国家自然科学基金(30271223)
- 作品数：10 被引量：35H指数：3
- 相关作者：栗占国李霞张翠华姚中强李萍更多>>
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- 流感病毒血凝素衍生肽对T细胞活化抑制作用的研究被引量：3
- 2005年
- 目的研究人类白细胞抗原(HLA)-DRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308-317变构肽在HLA-DR4限制性T细胞激活中的作用。方法采用固相法合成HA308-317原型肽及其变构肽。通过计算机模拟及流式细胞术分析HA308-317原型肽及其变构肽与HLA-DR4分子的结合作用;并检测这些多肽对T细胞激活信号CD69表达和白细胞介素(IL)-2分泌的影响及对T细胞增殖的抑制作用。结果HA308-317变构肽能结合细胞表面HLA-DR4分子,对T细胞激活信号CD69表达和IL-2分泌无明显影响,并能抑制HA308-317原型肽诱导的T细胞活化。结论替换HA308-317多肽中识别T细胞受体(TCR)的氨基酸残基形成的HA变构肽可与HLA-DR4分子结合,而且可抑制其原型肽诱导的T细胞活化。
- 李霞李茹张翠华李博栗占国
- 关键词：流感病毒血凝素T细胞活化HLA-DR4衍生肽CD69变构肽
- 类风湿关节炎患者外周血T细胞抑制性多肽的研究被引量：1
- 2005年
- 目的探讨HLADRB1结合性流感病毒血凝素(HA)308317变构肽对类风湿关节炎(RA)患者外周血T细胞激活的影响。方法选取27例HLADRB1阳性的RA患者,密度梯度离心法分离外周血单个核细胞。采用固相法合成HA308317变构肽,并检测RA患者外周血T细胞对这些多肽的反应性;及多肽对白细胞介素(IL)2、γ干扰素分泌及CD69表达的影响。同时进一步观察HA308317变构肽对CII263272或HA308317多肽介导的T细胞激活的抑制作用。结果变构肽刺激T细胞增殖的阳性率分别为7.4%(APL1)、3.7%(APL2)和3.7%(APL3),明显低于CII263272和HA308317原型肰(62.2%和52.9%),3条变构肽的刺激指数也明显低于原型肽(均P<0.01)。并且,其诱导IL2、γ干扰素分泌的水平及CD69的表达亦下降(P<0.05)。与单独加入CII263272或HA308317原型肽的对照组相比,加入HA308317变构肽的T细胞增殖的刺激指数明显下降(P<0.05)。结论替换HA308317多肽中T细胞受体的接触残基产生了弱或非T细胞刺激肽,它们可能有效地抑制RA的T细胞免疫反应。
- 李霞李茹张翠华栗占国
- 关键词：外周血T细胞流感病毒血凝素密度梯度离心法T细胞激活CD69变构肽
- 小分子干扰RNA对人类白细胞抗原DRβ1^＊ 0401基因表达的抑制作用被引量：4
- 2005年
- 陈巧林李茹张翠华栗占国
- 关键词：人类白细胞抗原DR基因表达小分子T细胞受体病理过程抗原肽
- 利用II型胶原变构肽抑制类风湿关节炎患者T细胞活化的研究被引量：11
- 2006年
- 为了研究II型胶原(CII)变构肽对类风湿性关节炎(RA)患者外周血T细胞激活的抑制作用,以固相法合成CII263-272原型肽及3条变构肽,计算机模拟分析变构肽与HLA-DR4分子的结合能力3。H掺入法检测61例RA患者外周血单个核细胞对CII263-272原型肽及变构肽的T细胞增殖反应。ELISA法检测CII263-272原型肽及变构肽刺激下外周血T细胞IL-2及IFN-γ的分泌。竞争抑制试验观察CII变构肽对原型肽介导T细胞激活的抑制作用。计算机模拟结果发现,CII263-272原型肽可与HLA-DR4分子结合,在此基础上替换TCR结合位点267位谷氨酰胺、270位赖氨酸和271或265位甘氨酸为丙氨酸,不影响该多肽与HLA-DR4分子的结合能力。CII变构肽在RA患者外周血T细胞具增殖中有明显低反应性,下调IL-2和IFN-γ的产生,并且可特异性抑制CII原型肽诱导的T细胞活化(P<0.05或P<0.01)。以上结果提示,替换CII263-272多肽中与T细胞受体结合的氨基酸形成的CII变构肽可抑制RA患者外周血T细胞活化,可能在本病的免疫治疗中有重要意义。
- 李茹李霞栗占国
- 关键词：类风湿关节炎T细胞活化
- 类风湿关节炎患者人类白细胞抗原-DR4/1表型与Ⅱ型胶原特异性T细胞增殖及血清Ⅱ型胶原抗体的关系被引量：1
- 2005年
- 目的探讨类风湿关节炎(RA)患者HLA-DR4/1表型与Ⅱ型胶原(CⅡ)263-272多肽特异性T细胞增殖和血清CⅡ263-272抗体之间的关系。方法将CⅡ263-272多肽与70例RA患者外周血单个核细胞(PBMC)共孵育5天,用3H参入法测定T细胞增殖,用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测患者血清CⅡ263-272抗体水平。以序列特异性引物聚合酶链反应(PCR-SSP)技术对上述患者进行HLA-DR分型。结果在70例RA患者中,27例HLA-DR4/1表型阳性,43例HLA-DR4/1表型阴性。在HLA-DR4/1表型阳性的RA患者中,CⅡ263-272多肽可刺激T细胞增殖的有15例(55.6%),12例(44.4%)呈无反应性;18例(66.7%)患者抗CⅡ263-272抗体阳性。而在HLA-DR4/1表型阴性的RA患者中,T细胞对CⅡ263-272多肽有反应性者13例(30.3%),无反应性者30例(69.7%);15例(34.8%)RA患者抗CⅡ263-272抗体阳性。HLA-DR4/1表型阳性组CⅡ263-272特异性细胞增殖和CⅡ263-272抗体生成均高于HLA-DR4/1表型阴性组。结论RA患者CⅡ263-272特异性T细胞增殖和CⅡ263-272抗体生成与HLA-DR4/1表型有关。
- 李霞李茹宁新荣栗占国
- 关键词：T淋巴细胞抗体
- HLA-DRB1结合性Ⅱ型胶原多肽抑制胶原性关节炎的实验研究被引量：2
- 2006年
- 目的：研究替换CⅡ263-272序列中的268～270位氨基酸的变构肽sub268-270对胶原性关节炎（CIA）的抑制作用。方法：使用牛CⅡ在Lewis大鼠诱发CIA。以CⅡ变构肽sub268-270 90μg静脉注射，每周1次治疗CIA；设置无关肽对照和空白对照组。从关节炎症积分、放射学积分和病理学积分来评价变构肽疗效。结果：变构肽、无关肽及空白对照组关节炎症积分分别为5．60±1．24、11．20±1．21和11．80±1．22，变构肽可明显抑制CIA关节炎症（P〈0．01）。变构肽组的放射学积分（1．32±0．49）明显低于无关肽组（2．63±0．51）和空白对照组（2．69±0．53）（P〈0．01）。此外，变构肽组的病理学积分（1．37±0．53）也显著低于无关肽组（2．94±0．63）和空白对照组（3．06±0．65）（P〈0．01）。结论：CⅡ变构肽sub268-270可以明显抑制胶原性关节炎的关节炎症、病理损伤及骨破坏程度。
- 姚中强李茹栗占国
- 关键词：胶原性关节炎变构肽骨破坏
- Ⅱ型胶原多肽263～272序列中多个氨基酸替换的意义及其在胶原性关节炎治疗中的作用被引量：1
- 2006年
- 目的：研究Ⅱ型胶原变构肽（APL）中氨基酸替换对胶原性关节炎（CIA）的抑制作用，为类风湿关节炎（RA）的多肽免疫治疗提供试验依据。方法：以丙氨酸替换Ⅱ型胶原（CⅡ）263～272多肽中与T细胞受体（TCR）结合的氨基酸，^3H掺人法检测变构肽对RA患者外周血T细胞活化的竞争抑制作用，筛选用于CIA治疗的变构肽。以牛CⅡ诱导大鼠CIA模型，应用不同剂量（1，10，100μg）的CⅡ变构肽每周2次皮下注射，观察大鼠关节肿胀的变化情况。治疗3周后（初次免疫后第35天）处死大鼠，进行X线及病理评分。ELISA法检测血清IFN-γ水平。结果：3条CⅡ263～272变构肽均不同程度抑制CⅡ原型肽对RA患者T细胞的活化。其中，同时替换267位谷氨酰胺（Q）、270位赖氨酸（K）和271位甘氨酸（G）为丙氨酸（A）的APL3效果最好。应用APL3对CIA进行治疗的结果发现，100μg治疗组CIA大鼠的关节炎指数、X线及病理评分均显著低于PBS对照组。血清IFN-γ水平也较PBS对照组明显下降。而无关肽组与PBS对照组相比，关节炎指数、X线和病理评分以及血清IFN-γ水平均无明显差别。结论：TCR结合氨基酸位点替换后的CⅡ263～272多肽具有T细胞低反应性和对原型肽的竞争抑制作用，并可抑制大鼠胶原性关节炎的发展，提示其抑制RA免疫异常的可能性。
- 李茹李霞李萍姚中强郭嘉隆栗占国
- 关键词：关节炎类风湿免疫疗法
- 类风湿关节炎HLA-DQβ1易感基因研究被引量：15
- 2003年
- 目的 探讨HLA DQβ1基因多态性在中国汉族类风湿关节炎 (RA)发病中的作用及与患者临床指标的关系。方法 选取类风湿关节炎患者及健康对照各 4 2例 ,以序列特异性引物PCR (PCR SSP)技术对HLA DQβ1的 4 2种亚型进行检测 ,并分析患者病情、免疫学指标及关节破坏程度与各亚型之间的关系。结果 在RA患者组中HLA DQβ1 0 4 0 1和 0 5 0 1等位基因的频率 (分别为 11 9%、7 1% )显著高于对照组 (分别为 3 6 %、1 2 % ) (χ2 =4 0 85 ,RR =4 0 6 ;χ2 =4 72 5 ,RR=6 83;P <0 0 5 ) ,而HLA DQβ1 0 6 0 2的频率则明显低于对照组 (7 1%vs 19 0 % ) (χ2 =5 2 3;P<0 0 5 )。HLA DQβ1 0 4 0 1/ 0 30 1或 0 4 0 1/ 0 30 3及HLA DQβ1 0 5 0 1/ 0 30 1基因型在RA患者中的阳性率 (分别为 19 0 5 %、9 5 2 % )显著高于对照组 (分别为 2 38%、0 % ) (χ2 =6 0 98,P =0 0 14 ;χ2 =4 2 0 0 ,P =0 0 4 0 ) ,差异具有显著性。HLA DQβ1 0 3阳性的RA患者与阴性患者相比发病年龄早 ,关节破坏严重 ,关节外表现明显增多 ,并与部分实验室指标异常呈正相关 ,其中HLA DQβ1 0 3纯合子 (HLA DQβ1 0 3/ 0 3)患者的上述异常更为显著。 结论 HLA DQβ1 0 4 0 1及 0 5 0 1亚型、HLA DQβ1 0 4 0 1/ 0 3及HLA
- 贾园贾汝琳韩蕾穆荣陈适栗占国
- 关键词：类风湿关节炎易感基因
- 类风湿关节炎患者HLA—DR4／1表型与流感病毒血凝素特异性T细胞增殖及其抗体的关系
- 2008年
- 目的探讨类风湿关节炎（RA）患者人类白细胞抗原（HLA）-DR4／1表型与流感病毒血凝素（HA）308-317多肽特异性T细胞增殖和血清抗HA308-317抗体之间的关系。方法将HA308-317多肽与70例RA患者外周血单个核细胞（PBMC）共孵育5d，^3H掺入法测定T细胞增殖。用ELISA法检测RA患者血清HA308-317抗体水平。以序列特异性引物聚合酶链反应（PCR-SSP）技术对RA患者进行HLA-DR分型。结果在70例RA患者中，27例HLA-DR4／1表型阳性。其中，HA308-317多肽可刺激T细胞增殖的RA患者有17例（62.9％），10例无反应性；15例（55．6％）HLA-DR4／阳性RA患者抗HA308-317抗体阳性。在HLA-DR4／1表型阴性的RA患者中，T细胞对HA308-317多肽有反应性者10例（23．3％），无反应性者33例；25例（58．1％）患者抗HA308-317抗体阳性。HLA-DR4／1表型阳性组HA308-317特异性细胞增殖高于HLA-DR4／1表型阴性组（P〈0．01），但两组血清中HA308—317抗体水平差异无统计学意义（P〉0．05）。结论RA患者HA308-317特异性T细胞增殖与HLA-DR4／1表型有关，HA308-317抗体生成与HLA-DR4／1亚型无明显关系；HA308—317多肽可能通过诱导HLA-DR4／1特异性T细胞活化参与RA的发病。
- 李霞李茹栗占国
- 关键词：HLA-DR抗原抗体
- CⅡ变构肽对胶原性关节炎T细胞免疫的影响
- 2006年
- 目的探索连续替换CⅡ多肽中268-270位氨基酸的变构肽对胶原性关节炎(CIA)抑制作用的可能机制。方法CⅡ268-270变构肽90μg静脉注射,每周1次治疗CIA大鼠;设置无关肽对照组和空白对照组。ELISA方法检测大鼠血清TH1／TH2细胞因子水平及抗CⅡ抗体及其亚型。荧光实时定量RT-PCR检测调节性T细胞标记Foxp3 mRNA表达。结果CⅡ268-270变构肽、无关肽及空白对照组血清IFN-γ水平分别为41．42±7．32、54．63±11．15和57．86±5．64 pg/ml,变构肽可降低大鼠血清IFN-γ水平(P<0．01)。变构肽、无关肽及空白对照组血清IL-10水平分别为40．18±5．13、31．09±5．04和30．19±5．02 pg/ml,变构肽可以提高大鼠血清IL-10水平(P<0．01)。变构肽、无关肽及空白对照组抗CⅡIgG2a抗体滴度分别为0．5±0．21、1．1±0．27和1．3±0．29,变构肽可以显著降低抗CⅡIgG2a抗体滴度(P<0．01)。变构肽、无关肽及空白对照组抗CⅡIgG1抗体滴度分别为1．2±0．24、0．58±0．11和0．6±0．12,变构肽可以显著上调抗CⅡIgG1抗体滴度(P<0．01)。变构肽、无关肽及空白对照组Foxp3 mBNA表达丰度分别为33．62±12．12、10．05±6．08和9．73±6．03,变构肽可以显著上调大鼠Foxp3 mRNA表达丰度(P<0．01)。结论CⅡ268-270变构肽可以调节CIA中异常的TH1/TH2细胞因子平衡,可以抑制IgG2a型抗CⅡ抗体产生,诱导Foxp3阳性T细胞产生。
- 姚中强李萍栗占国
- 关键词：胶原性关节炎变构肽调节性T细胞辅助性T细胞
