广州市属高校科研项目(10A204)
- 作品数：8 被引量：34H指数：4
- 相关作者：吴晓蔓朱锦宏林梅双胡勇杨静更多>>
- 相关机构：广州医学院第二附属医院广州医科大学更多>>
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- 乙肝病毒父婴垂直传播的初步探讨被引量：2
- 2015年
- 目的：从乙型肝炎病毒（HBV）分子机制探讨HBV的父婴垂直传播存在。方法：分析感染乙肝病毒的父亲静脉血（其妻子未感染乙肝病毒）和其新生儿脐带血中HBV DNA的基因型。结果：父亲与新生儿HBV DNA基因S序列与HBV DNA B基因型具有高度同源性。结论：感染HBV的父亲可以通过垂直传播的途径传播HBV DNA。
- 杨静吴晓蔓
- 关键词：HBV
- 5种标本浓缩法在HBsAg检测中的比较被引量：1
- 2014年
- 目的比较5种标本浓缩方法处理标本前后ELISA检测HBsAg的灵敏度。确定经济、适用的标本浓缩方法。方法采用聚丙烯酰胺凝胶吸附法、聚乙二醇透析法、高速离心沉淀法、磁珠浓缩法、冷冻干燥法分别浓缩HBsAg阳性血清标本,比较浓缩前后的S/CO值。结果浓缩后的S/CO值均高于浓缩前(P<0.01),磁珠浓缩法浓缩能力高于聚丙烯酰胺凝胶吸附法、聚乙二醇透析法和高速离心法(P<0.05)。结论标本浓缩法可以提高ELISA检测HBsAg的灵敏度,磁珠浓缩法具有明显的优势,很适合在临床上推广使用。
- 林梅双吴晓蔓
- 关键词：HBSAG灵敏度ELISA
- 外周血单个核细胞与HepG2.215细胞共培养体系的研究被引量：2
- 2011年
- 目的建立外周血单个核细胞与HepG2.215细胞共培养体系,探讨不同培养基及效靶比对共培养体系的影响。方法分离正常人外周血单个核细胞,加入植物血凝素(PHA),置于不同的培养基(DMEM、RPMI1640)中进行培养,采用不同效靶比(5∶1、10∶1、20∶1、40∶1)构建PBMCs与HepG2.215细胞共培养体系。用倒置显微镜观察细胞的形态及生长情况,台盼蓝拒染法检测PBMCs与HepG2.215细胞的细胞活力,cck-8法检测HepG2.215细胞的增殖活性。结果 DMEM培养基培养的HepG2.215细胞的细胞活力比RPMI1640培养基培养的细胞高;而两种培养基培养的PBMCs的细胞活力无明显变化。共培养条件下,PBMCs对HepG2.215细胞增殖活性的抑制作用随效靶比的不同而有所差别,效靶比为20∶1时抑制作用最强。结论在PBMCs与HepG2.215细胞共培养体系中,细胞培养基和效靶比对HepG2.215细胞的生长有影响。
- 胡勇吴晓蔓
- 关键词：外周血单个核细胞共培养
- 磁珠浓缩法在低浓度HBsAg检测中的应用被引量：6
- 2012年
- 目的:建立一种以磁珠为介质的标本浓缩方法(磁珠浓缩法),提高HBsAg的检测灵敏度和阳性检出率,用于低浓度HBsAg的测定。方法:BCA蛋白检测法检测磁珠吸附前后和洗脱液中HBsAg蛋白含量,判断吸附HBsAg的能力。磁珠浓缩法浓缩HBsAg阳性、HBsAg阴性、已标定HBsAg浓度的血清系列稀释品和低浓度HBsAg的血清标本,比较浓缩前后的S/CO值。结果:在一定的浓度范围内,磁珠吸附HBsAg随着HBsAg浓度的增高而增多,磁珠吸附HBsAg纯品后,10mmol/LNaOH洗脱HBsAg的洗脱率是(71.02±3.24)%。磁珠浓缩后,S/CO值高于浓缩前(P<0.01),不会增加检测HBsAg的非特异性(P>0.05),S/CO值与HBsAg浓度具有良好的线性(r=0.998),最低检测限是0.1IU/mL,对低浓度HBsAg的阳性检出率是80.8%,与浓缩前比较,差异具有统计学意义(χ2=18.513,P<0.01)。结论:磁珠浓缩法可明显提高ELISA检测HBsAg的灵敏度和阳性检出率,具有一定的研究意义。
- 林梅双吴晓蔓
- 关键词：HBSAG灵敏度磁珠
- 乙肝患者血清HBV cccDNA的临床意义被引量：11
- 2013年
- 目的:探讨血清HBVcccDNA与肝组织HBVcccDNA、血清HBVDNA的关系及临床意义。方法:采用荧光定量PCR(FQ-PCR),对69例乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌血清及15例肝组织的HBVcccDNA、HBVDNA进行检测,化学发光免疫分析定量检测血清HBsAg。结果:(1)肝组织HBVcccDNA阳性检出率为86.7%,高于血清HBVcccDNA阳性检出率(66.7%,P<0.05);(2)血清中HBVcccDNA与肝组织HBVcccDNA水平呈正相关(r=0.72,P<0.05);(3)血清HBVcccDNA拷贝数随HBVDNA水平升高而增大,且两者水平呈正相关(r=0.82,P<0.05);且HBVDNA高水平组(HBVDNA≥105copies/mL)的血清HBVcccDNA的阳性检出率(96.6%)高于低水平组(103copies/mL≤HBVDNA<1×105copies/mL)(67.5%)(P<0.05);(4)血清HBVcccDNA检出率随着病程进展而升高,在乙肝携带者、慢乙肝、乙肝肝硬化及肝癌中检出率分别为33.3%、83.3%、87.0%、87.5%,具有显著差异(P<0.05)。结论:血清HBVcccDNA可间接反映患者肝组织内HBVcccDNA情况,且与血清HBV复制指标HBVDNA显著相关;并与乙肝不同病程有关。
- 朱锦宏吴晓蔓
- 关键词：HBVCCCDNAHBV肝组织
- 乙型肝炎病毒大蛋白对于判定HBV复制情况的意义被引量：4
- 2011年
- 目的探讨乙型肝炎病毒大蛋白LHBs对判定乙型肝炎病毒(HBV)复制的临床意义。方法采用酶联免疫吸附法(ELISA)对221例HBV感染者血清LHBs及HBV血清标志物进行检测,采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)对HBV DNA进行平行检测。结果 (1)在221例HBV感染者中,LHBs、HBeAg与HBVDNA的总符合率分别为74.66%、53.40%;(2)LHBs阳性率随HBV DNA拷贝数的增加呈上升趋势,HBV DNA阳性率为77.38%,LHBs阳性率为83.71%,差异有统计学意义(2=14.92,P<0.05);(3)96份HBeAg阳性血清中,HBV DNA与LHBs的阳性率分别为85.40%、94.70%;在125份HBeAg阴性血清中,HBV DNA与LHBs的阳性率分别为71.20%、76.80%,两者阳性率差异无统计学意义(2=0.11,P>0.05;2=2.78,P>0.05)。结论血清LHBs能反映乙型肝炎患者体内HBV复制程度,其灵敏度高于HBeAg,是作为判定HBV复制情况的一个较好的血清学指标。
- 朱锦宏吴晓蔓
- 关键词：乙型肝炎HBVDNA乙型肝炎病毒大蛋白HBEAG
- HBV X基因变异的PCR-高分辨率熔解曲线检测及意义被引量：6
- 2013年
- 目的研究乙型肝炎病毒(HBV)X基因区变异情况及其临床意义。方法采用PCR-高分辨率熔解曲线(PCR-high resolution melting,PCR-HRM)分析技术检测168例乙肝患者血清HBV X基因区变异情况,直接测序技术确证变异位点;ELISA法和PCR法分别检测血清HBeAg水平和HBV DNA含量。结果 (1)168例乙肝患者血清HBV X区段突变检出率前5位的位点是nt1764(72.6%)、nt1719(68.5%)、nt1762(67.8%)、nt1727(54.2%)、nt1726(37.5%)及nt1730(37.5%);(2)HBeAg阴性组BCP双变异(nt1762A→T/1764G→A)联合CP聚集变异(nt1719 T→C/1726A→C/1727A→T/1730C→G)、nt1755A→C/nt1768T→A双变异的检出率均显著高于HBeAg阳性组(P<0.05);(3)HBV DNA高水平(HBV DNA≥1×105copies/mL)BCP双变异联合CP聚集变异、nt1755A→C/nt1768T→A双变异的检出率均高于HBV DNA低水平(1×103copies/mL≤HBV DNA<1×105copies/mL),差异有统计学意义(P<0.05);(4)BCP双变异联合CP聚集变异和nt1755A→C/nt1768A→G双变异检出率随着乙肝病程进展有升高的趋势,在乙肝肝癌中检出率最高(P<0.05)。结论 HBV X区段是HBV基因变异常发的区域;能导致HBeAg表达障碍,促进HBV变异株的病毒复制;同时,HBV X基因区变异与乙肝患者病程有关,临床上有望通过对乙肝患者进行HBV X基因区常见变异位点进行检测,为预测患者病程进展及预后提供参考。
- 吴晓蔓朱锦宏
- 关键词：HBVX基因高分辨率熔解曲线
- 羧基磁珠吸附乙型肝炎病毒表面抗原的性能研究被引量：2
- 2013年
- 目的研究羧基磁珠吸附乙型肝炎病毒表面抗原(HBsAg)的性能,为磁珠在蛋白质分离纯化中的应用打下基础。方法检测羧基磁珠吸附HBsAg前后的蛋白量,判断磁珠用量、HBsAg浓度、吸附温度、吸附时间对磁珠吸附HBsAg的影响。使用10mmol/L NaOH洗脱HBsAg,测定洗脱后HBsAg的洗脱率和生物活性保留率。结果羧基磁珠吸附HBsAg的性能与磁珠用量、HBsAg浓度、吸附温度和吸附时间有密切关系。磁珠吸附浓度为524.24μg/mL的血源性HBsAg纯品后,10mmol/L NaOH溶液洗脱HBsAg的洗脱率是71.02%,活性保留率为88.15%。结论带有羧基的磁珠可以吸附HBsAg,有望用于HBsAg的分离回收,为磁珠在蛋白质分离纯化中的应用打下基础。
- 林梅双吴晓蔓
- 关键词：磁珠乙型肝炎病毒表面抗原
