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教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-06-0865): 作品数：26 被引量：142H指数：7; 相关作者：孙超解芸菲刘春伟彭永佳姜东凤更多>>; 相关机构：西北农林科技大学徐州生物工程高等职业学校更多>>; 发文基金：教育部“新世纪优秀人才支持计划”国家自然科学基金国家科技支撑计划更多>>; 相关领域：农业科学生物学医药卫生环境科学与工程更多>>

小鼠SOCS3基因真核表达载体的构建及其对3T3-L1细胞凋亡的影响: 2011年; 【目的】探讨SOCS3对3T3-L1细胞凋亡的影响。【方法】以小鼠脂肪组织提取的RNA为模板,用RT-PCR扩增SOCS3基因,将其克隆至pMD18-T Simple,构建pMD18-T-SOCS3重组质粒,经测序验证后,以pMD18-T-SOCS3为模板扩增SOCS3基因,将其克隆至pEGFP-N1,构建真核重组质粒pEGFP-N1-SOCS3,测序正确后,将重组质粒pEGFP-N1-SOCS3转染3T3-L1细胞,荧光下观察GFP的表达,RT-PCR和Western blotting检测细胞内SOCS3mRNA和蛋白的表达,观察细胞凋亡的变化。【结果】测序表明,pMD18-T-SOCS3和pEGFP-N1-SOCS3的核苷酸序列正确率为100%;在荧光显微镜下发现,脂质体组和SOCS3组均有GFP的表达;RT-PCR和Westernblotting检测表明,3T3-L1细胞中SOCS3mRNA表达显著提高(P<0.05);Hoechst 33258染色发现,SOCS3组的细胞凋亡显著;Bax和c-myc基因的mRNA表达水平显著升高(P<0.05),bcl-2和mcl-1基因表达水平显著降低(P<0.05)。【结论】SOCS3对脂肪细胞凋亡的发生有促进作用。; 安磊孙婵解芸菲王勇吕彬孙超; 关键词：细胞凋亡 SOCS3 PEGFP-N1

生长激素与奥曲肽对肥胖小鼠SOCS转录表达的影响: 2009年; 【目的】探讨在肥胖状态下,生长激素和奥曲肽对信号转导抑制因子(SOCS)转录表达的影响,为进一步探索生长激素通路参与肥胖形成的可能机制提供理论和实验依据。【方法】利用高脂日粮诱导小鼠肥胖模型,用外源性生长激素和生长抑素类似物奥曲肽处理肥胖小鼠,记录体质量变化,观察皮下脂肪、附睾脂肪和肾周脂肪的沉积情况,检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL-C)和低密度脂蛋白(LDL-C)含量,同时利用RT-PCR法分析与生长激素密切相关的信号转导抑制因子1,2,3(SOCS1,SOCS2和SOCS3)mRNA的表达。【结果】外源性生长激素处理并不能减少肥胖小鼠脂肪沉积,反而增加了体脂含量(P<0.01),血清中TG、TC、HDL-C和LDL-C含量无显著变化,而SOCS1、SOCS2和SOCS3 mRNA水平显著增加(P<0.01);奥曲肽处理减少了体脂含量(P<0.01),血清中TG、TC和HDL-C含量显著减少(分别为P<0.05,P<0.05和P<0.01),SOCS1和SOCS3 mR-NA表达水平显著减少(P<0.01),但SOCS2却显著增加(P<0.01)。【结论】在肥胖状态下,生长激素并不能减少体脂沉积,但生长抑素类似物奥曲肽却能够减少体脂含量;SOCS1和SOCS3可能参与此作用机制,而SOCS2对于生长激素信号通路变化更敏感。; 彭永佳孙超堵斌谢亮解芸菲; 关键词：饮食诱导肥胖奥曲肽

Vc对Cd中毒小鼠骨骼肌中Musclin基因及生脂基因表达的影响被引量：2: 2010年; 为探讨维生素C(Vc)调控Cd中毒小鼠骨骼肌中Musclin基因及生脂基因的转录表达规律,用RT-PCR方法研究小鼠Musclin基因及生脂基因(FAS、PPARγ、TGH)表达水平的变化。结果表明,Cd对小鼠Musclin基因及生脂基因的表达具有显著抑制作用(P<0.05),Vc+Cd组与只加Cd组比较,小鼠Musclin基因及生脂基因的表达水平明显升高,Musclin与FASmRNA表达存在显著负相关(P<0.01),与PPARγ基因存在显著正相关(P<0.05),与TGH基因相关性不显著(P>0.05)。研究结果说明,Vc可提高Cd中毒小鼠骨骼肌中的Musclin基因及生脂基因的表达水平。; 康永刚孙超; 关键词：VC CD 小鼠骨骼肌

山楂黄酮对高脂血模型小鼠血脂及生脂基因转录表达的影响被引量：53: 2009年; 目的:检测山楂黄酮对高脂血模型小鼠血脂含量及脂肪、肌肉组织中生脂基因转录表达的影响,探讨其降脂作用的可能机制。方法:将48只小鼠随机分为4组,用高、低2种不同剂量山楂黄酮灌胃小鼠,分别于0,1,2和4h处死,检测各组小鼠血液中总胆固醇(TC)、总甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白固醇(HDL-C)含量。取脂肪、肌肉组织提取总RNA,real-time RT-PCR技术检测脂肪酸合成酶(FAS)、激素敏感酯酶(HSL)、甘油三酯水解酶(TGH)和固醇调控元件结合蛋白(SREBP-1c)基因等生脂基因mRNA时序表达规律,分析TG变化与脂肪组织中各生脂基因mRNA表达水平的相关性。结果:山楂黄酮可显著降低血清TC,TG,HDL-C水平,1 h达到最低点(P<0.01)。在脂肪组织中,山楂黄酮能上调FAS、HSL和TGH转录表达,达到显著水平(P<0.05),1 h后FAS、TGH转录表达量持续上升,而HSL转录表达则下降;SREBP-1c转录表达迅速下调,1 h达到显著水平(P<0.05),其后上升至显著高于处理前水平;脂肪组织FAS/HARMEAN(HSL,TGH)mRNA表达量比值显著下降,1 h达到最低点(P<0.01)。在肌肉组织中,山楂黄酮显著上调FAS,HSL的转录表达(P<0.05);SREBP-1c转录表达变化与脂肪组织相似,但其上升幅度更大。结论:山楂黄酮可降低高脂血模型小鼠血脂含量,它通过调控FAS,HSL,TGH和SREBP-1c基因的转录表达(尤其是HSL,SREBP-1c基因)共同调控动物脂代谢。; 谢伟华孙超刘淑敏; 关键词：小鼠血脂

IL-11对小鼠骨骼肌发育和能量代谢相关基因mRNA表达的影响: 2010年; 利用IL-11激活Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路,研究该通路对骨骼肌发育和能量代谢相关基因mRNA表达水平的影响。对雄性健康昆明小白鼠用IL-11连续皮下注射15 d,定期测量体质量和体温,小鼠处死后取腿肌提取总RNA,利用RT-PCR检测JAK2/STAT3信号通路关键因子JAK2和STAT3、骨骼肌发育相关基因成肌分化因子(MyoD)和生肌决定因子(Myf5)及能量代谢相关基因肝X受体(LXRα)和解偶联蛋白3(UCP3)mRNA表达。结果显示:处理组小鼠的体质量和腿部肌肉质量显著高于空白对照组(P<0.05);两组小鼠体温均维持在正常浮动范围内。与空白对照组相比,处理组小鼠JAK2和STAT3 mRNA表达量上升(P<0.05);骨骼肌发育相关基因MyoD和Myf5 mRNA表达量均上升(P<0.05);能量代谢相关基因LXRαmRNA表达量不变(P>0.05),UCP3 mRNA表达量上升(P<0.05)。表明IL-11激活JAK2/STAT3信号通路后可通过提高骨骼肌发育和能量代谢相关基因的mR-NA表达而调节骨骼肌发育和能量代谢。; 马佩云孙超张忠品张朝; 关键词：小鼠 IL-11 能量代谢

猪GPR40基因的生物信息学分析: 2010年; 克隆猪GPR40(G protein-coupled receptor)基因,并对其生物信息学进行分析。结果表明,克隆的该基因(GenBank登陆号为EU366318)与已发表的人、大鼠和小鼠GPR40基因核苷酸序列同源性分别为85%、80%和82%,氨基酸序列同源性依次为86%、82%和83%,其编码的蛋白质分子量为22.59 ku,等电点(pI)9.54,包含215个氨基酸残基,有许多内切酶位点;结构分析发现,该基因无信号肽,但包含一个7次跨膜结构,其蛋白产物多集中在细胞膜上。表明该蛋白结合在细胞膜上作为许多信号分子受体,参与体内脂类代谢等。; 解芸菲王力孙超; 关键词：GPR40 基因克隆生物信息学

猪SR-BⅠ基因的克隆及其组织差异表达规律研究: 2009年; 【目的】扩增猪各组织清道夫受体B族Ⅰ型(SR-BⅠ)基因片段,并对其进行生物信息学分析,研究SR-BⅠ在猪中的表达规律。【方法】采取不同月龄和不同猪种猪的内脏脂肪、皮下脂肪、肝脏、脾脏、肌肉、肾脏、肺脏、心脏等组织,提取其RNA,根据GenBank已发表的人、小鼠及大鼠SR-BⅠ基因序列,设计并合成1对引物,用RT-PCR法扩增猪SR-BⅠ基因cDNA片段,检测该基因在猪各组织中的分布及其在不同月龄、不同部位、不同猪种脂肪组织中的转录表达规律。【结果】成功克隆了猪SR-BⅠcDNA片段,长度为192 bp(EU366320);该基因与牛、人、中国仓鼠、大鼠、小鼠在氨基酸序列上分别有84.1%,78.6%,77.5%,67.0%和66.6%的同源性;SR-BⅠ基因mRNA在瘦肉型猪种上的表达量显著高于脂肪型猪种,随月龄的增加其表达量逐渐上升,且其在皮下脂肪的表达量较内脏脂肪高。【结论】SR-BⅠmRNA的表达与猪肥胖程度、年龄以及脂肪沉积部位密切相关。; 堵斌孙超; 关键词：脂肪组织

胰岛素和瘦素抵抗的重要调控因子:细胞因子信号转导抑制因子-3被引量：5: 2008年; 细胞因子信号转导抑制因子-3（Suppressor of Cytokine Signaling-3，SOCS-3）是细胞信号转导生理抑制剂家族重要成员之一，主要参与负调控生长激素、白介素（IL）、肿瘤坏死因子（TNF）等细胞因子信号转导。最近发现，SOCS-3在胰岛素和瘦素抵抗中具有重要调控功能，且与塘尿病关系密切，是未来塘尿病基因治疗的新靶点。该文综述了近年来SOCS-3结构及其对胰岛素和瘦素抵抗的调控机制研究进展，并探讨SOCS-3在塘尿病中的作用。; 孙超侯增淼姜东凤; 关键词：SOCS-3 胰岛素抵抗瘦素抵抗信号转导

钙信号对小鼠脂肪组织中GPR120基因转录及脂肪生成的影响: 2010年; 【目的】探讨钙信号对小鼠脂肪组织中GPR120基因转录及脂肪生成的影响。【方法】用外源性葡萄糖酸钙和二氢吡啶钙离子通道的阻滞剂Nifedipine处理小鼠30 d,记录小鼠体质量的变化,测定小鼠皮下脂肪、附睾脂肪和肾周脂肪的沉积量,检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的浓度,同时利用Real-ti me PCR法分析GPR120基因及与脂肪生成密切相关的转录因子PPARγ、C/EBPα和脂解基因HSL、生脂基因FASmRNA的表达情况,用SPSS软件分析小鼠附睾脂肪中GPR120与脂代谢相关基因表达的相关性。【结果】葡萄糖酸钙可延缓小鼠体质量的增加,减少体脂含量(P<0.01),并使小鼠血清中的TG、TC和LDL-C浓度极显著降低(P<0.01),HDL-C浓度显著升高(P<0.05),可导致GPR120、PPARγ、C/EBPα和FAS的mRNA表达水平降低,且分别达到极显著(P<0.01)或显著(P<0.05)水平,并可使HSLmRNA表达水平极显著升高(P<0.01);Nifedipine处理能使小鼠体质量增加(P<0.05),促进体脂沉积(P<0.01),并使小鼠血清中的TG和TC浓度显著升高(分别为P<0.05和P<0.01),GPR120、PPARγ、C/EBPα和FAS的mRNA表达水平极显著升高(P<0.01),但却使HSLmRNA的表达水平极显著降低(P<0.01)。相关性分析表明,GPR120 mRNA的表达水平与PPARγ、FAS和C/EBPα间呈显著正相关。【结论】钙信号在GPR120调节小鼠脂肪生成的过程中可能起到负调控作用。; 张忠品孙超马佩云张朝; 关键词：钙信号转录因子

猪脂肪组织和原代脂肪细胞中GPR43基因的转录表达规律: 2008年; 根据GenBank已发表的人、小鼠及大鼠GPR43(Gprotein-coupled receptor43)基因序列,设计并合成一对引物,RT-PCR扩增获得猪GPR43基因cDNA,并利用PCR技术检测该基因在不同猪种、不同发育阶段、不同部位脂肪组织及原代脂肪细胞中的转录表达规律。结果显示,成功克隆猪GPR43cDNA片段,长度为486bp(GenBank登陆号为EU122439);同源性分析发现,猪GPR43与人、小鼠和大鼠同源性达83%以上;GPR43 mRNA表达量在脂肪型猪种上显著高于瘦肉型猪种,随月龄增长表达量逐渐上升,且皮下脂肪表达量较内脏脂肪高;在猪前体脂肪细胞诱导分化过程中,GPR43 mRNA表达量呈时间依赖性升高。揭示GPR43 mRNA表达与猪肥胖程度、年龄、脂肪沉积部位以及脂肪细胞分化程度密切相关。; 侯增淼孙超; 关键词：RT-PCR 脂肪组织

教育部“新世纪优秀人才支持计划”(NCET-06-0865)

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