国家自然科学基金(30600541) 作品数:8 被引量:12 H指数:3 相关作者: 姜奕 陈洋 刁骋 崔华东 祁赞梅 更多>> 相关机构: 中国医科大学附属第一医院 中国医科大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 辽宁省自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
白细胞介素-10信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr^-小鼠脾细胞功能及活性影响的比较 2008年 我们以C57BL/6和MRL/lpr^-小鼠的脾细胞为研究对象,进一步研究白细胞介素(IL)-10受体的信号转导机制及其在系统性红斑狼疮(SLE)发病过程中所起的作用。 张婧 刁骋 崔华东 李莉 祁赞梅 姜奕关键词:白细胞介素-10 信号转导机制 C57BL/6 脾细胞 小鼠 C57BL/6 不同恶性度膀胱癌细胞系的比较蛋白组学研究 2011年 目的利用比较蛋白质组学双向电泳技术,观察不同恶性程度和侵袭力的人膀胱移行细胞癌细胞系T24和BIU-87蛋白表达谱的变化。方法人膀胱癌细胞(BIU-87和T24)经培养后提取总蛋白。双向凝胶电泳,经考马斯亮蓝染色后比较两者蛋白图谱寻找差异表达蛋白质。采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和蛋白质数据库检索鉴定差异蛋白。结果比较T24和BIU-87的蛋白质斑点发现差异大于2倍的蛋白质点153个,对其中94个差异蛋白斑点进行了质谱鉴定和肽质量指纹图分析。相对于BI-U-87,恶性度高的T24表达上调的蛋白质有Rho GDP-解离抑制因子1、组织蛋白酶D、细胞角化蛋白19、ACTG1蛋白、超氧化物歧化酶、热休克蛋白、ACTB蛋白和硫氧还蛋白4等;表达下调的蛋白有14-3-3δ蛋白、orphan hormone nuclear receptor RORalpha3等。结论人膀胱移行细胞癌T24和BIU-87细胞有153个蛋白质的表达发生变化。深入分析这些差异表达蛋白的功能与调控,有望为寻找恶性程度相关的生物学标记物提供重要的实验依据。 都姝妍 蔡鑫泽 刘楠 陈冬 姜奕关键词:膀胱移行细胞癌 二维凝胶电泳 蛋白质组 白细胞介素10信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr^-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性影响的比较 被引量:4 2008年 目的:体外比较白细胞介素10(IL-10)信号转导机制对C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞功能及活性的影响。方法:分别分离C57BL/6和MRL/lpr-小鼠腹腔巨噬细胞进行培养;用不同浓度IL-10(0.01、0.1、1和10ng/ml)进行刺激,用MTT法测定比较两种品系小鼠腹腔巨噬细胞的增殖反应能力;Real time PCR分别测定其产生前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF、TNF-α的量;用100ng/mlIL-10分别刺激两种品系小鼠腹腔巨噬细胞10分钟,免疫印迹法比较两种细胞中JAK1、TYK2、STAT3及磷酸化水平。结果:C57BL/6小鼠巨噬细胞数及其产生的前炎性细胞因子量随IL-10刺激浓度的增加而递减;MRL/lpr-小鼠巨噬细胞数及其前炎性细胞因子IL-1α、M-CSF的量随IL-10刺激浓度的增加而递增,但巨噬细胞产生TNF-α的量随IL-10刺激浓度的增加而递减;MRL/lpr-小鼠细胞内信号转导分子的磷酸化水平低于C57BL/6。结论:MRL/lpr-小鼠的细胞免疫和炎症反应不能被IL-10抑制,可能是由于其信号转导过程中的缺陷所致。 张婧 刁骋 崔华东 陈洋 祁赞梅 姜奕关键词:信号转导 白细胞介素10及受体在系统性红斑狼疮患者中表达的研究 被引量:3 2011年 目的明确白细胞介素10(IL-10)及IL-10受体(IL-10R)在系统性红斑狼疮(SLE)发病过程中的作用。方法应用流式细胞微球捕获技术检测血浆IL-10表达水平,应用流式细胞方法检测外周血白细胞表面IL-10R表达水平。共检测40例SLE患者和20例正常对照者。以SLE疾病活动性指数(SLEDAI)判定SLE疾病活动性。结果狼疮肾炎(LN)患者血浆IL-10表达水平较正常对照者高。各细胞亚群表面的IL-10R表达水平在SLE和正常对照组中相似,但是,LN患者的CD4+和CD8+T细胞表面IL-10R表达降低。血浆IL-10水平与SLEDAI没有相关性,而CD4+T细胞和CD8+T细胞的IL-10R1表达水平与SLEDAI呈明显负相关。结论 IL-10及其受体在狼疮肾炎发病过程中可能具有重要的作用。 崔华东 刘冬梅 张宁 祁赞梅 姜奕关键词:系统性红斑狼疮 狼疮肾炎 白细胞介素10 IL-22RA1基因多态性与系统性红斑狼疮发病相关性的研究 被引量:3 2011年 目的探讨白细胞介素22受体A1(IL-22RA1)外显子基因多态性与中国北方汉族人群系统性红斑狼疮(SLE)及狼疮肾炎(LN)发病的相关性。方法利用基因测序、聚合酶链式反应-单链构象多态性(PCR-SSCP)电泳技术对中国北方汉族人群IL-22RA1基因单核苷酸多态性(SNP)进行筛选,通过比较基因型在SLE病例组与健康对照组中的分布,进而研究IL-22RA1与SLE/LN的相关性。结果在IL-22RA1基因第7外显子处存在1个有义SNP位点,该位点存在3种基因型,即C/C型、C/G型和G/G型。各型在SLE病例组和健康对照组中的分布差异无统计学意义。结论 IL-22RA1外显子基因有义SNP与中国北方汉族人群SLE的易感性可能无相关性。 王红蕾 方向 李一雷 蔡鑫泽 陈洋 姜奕关键词:系统性红斑狼疮 狼疮肾炎 白细胞介素22 单核苷酸多态性 高糖培养下人肾小球系膜细胞蛋白表达谱变化的研究 被引量:1 2010年 目的 利用比较蛋白质组学双向电泳技术研究体系,观察高糖培养下人肾小球系膜细胞(HMC)蛋白表达谱的变化.方法 人肾小球系膜细胞分为高糖培养组(30 mmol/L)和正常糖组(5 mmol/L),培养48 h后收集细胞,提取总蛋白,以DIGE饱和荧光标记,双向荧光差异凝胶电泳.应用Typhoon多功能成像系统扫描凝胶,DeCyder 2-D差异分析软件进行图像分析,寻找差异表达蛋白质.采用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和蛋白质数据库检索鉴定差异蛋白.结果 通过DeCyder 2-D差异分析软件,发现正常糖组和高糖培养组之间差异大于1.5倍的蛋白质斑点147个,对其中96个差异蛋白质斑点进行了肽质指纹图分析,鉴定出37种蛋白质.其中磷脂酰乙醇胺结合蛋白1(PEBP-1)、粒溶素、ATP合成酶H+转运线粒体F0复合体亚基F2仅在高糖组表达.高糖刺激后表达上调的蛋白质有24个,包括嗜酸细胞阳离子蛋白、RGS膜相互作用蛋白16(MIR16)、肽酰-脯氨酰-顺反式异构酶、disks large homolog DLG2、早发性乳腺癌2(BRCA2)、儿茶酚-邻-甲基转移酶等;表达下调的蛋白有5个,包括O-GlcNAc transferase-interacting protein 106 000 isoform 1、proteasome beta 6 subunit precursor、NEFA-interacting nuclear protein NIP30等.结论 高糖培养下HMC内147种蛋白质的表达发生变化.这些蛋白质广泛参与高糖对HMC的细胞骨架、糖代谢、细胞分裂、基因转录、信号转导、磷酸化、细胞增殖、凋亡等的调节.深入分析这些差异表达蛋白的功能与调控,有望为阐明糖尿病肾病的发病机制提供重要的实验依据. 都姝妍 范秋灵 王力宁 杨刚 姜奕关键词:蛋白质组学 肾小球系膜细胞 高糖 结直肠癌组织的二维荧光差异凝胶电泳分析 被引量:1 2009年 目的以二维荧光差异凝胶电泳(2-D DIGE)技术分析结直肠癌(CRC)组织及正常结直肠组织的蛋白质表达差异。建立二者间的蛋白质表达差异图谱。方法6对样品分别取自6例CRC手术切除的新鲜的癌和正常肠黏膜组织,进行2-D DIGE,TyphoonTM多功能扫描仪进行图像扫描,并以DeCyderTM2-D差异分析软件分析。结果正常肠黏膜组织和癌组织有统计学差异(P<0.05)的表达蛋白点共有315个,癌组织中表达上调(>1.5倍)的有138个,下调(>1.5倍)的有103个。结论建立了CRC与正常肠黏膜组织的2-D DIGE图谱,发现并经统计学证实癌组织中有表达上调或下调的蛋白存在。 王宁 陈洋 乔莹 李莉 王若梅 于爽 董明 姜奕关键词:结直肠癌 蛋白质组学 白细胞介素-10受体1基因多态性与系统性红斑狼疮ds-DNA抗体水平关系的研究 2009年 栗霄立 刘林林 王力宁 李子龙 李艳秋 刘晓丹 马健飞 冯江敏 姜奕关键词:系统性红斑狼疮 基因多态性