国家科技支撑计划(2006BAK02A29)
- 作品数:3 被引量:58H指数:2
- 相关作者:花群义詹爱军王新卫陈枝楠卢体康更多>>
- 相关机构:深圳出入境检验检疫局河南农业大学华南农业大学更多>>
- 发文基金:国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 口蹄疫病毒RT-LAMP检测方法的建立被引量:55
- 2008年
- 为了建立检测口蹄疫的快速实用分子生物学技术,本研究借助新兴的环介导等温扩增技术,建立了一种灵敏、特异、快速的分子生物学检测方法-体外等温扩增检测方法。设计了6条针对FMDV3D基因的8个位点的特异性引物,建立了一套从核酸抽提到检测仅需要75min的快速检测技术。所建立的检测方法灵敏,与实时荧光RT-PCR灵敏度相当;且具有特异性,对其他水泡性疾病病原体检测均为阴性;而且简单,不需要复杂的仪器,常规水浴锅在63.5℃即可进行,肉眼可直接观察检测结果。该方法是适合基层和现场检测而无需送至中心实验室的快速灵敏实用的分子生物学检测方法。
- 秦智锋曾少灵阮周曦陈兵曹琛福花群义吕建强叶奕优范万红毕英佐
- 关键词:口蹄疫病毒环介导等温扩增技术
- 抗H5亚型AIV血凝素单克隆抗体的制备及亚型鉴定
- 2008年
- 制备抗H5亚型AIV血凝素单克隆抗体;依据淋巴细胞杂交瘤技术,用纯化的H5N1亚型AIV和重组噬菌体T4-H5HA免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用ELISA方法筛选特异性单克隆抗体;获得6株抗H5亚型AIVHA的特异性单克隆抗体H5-01(1E6)、H5-02(2C2)、H5-03(2A8)、H5-04(2G6)、H5-05(2E9)和H5-06(3F6)。各株单抗亚型测定的结果为:H5-01、H5-02为IgG1,H5-03、H5-04为IgG2a,H5-05、H5-06为IgG2b,轻链的亚型均为kappa链;经特异性和与同型病毒的反应谱检测,6株均是抗H5亚型AIVHA特异性单克隆抗体,为进一步分析H5N1亚型AIV的结构与功能以及建立监测该亚型AIV的试剂盒奠定了基础。
- 詹爱军王新卫陈枝楠卢体康花群义
- 关键词:单克隆抗体
- 抗H9N2 AIV HA单克隆抗体的制备及其在胶体金层析检测中的初步应用被引量:3
- 2008年
- 用基因疫苗pcDNA-H9和纯化H9N2亚型AIV免疫Balb/C小鼠,细胞融合后用HI和ELISA方法筛选出5株抗H9亚型AIV HA的特异性单克隆抗体H9-01(2E6),H9-02(3B1),H9-03(3H11),H9-04(1A4),H9-05(2G9)。各株单抗亚型测定的结果为H9-01,H9-02和H9-05均为IgG2b,H9-03为IgG1,H9-04为IgG2a,轻链的亚型均为kappa链。经特异性和与同型病毒的反应谱检测,它们均是HA特异性单克隆抗体。用制备的抗H9亚型AIV HA的单克隆抗体做成胶体金层析检测试纸条,可以检测到200个EID50的H9亚型AIV,为监测该亚型AIV试剂盒的进一步商品化奠定了基础。
- 詹爱军王新卫陈枝楠卢体康花群义
- 关键词:H9N2亚型AIV单克隆抗体