国家高技术研究发展计划(2202AA217031-2)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：刘景晶马艳红谷春娇李泰明刘涛更多>>
- 相关机构：中国药科大学更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学化学工程更多>>
- 重组人胰高血糖素样肽-1类似物的制备及活性分析
- 2011年
- 通过重叠PCR的方法获得重组人胰高血糖素样肽-1(GLP-1)类似物PP-h[Gly8]GLP-1的目的基因片段,将该基因与融合表达载体pED连接,并在融合伴侣的N末端插入6×His标签,转入E.coli BL21(DE3),构建出重组GLP-1类似物融合表达菌。PP-h[Gly8]GLP-1通过Ni离子亲和色谱和酸水解等步骤分离纯化得到,其纯度大于90%,用电喷雾质谱法测定其相对分子质量与理论分析结果一致。ICR小鼠经口给予耐血糖及血浆胰岛素测定的结果表明,PP-h[Gly8]GLP-1具有明显的降血糖活性和促胰岛分泌作用(P<0.01),为开发潜在的治疗糖尿病药物提供了理论基础。
- 李泰明马艳红徐舒刘涛谷春娇徐辰刘景晶
- 关键词：分离纯化生物活性2型糖尿病
- Exendin-4类似物的克隆、表达与体内生物活性检测
- 2012年
- 为研究Exendin-4类似物的克隆,融合表达及在体内的生物活性,在pED载体融合伴侣序列中插入利于下游分离纯化的序列成为5#载体,将Exendin-4类似物基因与5#载体中的融合伴侣基因通过酸水解位点连接,转化至E.coli BL21中并诱导表达融合蛋白,酸水解将目的肽与融合伴侣分开后,经阴离子交换树脂分离得到目的肽。6周～8周正常雄性ICR小鼠皮下注射Exendin-4类似物后,口服糖耐量实验检测在不同时间段小鼠血液中葡萄糖及胰岛素含量的变化。结果表明:融合蛋白的表达量占菌体总蛋白的40%,Exendin-4类似物纯度达91.8%。Exendin-4类似物的活性与对照组相比,具有显著的降低血糖和显著促进胰岛素分泌的活性(P<0.01)。
- 李泰明谷春娇葛晓宇李哲哲王丹马艳红刘涛张美由李丽刘景晶
- 关键词：生物活性血糖胰岛素
