广东省自然科学基金(S2012040007958)
- 作品数：5 被引量：26H指数：4
- 相关作者：黄树林邵红伟王辉王苑芳彭鑫更多>>
- 相关机构：广东药学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 应用RAPD分子标记技术探讨3种石斛属植物的种间关系被引量：7
- 2014年
- 采用RAPD分子标记技术,分析了金钗石斛、铁皮石斛和齿瓣石斛三种石斛属植物的种间关系。10个引物产生的113条DNA扩增片段中,106条(93.81%)具有多态性,利用113个RAPD标记,计算遗传距离,利用非加权组平均法建立聚类图。结果表明,RAPD标记技术较好地从分子水平揭示金钗石斛、铁皮石斛和齿瓣石斛三种石斛属植物的遗传背景、亲缘关系,并为后期在DNA水平上对药用石斛的开发利用提供资料。
- 张杨陈志宽赖育菠黄树林邵红伟
- 关键词：石斛属RAPD分析亲缘关系
- 冬凌草甲素抗胰腺癌作用的实验研究被引量：4
- 2014年
- 目的:探讨冬凌草甲素诱导胰腺癌细胞株PANC-1凋亡的作用及其机制。方法:MTT法检测细胞存活率;Hoechst 33342染色后激光共聚焦显微镜观察细胞形态;PI染色后流式细胞术检测PANC-1细胞凋亡率;Western blotting检测JNK和p38 MAPK信号通路凋亡相关蛋白的表达。结果:冬凌草甲素作用PANC-1细胞24 h后,可浓度依赖性降低细胞存活率,IC50为49.80μmol/L。冬凌草甲素50、80μmol/L处理24 h后的PANC-1细胞可见典型的凋亡核改变,流式细胞仪分析细胞凋亡率明显增加。Western blotting结果证实80μmol/L冬凌草甲素可降低PANC-1细胞JNK、p38、Caspase-9、Caspase-3和PARP的蛋白表达,增加p-JNK、p-p38和活化的Caspase-9的蛋白表达。结论:冬凌草甲素可诱导胰腺癌PANC-1细胞凋亡,其机制与JNK和p38 MAPK信号转导通路凋亡相关蛋白的活化有关。
- 王辉王苑芳刘填桂项夏霖黄树林
- 关键词：冬凌草甲素凋亡MAPK信号通路
- 人脐带间充质干细胞培养上清对正常人淋巴细胞各亚群比例的影响被引量：5
- 2014年
- 目的:研究人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)培养上清对正常人外周血单个核细胞(PBMC)活化、生存及其各淋巴细胞亚群比例的影响。方法:通过密度梯度离心法分离PBMC,加入OKT3刺激,用含有hUC-MSCs培养上清的条件培养基(MSC-CM)处理PBMC,流式细胞术分析比较处理组和对照组各淋巴细胞亚群比例的变化,ELISA法检测MSC-CM对PBMC分泌IFN-γ、IL-10的影响,Annexin V/PI双染确定活化PBMC的凋亡情况。结果:MSC-CM下调了CD4+/CD8+T细胞比值,上调了PBMC中CD4+CD25+CD127lowTreg细胞的含量,而对其他淋巴细胞亚群的比例无显著影响;MSC-CM抑制了PBMCs分泌IFN-γ的能力,但对IL-10的分泌有促进作用;此外,MSC-CM对PBMCs有保护作用,降低了PBMC在OKT3刺激下的凋亡程度。结论:人脐带间充质干细胞的免疫抑制功能可不依赖于与免疫细胞的直接或间接接触,并且与诱导免疫细胞凋亡无关,促进Treg细胞的增殖和活化可能是人脐带间充质干细胞发挥其免疫抑制功能的途径之一。
- 陈璇袁茵邵红伟卢志毅张柳华黄树林
- 关键词：人脐带间充质干细胞调节性T淋巴细胞免疫调节
- 游离脂肪酸混合物对肝细胞脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响被引量：8
- 2014年
- 目的:研究游离脂肪酸(FFA)混合物对肝细胞L-02的脂毒性及脂代谢相关基因表达的影响。方法:正常肝细胞L-02分别用正常培养基和0.5、1、2 mmol/LFFA混合物(油酸和软脂酸的比例为2:1)培养24 h后,尼罗红染液室温避光染色,激光共聚焦显微镜及流式细胞仪确定细胞内脂质堆积情况。组织细胞酶法测定试剂盒测定细胞内甘油三酯含量。MTT法分析细胞存活率,Annexin V-PI凋亡检测试剂盒分析肝细胞的凋亡情况,丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天冬氨酸氨基转移酶(AST)测定试剂盒分别检测培养液中ALT和AST活性。实时定量PCR技术检测脂代谢相关的脂肪分化相关蛋白(ADRP)和固醇调节元件结合蛋白1(SREBP-1)的mRNA表达情况。结果:各浓度FFAs混合物均可剂量依赖性增加肝细胞脂肪堆积和肝细胞甘油三酯含量,且1 mmol/LFFA混合物可增高肝细胞的甘油三酯含量2.6倍,与非酒精性脂肪肝病人的变化基本相同。2 mmol/LFFA混合物可降低肝细胞L-02细胞存活率并诱导细胞凋亡,而0.5 mmol/L和1 mmol/LFFA混合物对细胞无明显影响。与对照组相比,各浓度FFA混合物对细胞上清中ALT和AST活性无明显影响。1 mmol/LFFA混合物作用后可分别上调肝细胞的ADRP和SREBP-1 mRNA的表达2.660和2.758倍。结论:FFA混合物可诱导肝细胞L-02脂肪变性且2mmol/LFFA混合物可造成轻度细胞损伤。脂代谢相关基因ADRP和SREBP-1表达上调与FFA混合物诱导的脂肪变性相关。
- 王辉陈骁项夏霖彭鑫王苑芳刘填桂黄树林邵红伟
- 关键词：非酒精性脂肪肝病游离脂肪酸脂毒性脂肪分化相关蛋白
- ERp57在非酒精性脂肪肝中的作用被引量：2
- 2014年
- 目的探讨蛋白二硫化物异构酶A3(ERp57)在非酒精性脂肪肝病中的作用。方法用1mmol/L脂肪酸混合物(油酸/软脂酸比例为2∶1)作用于人肝细胞L02构建脂肪肝细胞模型,采用RNA干扰技术在脂肪肝模型中抑制ERp57表达。流式细胞仪和荧光显微镜观察抑制ERp57表达后肝细胞脂质堆积情况,流式细胞仪检测肝细胞凋亡情况,Western blot技术检测脂代谢相关蛋白固醇调节元件结合蛋白(SREBP-1)表达情况。结果 Western blot显示,ERp57 siRNA转染L02细胞有效抑制了ERp57表达,减少了L02细胞内脂质堆积,但对脂肪酸混合物诱导的肝细胞凋亡无明显影响。与对照siRNA转染组相比,ERp57 siRNA转染组肝细胞的SREBP-1蛋白表达下调。结论抑制ERp57表达通过调节脂代谢相关蛋白SREBP-1减少L02细胞内脂质堆积。
- 王辉项夏霖刘填桂王苑芳
- 关键词：非酒精性脂肪肝病脂肪堆积
