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TNFR Ⅰ-IgGFc融合基因重组腺病毒表达载体的构建及其在骨髓基质干细胞的表达: 2007年; 目的构建携带人肿瘤坏死因子受体Ⅰ-胞外区和IgGFc融合基因的重组腺病毒载体（Ad—TNFR Ⅰ-IgGFc），体外转染兔骨髓基质干细胞（BMSCs），探讨转TNFR Ⅰ-IgGFc基因的BMSCs治疗类风湿关节炎的可行性。方法将TNFR Ⅰ-I如Fc基因插入腺病毒穿梭质粒pDC316，与辅助质粒pBHGlox△E1，3Cre共转染HEK293细胞，重组产生Ad—TNFR Ⅰ-IgGFc，PCR鉴定毒种正确后，进行扩增、纯化和滴度测定，转染培养至第2代BMSCs，利用RT—PCR、原位杂交、免疫组化方法，检测转染后细胞中TNFR Ⅰ-IgGFc的转录和表达。结果成功构建了Ad-TNFR Ⅰ-IgGFc，感染性滴度达3×10^10 TCID50／mL，转染后BMSCs在mRNA和蛋白水平均有TNFR Ⅰ-IgGFc表达。结论构建的Ad—TNFR Ⅰ-IgGFc可有效转染BMSCs，并在其中高效表达，为将表达TNFR Ⅰ-IgGFc基因的BMSCs用于类风湿关节炎治疗的实验研究提供了基础。; 温茜马骊金丹崔建德罗微王小宁; 关键词：肿瘤坏死因子腺病毒载体骨髓基质干细胞

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国家高技术研究发展计划(2007AA022458)