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紫杉醇药物中间体的合成生物学研究进展被引量：4: 2013年; 天然药物合成生物学技术的发展促进了临床上重要的抗肿瘤药物紫杉醇的异源生物合成的研究,本文简要综述了紫杉醇药物中间体在大肠杆菌和酿酒酵母等工程细胞中异源生物合成途径的组建、代谢调控和代谢产物的分析及其规模化发酵生物制备的瓶颈问题。; 王伟杨燕郑晓东黄淑琼郭磊孔建强程克棣; 关键词：紫杉醇大肠杆菌酿酒酵母合成生物学

紫花地丁中抗甲型H1N1流感病毒的环肽被引量：6: 2014年; 本研究从紫花地丁全草中分离得到3个环肽。其中,varv peptide E和cycloviolacin Y5已报道,另一种新的环肽命名为cycloviolacin VY1。环肽经DTT还原、碘乙酰胺(IAA)烷基化,再分别利用赖氨酸内肽酶、胰蛋白酶和糜蛋白酶酶解,通过MS/MS质谱解析酶解肽段的碎片离子鉴定出其结构。稳定性分析再次证实其具有一般环肽的特性,能较好地耐受胰蛋白酶和糜蛋白酶酶解及耐热变性。体外活性评价结果表明其对甲型H1N1流感病毒具有较强的抑制作用,其半数抑制浓度(IC50)为(2.27±0.20)μg·mL-1。它是报道的第一个具有抑制甲型H1N1流感病毒的活性环肽。; 刘忞之杨燕张书香唐亮王惠敏陈成娟申竹芳程克棣孔建强王伟; 关键词：紫花地丁环肽

固定化分选酶介导的多肽环化被引量：1: 2015年; 多肽环化修饰是提高其稳定性和生物活性的重要手段之一,本研究建立了含有适于亲和色谱纯化的6个组氨酸和几丁质结合域两个融合标签的分选酶表达系统,纯化获得了目的蛋白;酶促动力学实验结果表明融合标签对其催化活性没有影响;以N-端含有3个甘氨酸和C-端含有分选酶识别序列的线性肽为底物研究了固定化酶催化线性肽的环化,该技术操作简单,易于酶促反应产物的分离纯化和固定化酶再利用,可直接用于环肽类药物的化学-酶法合成。; 张书香刘忞之杨燕程克棣孔建强王伟; 关键词：固定化酶环肽环化

中国红豆杉细胞色素P450还原酶的基因克隆、表达与活性分析被引量：17: 2010年; 细胞色素P450还原酶(Cytochrome P450 reductase,CPR)是细胞色素P450羟基化酶电子传递链的组成部分,在生物体内起着重要的电子传递作用。文章从中国红豆杉(Taxuswallichiana var. Chinensis)愈伤组织细胞中克隆CPR基因(TchCPR),TchCPR含有一个2154bp碱基的阅读框,编码717个氨基酸残基;在氨基酸水平上它与裸子植物细胞色素P450还原酶的同源性(>82%)高于其他被子植物的细胞色素P450还原酶(<74%)。在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达了全长和从N-端截短不同数目氨基酸残基的6个融合肽段,经亲和层析纯化,分析了表达的不同长度融合蛋白的电子传递效率。结果表明截短长度大于61个氨基酸残基肽段的胞色素P450还原酶都能够诱导表达,在表达水平上无显著差异,而截短61个氨基酸的CPR融合蛋白电子传递的催化活性(1.6057nmol Cyt Cred/min/μg TchCPR融合蛋白)高于其他4个融合蛋白。; 阮仁余孔建强郑晓东张书香秦成蕴程克棣王建明王伟; 关键词：中国红豆杉

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国家自然科学基金(30772677)