国家自然科学基金(30571355)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张永亮刘松财章倩倩张明军李敏更多>>
- 相关机构：华南农业大学吉林大学中山大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 慢病毒载体介导GHRH基因在小鼠肌肉组织表达及对动物生长的影响被引量：1
- 2011年
- 人与动物体内生长激素受生长激素释放激素(Growth Hormone Releasing Hormone,GHRH)与生长激素抑制激素(Somatostatin,SST)两种因子共同调节,在体内表达外源GHRH,可以提高体内GH基础水平,进而达到促进体内GH释放,加速动物生长的效果。对慢病毒载体系统加以改造,使之成为CMV与SP双启动子共同启动的基因转移载体,并将GHRH连接双启动子载体后,构建表达载体后与包装质粒共转染293T细胞,包装获得LV-SP-GHRH假病毒颗粒。收集病毒颗粒后注射小鼠肌肉组织,观察其对小鼠生长的影响,同时检测病毒结构基因对受感染细胞基因组整合状况,评估分析假病毒安全性。结果发现,注射病毒颗粒28d时小鼠日增重量与对照组相比,提高153.85%(P<0.01);而且受感染细胞基因组中无病毒结构基因整合,提示表达GHRH基因的慢病毒可以显著且安全地促进动物生长。
- 戴建威章倩倩刘松财张明军张永亮
- 关键词：生长激素生长激素释放激素双启动子慢病毒
- 生长抑素受体基因特异性shRNA慢病毒表达质粒的构建被引量：1
- 2008年
- 目的:设计并合成生长抑素受体SSTR5基因siRNA序列,并构建其短发夹shRNA慢病毒表达质粒。方法:以小鼠SSTR5基因为靶序列,用在线软件分析、设计并合成其有效siRNA,退火形成双链DNA后,与经BamHⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化慢病毒表达载体pSHR-Pμzro/GFP连接,产生pLV-shSSTR5重组慢病毒质粒,将重组质粒转化大肠杆菌DH 5α感受态细胞,PCR筛选阳性克隆,测序鉴定。结果:构建的重组表达质粒PCR产物为161bp,其中插入的SSTR5-siRNA片段为61bp,测序结果与参考序列完全一致。结论:成功构建了小鼠SSTR5基因特异性shRNA慢病毒表达质粒。
- 李敏郝林琳刘松财张永亮
- 关键词：SSTR5RNAI慢病毒表达载体
