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黄芩甙对前列腺癌细胞生长影响的体外研究: 2004年; 目的探讨黄芩甙对前列腺癌细胞株 DU145生长的影响的作用机制。方法采用不同浓度的黄芩甙处理细胞后,用 MTT 比色分析法反映细胞生长增殖变化;流式细胞仪测定细胞周期分布。结果 50～500μmol/L 黄芩甙对前列腺癌细胞株 DU145有一定的抑制作用,并呈时间和剂量依赖关系;流式细胞仪检测细胞周期分布变化,DU145随药物浓度及作用时间,G_1期细胞比例逐渐增高,并出现典型的凋亡峰。结论黄芩甙能明显抑制前列腺癌细胞增殖,具有直接抗肿瘤作用。; 顾正勤孙颖浩许传亮刘毅; 关键词：黄芩甙前列腺癌细胞周期

前列腺干细胞抗原在前列腺组织的表达及意义被引量：5: 2003年; 目的演探讨前列腺干细胞抗原(prostatestemcellantigen,PSCA)在前列腺组织中的表达及其意义。眼方法演应用核酸分子原位杂交穴ISH雪技术,对PSCAmRNA在26例前列腺癌、20例良性前列腺增生(BPH)和9例正常前列腺(NP)标本中的表达水平进行检测及定位。眼结果演PSCAmRNA在NP、BPH及前列腺癌组织表达阳性率分别为66.7%、70.0%及84.6%,强阳性率分别为0、10.0%及57.7%。NP与BPH组织表达水平无显著差异(P>0.05),其表达定位于前列腺上皮的基底细胞层;PSCAmRNA在前列腺癌组织主要表达于癌细胞,细胞间质和肌肉组织均无表达。前列腺癌与NP、BPH组织表达水平均有显著差异(P<0.01)。PSCAmRNA表达水平与前列腺癌临床分期、病理分级均无相关性(P>0.05)。眼结论演PSCA高表达是前列腺癌的共同特征;PSCA在前列腺癌早期诊断与免疫靶向治疗方面有良好的开发应用前景。; 郎根强孙颖浩许传亮王元天邱镇顾正勤; 关键词：前列腺干细胞抗原前列腺组织前列腺癌良性前列腺增生

黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU145凋亡的体外研究被引量：47: 2005年; 目的 :探讨黄芩苷诱导前列腺癌细胞株DU14 5凋亡的作用机制。方法 :采用不同浓度的黄芩苷处理细胞后 ,用流式细胞仪检测前列腺癌细胞DU14 5的凋亡率及细胞周期分布 ;电镜下观察细胞超微结构 ;免疫组织化学染色检测凋亡相关蛋白的表达。结果 :5 0 ,12 5 μmol·L-1黄芩苷能诱导前列腺癌细胞DU14 5凋亡 ,凋亡率与剂量正相关 ;DU14 5随药物浓度及作用时间变化 ,细胞周期分布呈现G1期细胞比例逐渐增高 ,并出现典型的凋亡峰 ;电镜下可见特征性的凋亡小体 ;免疫组织化学染色提示bcl 2在药物处理的DU14 5中表达下调 ,Bax表达缺失 ,Fas表达上调。结论 :黄芩苷能诱导前列腺癌细胞凋亡 ,并明显抑制癌细胞增殖。; 顾正勤孙颖浩许传亮刘毅; 关键词：前列腺癌细胞黄芩苷细胞周期分布体外研究镜下观察

抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体的制备及鉴定被引量：2: 2006年; 目的制备并鉴定抗人前列腺干细胞抗原(PSCA)的单克隆抗体。方法以纯化的PSCA为抗原免疫Balb/c小鼠,经细胞融合、克隆化培养建立抗人PSCA的杂交瘤细胞株,采用免疫组化、Westernblot等方法鉴定其特异性。结果利用小鼠杂交瘤技术,建立了1株分泌抗PSCA抗体的杂交瘤细胞系D3,经鉴定抗体类别为IgG1,能特异性识别PSCA,与其他因子无交叉反应。PSCA在5例正常前列腺组织、10例良性前列腺增生组织、38例前列腺癌组织中有不同程度的阳性染色,95%(38/40例)的前列腺癌PSCA染色呈阳性、强阳性染色,50%~100%的肿瘤细胞着色,与良性前列腺增生及正常前列腺组织相比,其染色强度及范围的差异有统计学意义(P<0.01)。结论成功制备了组织特异性的抗人PSCA单克隆抗体,为前列腺癌的诊断和免疫治疗提供了新的手段。; 许传亮顾正勤高旭孙颖浩黄盛东龚德军; 关键词：前列腺干细胞抗原单克隆抗体前列腺肿瘤

人前列腺干细胞抗原的克隆及表达被引量：4: 2003年; 目的克隆人前列腺干细胞抗原(PSCA)编码基因,并在大肠杆菌中表达PSCA蛋白.方法从培养的人前列腺癌细胞株中提取总RNA,反转录成cDNA,通过聚合酶链反应(PCR)方法扩增PSCA编码基因,克隆至pMD18-T载体,经DNA测序证实后亚克隆至谷胱甘肽巯基转移酶(GST)融合表达载体pGEX-5X-1,重组质粒转化大肠杆菌,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达PSCA/GST融合蛋白.结果从培养的人前列腺癌细胞株中扩增出编码PSCA的cDNA(241 bp),序列测定证实与Genebank上登录的序列一致;成功构建了GST融合表达载体pGEX-5X-1/PSCA;表达了PSCA/GST融合蛋白(34.5×103).结论成功克隆了人PSCA基因,构建了GST融合表达载体并表达了PSCA/GST蛋白.; 顾正勤孙颖浩许传亮邱镇王元天沈茜; 关键词：基因克隆基因表达编码基因前列腺癌

腺病毒介导hIL-2基因转染膀胱上皮的体内研究被引量：1: 2005年; 目的:探讨腺病毒介导人IL-2基因转染鼠膀胱移行上皮细胞及其表达的可行性,为膀胱癌的免疫治疗提供实验依据。方法:通过膀胱灌注的方法将重组腺病毒AdhIL-2灌入大鼠膀胱内,分不同时间段获取大鼠膀胱黏膜组织,利用RT-PCR的方法检测hIL-2基因在膀胱移行上皮细胞中的表达。结果:腺病毒介导hIL-2在膀胱移行上皮细胞中得到有效表达,基因表达持续时间达到7天。结论:腺病毒是一种有效介导基因的工具,hIL-2在膀胱上皮细胞中的持续表达为膀胱癌免疫治疗提供新的方法。; 顾正勤许传亮高旭孙颖浩李云沈茜; 关键词：腺病毒 HIL-2 基因转染膀胱

抗人前列腺干细胞抗原单克隆抗体的前列腺癌免疫病理研究被引量：3: 2005年; 目的观察前列腺干细胞抗原(PSCA)在前列腺癌中的表达情况,探讨其与前列腺癌病理组织学分级及临床分期的关系。方法采用EnVisionTM两步免疫组织化学染色法,以抗人PSCA单克隆抗体检测正常前列腺、前列腺增生、前列腺癌及膀胱、肾脏等组织中PSCA的表达。结果PSCA在5例正常前列腺组织、10例前列腺增生组织、38例前列腺癌组织中有不同程度的阳性染色;膀胱、肾脏等正常组织的染色为阴性。95%(38/40例)的前列腺癌PSCA染色呈阳性、强阳性染色,50%～100%的肿瘤细胞着色,与前列腺增生及正常前列腺组织相比,其染色强度及范围的差异有显著性(P<0.01),但与前列腺癌的病理分级和临床分期不相关。结论前列腺干细胞抗原具有前列腺组织特异性,可用于前列腺癌免疫病理、放射免疫显像诊断及免疫治疗的研究。; 许传亮顾正勤孙颖浩黄盛东龚德军; 关键词：单克隆抗体免疫病理学

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国家自然科学基金(30271303)