中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2012ZL088)
- 作品数：2 被引量：14H指数：2
- 相关作者：赵建军闫喜军白雪柴秀丽胡博更多>>
- 相关机构：中国农业科学院特产研究所黑龙江省铁路兽医卫生处更多>>
- 发文基金：中央级公益性科研院所基本科研业务费专项国家级星火计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 动物负链RNA病毒反向遗传操作的构建策略及应用被引量：3
- 2013年
- 以T7RNA聚合酶或RNA聚合酶Ⅰ/Ⅱ为基础的病毒反向遗传操作系统在设计构建和应用上由繁到简不断改进。本文分别以新城疫病毒、狂犬病病毒和禽流感病毒等负链RNA病毒为例,综述了近十年来病毒反向遗传操作中的构建策略创新及其在分子病毒学和反向疫苗学的应用,旨在为更好地利用该技术提供参考。
- 朱春生赵建军闫喜军王伟
- 关键词：反向遗传操作
- 稳定表达貉犬瘟热病毒细胞受体SLAM的Vero细胞系的建立及应用被引量：11
- 2012年
- 【目的】信号淋巴激活分子(SLAM又称CD150)为犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)的细胞受体。本研究目的在于建立稳定表达犬瘟热易感动物貉SLAM基因的Vero细胞系,用于犬瘟热诊断及CDV强毒株的快速分离。【方法】从重组质粒pMD-18-T-rSLAM扩增rSLAM基因编码区,通过分子克隆技术构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-rSLAMhis。将该质粒转染Vero细胞后,经EGFP荧光观察、G418抗性压力和单细胞克隆化及RT-PCR筛选表达rSLAM阳性细胞系。应用获得细胞系对临床犬瘟热病例进行病毒分离,对分离得到CDV进行RT-PCR鉴定及动物回归试验。【结果】经过RT-PCR和免疫组化试验证实,本实验筛选获得一株能稳定表达rSLAM的Vero细胞系———Vero-rSLAM。该细胞系接种CDV阳性样品36-48h即可产生典型CDV致细胞融合病变,而其亲本Vero细胞接种至6d均无可见细胞病变出现。应用Vero-rSLAM细胞系从狐狸、貉犬瘟热阳性病料中分离获得了3株犬瘟热病毒。其中犬瘟热病毒LN(10)f1株对易感狐狸、貉均可产生致死性感染。【结论】成功建立了稳定表达rSLAM的Vero细胞系,用它分离的CDV对本动物保持较强的毒力。
- 赵建军闫如勋张海玲张蕾胡博白雪邵西群柴秀丽闫喜军吴威
- 关键词：犬瘟热病毒VERO细胞
