0.05)。结论成功建立5-LO转基因小鼠模型。
- 张梅英吴红联杨葳李兆阳董婉维周生来于洋王惟吕相川秦英郑志红王禄增
- 关键词：5-脂氧化酶动脉粥样硬化转基因
