国家质检总局科技计划项目(2003IK046)
- 作品数：6 被引量：51H指数：4
- 相关作者：邵碧英陈文炳江树勋李寿崧杨婕更多>>
- 相关机构：福建出入境检验检疫局更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目福建省农科院青年科技人才创新基金福建省科技重大专项更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 转基因大豆中外源基因的二重PCR检测被引量：1
- 2005年
- 用CTAB法提取转基因大豆(Roundup Ready品系)的总DNA.根据行业标准SN/T 1195-2003,合成用于扩增花椰菜花叶病毒(Cauliflowerm osaic viru,s CaMV)35S启动子的引物S1和S2、根癌农杆菌(Agrobacterium tum efaciens)CP4菌株EPSPS基因的引物Ea、ER和Eb.应用这5条(2组)引物对转基因大豆进行二重PCR检测时,扩增得到2个新片段,分别与片段S1ER、S1Eb大小一致.将片段S1ER、S1Eb进行克隆并测序,序列已在GenBank上登录,接受号分别为AY592954和AY596948.序列分析结果表明,片段S1ER含有CaMV 35S启动子和矮牵牛叶绿体转运肽序列(CTP)的部分序列,片段S1Eb含有CaMV 35S启动子部分序列、CTP和CP4 EPSPS基因的部分序列,原用于扩增CP4 EPSPS基因的引物中,仅引物Eb位于CP4 EPSPS基因中.重新合成扩增CP4 EPSPS基因的引物E1和E2,建立的二重PCR方法不仅适合于转基因RoundupReady大豆,还适合于其它植物中的CaMV 35S启动子和CP4 EPSPS基因的同时检测.
- 邵碧英陈文炳江树勋李寿崧
- 关键词：大豆二重PCR
- 番茄、甜椒中转基因成分和内源基因的多重PCR检测方法的建立被引量：15
- 2004年
- 采用SDS法提取番茄未成熟及成熟果实和甜椒成熟果实中的总DNA,内源rbcL基因扩增结果均为阳性,表明已提取到DNA及DNA中不存在抑制PCR的物质。应用花椰菜花叶病毒(Cauliflower mosaic virus,CaMV)35S启动子、根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子和大肠杆菌K12菌株新霉素磷酸转移酶Ⅱ(nptⅡ)基因的三重PCR检测样品DNA中的转基因成分,结果均为阴性。将番茄、甜椒的DNA和阳性质粒pBI121进行混和,作为PCR反应的DNA模板,成功建立了可同时检测内源rbcL基因、nptⅡ基因、CaMV35S启动子和nos终止子的多重PCR方法。多重PCR方法具有快速、简便、准确等特点,在转基因产品检测上具有重要的应用价值。
- 邵碧英江树勋陈文炳李寿崧
- 关键词：番茄甜椒转基因成分多重PCR
- 玉米及其制品中转基因成分的单一PCR及多重PCR检测被引量：13
- 2005年
- 采用CTAB法提取玉米及其制品的总DNA,用PCR方法检测其中的转基因成分如花椰菜花叶病毒(Cauliflowermosaicvirus,CaMV)35S启动子、根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)胭脂碱合成酶基因(nos)终止子、根癌农杆菌CP4菌株的EPSPS基因、吸水链霉菌(Treptomyceshygroscopicus)bar基因及苏云金芽孢杆菌库尔斯塔克亚种(Bacillusthuringiensissubsp.kurstaki)cryIA(b)基因,筛选到阳性样品,并建立了几组玉米内源zein基因和转基因成分之间的多重PCR检测方法。结果表明,建立的多重PCR方法用于同时检测玉米内源基因和转基因成分是可行的,值得推广;虽然我国还未有已获准商品化生产的转基因玉米,但国外转基因玉米已流入福建省。
- 邵碧英陈文炳
- 关键词：玉米转基因成分PCR多重PCR
- 大豆及其制品中转基因成分的二重PCR检测
- 为了建立能同时检测多种转基因成分的二重PCR检测方法,以转基因大豆(Roundup Ready品种)为实验材料,优化了二重PCR的反应体系和反应条件,包括引物浓度、Taq DNA酶用量和退火温度等。比较了二重PCR和单一...
- 邵碧英江树勋陈文炳李寿崧
- 关键词：大豆转基因成分二重PCR
- 文献传递
- 转基因产品检测方法概述被引量：12
- 2004年
- 随着转基因技术的快速发展,转基因生物及其产品日益增多,但其安全性问题引起了国际社会的广泛关注。转基因产品的检测已纳入国内外检验检疫部门的检测项目,采用的检测方法是建立在已商品化生产的转基因生物外源基因的构建及表达情况的基础上的,包括蛋白质检测和DNA检测方法。蛋白质检测方法有ELISA、试纸条、免疫PCR等,DNA检测方法有PCR、多重PCR、PCR-ELISA、PCR-GeneScan、荧光定量PCR、基因芯片等。
- 邵碧英陈文炳江树勋李寿崧
- 关键词：蛋白质检测DNA检测免疫PCR转基因技术转基因生物
- 马铃薯及其制品中转基因成分的多重PCR检测被引量：16
- 2006年
- 采用CTAB法提取15个马铃薯及其制品样品中的总DNA,内源PATA基因的PCR扩增结果均为阳性,表明已提取到DNA。应用根癌农杆菌胭脂碱合成酶基因(nos)终止子和大肠杆菌K12菌株新霉素磷酸转移酶Ⅱ(nptⅡ)基因的二重PCR对样品进行转基因成分检测,结果均为阴性。将马铃薯DNA和阳性质粒pBI121混合作为PCR的反应模板,建立了内源PATA基因、花椰菜花叶病毒(Cauliflowermosaicvirus,CaMV)35S启动子、nos终止子和nptⅡ基因之间的多重PCR检测方法。多重PCR方法具有节约试剂、节省时间等特点,在转基因产品检测上的应用值得推广。
- 邵碧英陈文炳杨婕
- 关键词：马铃薯转基因成分多重PCR
- 大豆及其制品中转基因成分的二重PCR检测被引量：3
- 2006年
- 为了建立能同时检测多种转基因成分的二重PCR检测方法,以转基因大豆(RoundupReady品种)为实验材料,优化了二重PCR的反应体系和反应条件,包括引物浓度、TaqDNA酶用量和退火温度等;比较了二重PCR和单一PCR的灵敏度和检测含量。结果表明:二重PCR的灵敏度和检测含量与单一PCR的相当;用建立的二重PCR方法从大豆、豆腐、豆粕和油炸豆腐中筛选出含转基因成分的阳性样品;二重PCR与单一PCR相比,具有节约试剂、省时等特点,在转基因产品检测上具有很好的推广价值。
- 邵碧英江树勋陈文炳李寿崧
- 关键词：大豆转基因成分二重PCR
