国家质检总局科技计划项目(2010IK269)
- 作品数：5 被引量：92H指数：2
- 相关作者：顾建锋王江岭张建成段维军陈先锋更多>>
- 相关机构：宁波出入境检验检疫局嘉兴出入境检验检疫局江西农业大学更多>>
- 发文基金：国家质检总局科技计划项目宁波市自然科学基金国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 食菌伞滑刃线虫和阿苏里伞滑刃线虫的比较鉴定
- 2012年
- 宁波口岸在进境木质包装检疫中经常截获食菌伞滑刃线虫和阿苏里伞滑刃线虫,这2种线虫都属于fungivorus组,形态上十分近似。主要区别在于:前者唇区缢缩十分明显,而后者缢缩不明显;前者排泄孔与半月体平均距离较远(约11μm),而后者较近(约5μm);前者雄虫热杀死后尾部强烈向腹面弯曲(超过180°),后者尾部略腹弯(约90°);前者基顶与喙突相距约9.8μm,喙突高约2.7～3.5μm,后者则分别为8.4μm和1.5～2.8μm;前者雌虫尾多数腹弯十分明显,尾较短(长约50μm),后者尾一般略腹弯(长约68μm)。此外,ITS区的PCR-RFLP方法可区分上述2种线虫。
- 顾建锋王江岭
- 关键词：形态学RFLP
- 东亚型和欧洲型拟松材线虫的形态学和ITSPCR-RFLP鉴定被引量：2
- 2012年
- 对宁波口岸截获的不同来源木质包装中的东亚型和欧洲型拟松材线虫进行形态学和ITSPCR-RFLP研究。选用5种限制性内切酶RsaI,HaeⅢ,MspI,HinfI,AluI对各株系单条线虫ITS区PCR扩增产物进行酶切,发现限制性内切酶RsaI有3种酶切结果,表明ITS区段存在DNA序列异质性。研究再次证明ITSPCR-RFLP不但是伞滑刃线虫鉴定十分可靠的辅助手段,还可有效区分种内不同地理型。对拟松材线虫与松材线虫(包括"M"型和"R"型株系)、豆伞滑刃线虫、伪伞滑刃线虫等近似种的区别进行讨论。
- 王江岭顾建锋陈先锋段维军
- 关键词：拟松材线虫ITS-RFLP
- 一种锥尾伞滑刃线虫形态和RFLP图谱变化研究
- 2012年
- 宁波口岸植检实验室在来自台湾的榕属木质包装中截获一种伞滑刃线虫,经形态学观察、测量,ITS-RFLP图谱比对及序列分析,鉴定为锥尾伞滑刃线虫(Bursaphelenchus conicaudatus Kanzaki,Tsuda&Futai,2000)。该线虫属松材线虫组,与鲍嘉伞滑刃线虫最近似。本文着重对该线虫与近似种的形态特征区别及ITS-RFLP图谱种内变化进行讨论。
- 吴海波顾建锋王江岭郑经武
- 关键词：榕属
- 俄罗斯木质包装中杨树伞滑刃线虫的鉴定被引量：1
- 2011年
- 宁波口岸从来自俄罗斯的杨树木质包装中截获一种伞滑刃线虫,经形态学和分子生物学研究,鉴定为杨树伞滑刃线虫。该线虫与伪伞滑刃线虫十分近似,主要鉴定特征是:阴门盖明显腹弯,近阴门盖后半部的虫体明显凹陷;雄虫交合刺近远端边缘平直,无明显凹陷,远端盘状突十分显著;雌虫尾亚圆柱形或近圆锥形,尾端多数呈多变的尾尖突状,偶尔几乎钝圆。该线虫人工培养后雌虫尾形多数介于圆柱形和圆锥形之间,这与原始文献的报道有差异。这是我国口岸首次截获该线虫。
- 顾建锋王江岭邹国庆董爱民
- 关键词：形态学RFLP
- 单条线虫DNA提取方法被引量：90
- 2011年
- 大量线虫DNA的提取可能因线虫不纯而受到污染,溶液多次转移造成DNA损失,并且在提取过程中加入过多的溶质离子也可能对PCR扩增有干扰,从而影响下一步的研究。本研究用液氮快速冷冻单条线虫,继以85℃快速变温,用温度的剧烈变化使线虫裂解,再以蛋白酶K降解蛋白质,提高了获得的DNA的纯度和数量。通过多种线虫的验证试验表明,该方法高效、快速、稳定。该试验方法有如下优点:(1)使用Taq酶附带的PCR Buffer代替WLB裂解液和SDS裂解液,减少了配置的不确定性和外来离子的影响。(2)整个提取过程在一个PCR管中完成,并可直接用于PCR扩增,没有溶液的转移和过多的溶质添加,减少污染和对后续PCR的影响。(3)使用变温处理代替其他手工破碎方法,减少了外界污染物的掺入,不需要手工操作技巧。与另外2种提取线虫DNA的蛋白酶K方法相比,本研究提取单条线虫DNA的时间短,效率高,PCR扩增结果稳定可靠,符合快速检测的需求;此外,本研究所使用的方法降解单条线虫蛋白质彻底,提取DNA数量多,稀释32倍仍能扩增出明显的条带,可进行多次分子试验研究。
- 王江岭张建成顾建锋
- 关键词：线虫DNA提取温度
