国家自然科学基金(30370567)
- 作品数:4 被引量:48H指数:3
- 相关作者:王方正贾玉和张澍任晓庆浦介麟更多>>
- 相关机构:中国医学科学院阜外心血管医院军事医学科学院更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金中国博士后科学基金国家教育部博士点基金更多>>
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- 犬骨髓间叶干细胞的多向分化潜力被引量:4
- 2004年
- 目的观察犬骨髓间叶干细胞的体外多向分化潜力,为损伤组织的干细胞移植修复提供理论基础。方法利用梯度-贴壁筛选法分离、培养与扩增骨髓间叶干细胞。利用化学诱导剂5-氮胞苷(20滋mol/L),血管内皮细胞生长因子(VEGF10ng/ml),成骨细胞诱导剂(地塞米松10nMol/L,抗坏血酸0.05mMol,茁甘油磷酸钠10mMol/L)以及成脂肪细胞诱导剂(1-甲基3-异丁基黄嘌呤0.5mmol/L,地塞米松1滋mol/L,胰岛素10mg/L,消炎痛100mmol/L),分别定向诱导骨髓间叶干细胞分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞与脂肪细胞。再应用细胞形态观察、免疫细胞化学染色及电镜对分化细胞进行鉴定。结果利用梯度-贴壁筛选法可以分离培养与扩增骨髓间叶干细胞。5-氮胞苷可诱导干细胞呈现肌管、肌丝、心房颗粒,且肌细胞特异性蛋白琢-actinin,Myosin,琢-Actin,TroponinI免疫染色阳性;VEGF可诱导骨髓间叶干细胞出现管网状、血管样及鹅卵石样结构,vWF免疫染色阳性;成骨细胞诱导剂可诱导分化细胞碱性磷酸酶阳性;成脂肪细胞诱导剂使分化细胞内出现脂肪滴,油红O染色示脂滴为橙红色。结论成年犬骨髓间叶干细胞在体外具备多向分化潜力。在化学或生物诱导剂的作用下,犬骨髓间叶干细胞能够定向分化为心肌细胞、血管内皮细胞、成骨细胞、脂肪细胞等多种间叶组织?
- 任晓庆王方正浦介麟张澍张明伟贾玉和吴国玫
- 关键词:间叶干细胞骨髓心肌细胞成骨细胞脂肪细胞
- 自体骨髓间叶干细胞诱导分化移植重建窦房结起搏功能的实验研究被引量:24
- 2004年
- 目的 :探索应用骨髓干细胞治疗病态窦房结综合征的生物介入方法。 方法 :选取犬 6只 ,随机分为实验组和对照组 ,每组 3只。抽取犬自体骨髓 ,分离培养扩增骨髓间叶干细胞 ,并在体外应用 5 氮胞苷进行诱导分化。应用射频技术损伤犬窦房结 ,建立动物病态窦房结综合征模型。将溴脱氧尿嘧啶核苷 (BrdU)标记的且诱导分化的骨髓间叶干细胞自体移植到窦房结区 ,应用心电图、组织病理、免疫组化等技术观察干细胞移植治疗效果。 结果 :在动物病态窦房结综合征模型 ,自体移植骨髓干细胞后 ,心电图示窦房结功能明显改善 ;病理与免疫组化示移植的骨髓干细胞在窦房结区分化为拟窦房结细胞与血管内皮细胞 ,并与宿主细胞建立缝隙连接。 结论 :自体移植诱导分化的骨髓间叶干细胞可改善窦房结自律起搏功能。
- 任晓庆浦介麟张澍贾玉和赵欣然孟亮王方正
- 关键词:窦房结间叶干细胞诱导分化起搏自体移植自体骨髓
- 自体骨髓间叶干细胞诱导分化移植治疗房室阻滞的初步观察被引量:21
- 2005年
- 利用诱导分化的骨髓间叶干细胞自体移植治疗房室阻滞,探讨生物介入方法治疗缓慢型心律失常的新途径。11只实验犬随机分为实验组(n=6)和对照组(n=5)。应用射频技术消融His束,制备永久Ⅲ度房室阻滞动物模型;每只犬抽取10ml犬骨髓液,应用密度梯度离心法及贴壁培养法分离、培养和扩增骨髓间叶干细胞,5=氮胞苷对骨髓间叶干细胞进行诱导分化;房室阻滞4周后,开胸心脏直视下将BrdU标记的分化干细胞(1ml,1.5×10^7细胞)多点注射至该犬消融的His束部位,而对照组仅将1ml DMEM培养液替代干细胞悬液多点注射至相同部位。术后1—12周,应用心电图观察两组活体动物房室功能恢复情况,应用组织病理、免疫组化等技术对移植干细胞的存活、增殖、分化与缝隙连接功能进行评价。结果:在动物房室阻滞模型中,实验组犬在自体骨髓干细胞移植后12周,2/6只犬的房室传导功能得以改善;病理与免疫组化示诱导分化的骨髓干细胞在His束区存活、增殖和分化为心肌细胞、血管内皮细胞,并与宿主细胞建立缝隙连接;而对照组5只犬未见上述变化。结论:自体移植诱导分化的骨髓间叶干细胞有可能改善His束传导功能。
- 任晓庆浦介麟张澍贾玉和吴国玫孟亮王方正
- 关键词:间叶干细胞希氏束诱导分化5-氮胞苷
- 干细胞移植与转基因治疗建立生物起搏器的实验研究进展被引量:2
- 2006年
- 任晓庆浦介麟王方正
- 关键词:转基因治疗干细胞移植起搏器缓慢心律失常心脏疾患