江苏省卫生厅医学科研项目(200952)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：王胜军汤新逸秦伟陈艳红魏衍财更多>>
- 相关机构：江苏大学首都医科大学附属北京天坛医院更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅医学科研项目国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- IL-17^+ γδT细胞被引量：3
- 2011年
- IL-17是一种重要的炎症介质,最近研究显示,除了Th17细胞,γδT细胞也能够产生IL-17,并且比αβT细胞产生得更为迅速。与Th17细胞一样,γδT细胞产生IL-17的能力受多种因素影响,并和某些与IL-17相关的疾病有着密切联系,这对相关疾病的致病机制有了新认识,也为这些疾病的治疗提供了新思路。现就近年来对γδT细胞产生IL-17能力的研究,以及这群细胞和疾病的关系进行简要综述。
- 汤新逸王胜军
- 关键词：ΓΔT细胞IL-17自身免疫性疾病肿瘤
- 丹参川芎嗪注射液对低糖低氧/复供损伤大鼠皮层神经元的保护作用被引量：4
- 2011年
- 目的:通过建立新生大鼠的原代皮层神经元低糖低氧/复供损伤模型,探讨丹参川芎嗪注射液对缺血缺氧条件下神经细胞的保护作用。方法:选用新生大鼠的皮层神经元为研究对象,利用Na2S2O4与细胞共孵育造成神经细胞低糖低氧损伤,观察皮层神经元一般形态学及凋亡相关形态学的改变、检测神经元存活率、神经细胞外液乳酸脱氢酶(LDH)活性、活性氧簇活性、线粒体膜电位的变化、Caspase-3的活性以及Bcl-2、Bax的表达,并考察丹参川芎嗪对低糖低氧/复供损伤大鼠皮层神经元的作用。结果:建立了新生大鼠的原代皮层神经元低糖低氧/复供损伤模型,丹参川芎嗪注射液减轻低氧再灌注神经细胞的一般形态损伤,降低细胞内氧自由基水平和胞内LDH的释放率;提高低氧损伤的神经细胞线粒体膜电位的功能;明显抑制Caspase-3的活化,使其活性降低;显著降低Bax蛋白水平,但未改变Bcl-2蛋白的表达,进而降低Bax/Bcl-2比值。结论:在体外,丹参川芎嗪注射液在药理效应上表现出对低糖低氧/复供损伤的神经细胞的保护作用。
- 凌大林丁成赟王胜军
- 关键词：丹参川芎嗪注射液神经细胞氧自由基线粒体膜电位
- 人IL-21 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立及应用被引量：1
- 2013年
- 目的:建立检测人白细胞介素-21(interleukin-21,IL-21)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescencequantitative PCR,qRT-PCR)方法。方法:分离人外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC),磁珠分选CD4+细胞,经PHA刺激后提取总RNA并逆转录成cDNA。采用qRT-PCR方法检测IL-21 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,应用该方法检测Graves病患者CD4+T细胞中IL-21 mRNA的相对表达水平。结果:建立了人IL-21 mRNA的实时荧光定量PCR检测方法。该法的熔解曲线为单峰,核酸电泳显示为一特异性条带。Graves病患者CD4+T细胞中IL-21 mRNA的相对表达水平明显高于健康对照组(P<0.001)。结论:建立的检测人IL-21 mRNA的实时荧光定量PCR方法灵敏性、特异性好,为进一步临床应用提供了实验基础。
- 朱晨露陈艳红魏衍财秦伟马洁许化溪王胜军
- 关键词：白细胞介素-21实时荧光定量PCRGRAVES病
- 小鼠CCL20 mRNA实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：2
- 2012年
- 目的:建立检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20(CC chemokine ligand 20)mRNA的实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)的方法。方法:分离小鼠脂肪组织细胞,经PMA和离子霉素刺激4 h后收集细胞提取总RNA并逆转录为cDNA。采用qRT-PCR方法检测趋化因子CCL20 mRNA的表达水平。评价该方法的特异性,同时应用该方法检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20mRNA相对表达水平。结果:建立了小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的SYBR Green实时荧光定量PCR检测方法,结果显示该方法的熔解曲线为单峰,同时核酸电泳显示一条特异性条带。检测结果表明高脂饮食诱导的肥胖小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20的相对表达水平明显高于正常饮食对照组(t=3.02,P<0.05)。结论:建立了检测小鼠脂肪组织中趋化因子CCL20 mRNA的实时荧光定量PCR方法,特异性好、灵敏性强,为进一步研究小鼠CCL20的生物学功能提供了实验基础。
- 陈艳红朱晨露魏衍财秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸许化溪王胜军
- 关键词：SYBR实时荧光定量PCR
- 小鼠白介素17受体A胞外段的表达、纯化及鉴定
- 2012年
- 目的:分别克隆小鼠白介素17受体A胞外段(mIL-17RAaa32-322)及小鼠IgG2AFc(mIgG2AFc)基因,构建mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白原核表达载体,并在体外表达、纯化及鉴定。方法:利用基因重组技术构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,并在E.coli Rosetta中表达mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,经镍离子螯合层析分离纯化后,用SDS-PAGE电泳和蛋白质印迹法进行鉴定。结果:成功构建pET32a(+)-mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc原核表达载体,获得高效表达的融合蛋白,且蛋白质印迹证实为目的蛋白。结论:获得mIL-17RAaa32-322-mIgG2AFc融合蛋白,为进一步研究其生物学功能奠定基础。
- 魏衍财朱晨露陈艳红秦伟田洁袁靖陈娟吴晶晶汤新逸Samuel Essien Baidoo许化溪王胜军
- 关键词：原核表达纯化
