国家自然科学基金(30370527) 作品数:15 被引量:36 H指数:3 相关作者: 杨艳 曾晓荣 刘智飞 周文 蔡芳 更多>> 相关机构: 泸州医学院 四川中医药高等专科学校 郑州大学第一附属医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 四川省教育厅自然科学科研项目 更多>> 相关领域: 医药卫生 生物学 自然科学总论 更多>>
细胞内钙动员对猪冠状动脉平滑肌细胞自发性瞬时外向电流的调节 2007年 为研究急性酶分离的猪冠状动脉平滑肌细胞自发性瞬时外向电流(spontaneous transient outward currents,STOCs)的基本特性及其调节,采用全细胞穿孔膜片钳技术记录STOCs的变化.结果发现,STOCs具有明显的电压依赖性,随机地叠加在全细胞大电导钙激活钾通道(large Ca2+-activated-K+channels,BKCa)电流上,BKCa通道的特异性阻断剂卡律蝎毒素(charybdotoxin,ChTX)200nmol/L可完全抑制STOCs的活性.逐步降低细胞外Ca2+浓度可明显抑制STOCs活性直至完全消失,而钙离子载体A23187(10μmol/L)可明显增强STOCs的活性.L型电压依赖性钙通道(L-type voltage-dependent calcium channels,L-VDCCs)阻断剂维拉帕米(20μmol/L)和氯化镉(200μmol/L)对STOCs的活性却没有明显影响.兰诺定受体(ryanodine receptors,RyRs)的特异性激动剂咖啡因(5mmol/L)能够明显激活STOCs,而其阻断剂兰诺定(ryanodine,50μmol/L)却可以使其不可逆性完全抑制;随后再应用咖啡因(5mmol/L)不能再次激活STOCs.三磷酸肌醇受体(inositol1,4,5-trisphosphate receptors,IP3Rs)阻断剂2APB(40μmol/L)也可明显抑制STOCs的活性,继而使用咖啡因(5mmol/L)仍可激活STOCs.结果表明:猪冠状动脉平滑肌细胞的STOCs是由BKCa通道介导的,细胞外Ca2+对于STOCs的产生是必需的,而L-VDCCs介导的Ca2+内流不影响STOCs的活性,RyRs是STOCs产生的最终通路,IP3Rs也可能参与了STOCs的调控. 李鹏云 曾晓荣 杨艳 蔡芳 刘智飞 李妙龄 裴杰 周文关键词:IP3 冠状动脉 平滑肌细胞 穿孔膜片钳记录猪冠状动脉平滑肌细胞K^+电流技术初探 被引量:8 2005年 常规全细胞膜片钳模式形成的同时,细胞内液与电极液交换造成细胞内物质丢失,此现象对小细胞的影响更为明显。穿孔膜片钳技术使电极与细胞胞质之间保持电学连续性,它使细胞内环境保持稳定,利于研究胞内信息传导机制,并可改善常规全细胞膜片钳时破膜所造成的封接稳定性的破坏,有望提高实验的成功率。本研究报道应用此技术在猪冠状动脉平滑肌细胞上记录的全细胞K+电流和由大电导钙激活钾通道BKCa所介导的自发瞬时外向电流ISTOCs。 蔡芳 曾晓荣 杨艳 刘智飞 李妙龄 周文 裴杰关键词:动脉平滑肌细胞 冠状 穿孔 信息传导机制 细胞内环境 细胞内液 BKCA RyR与PKC在UTP对猪冠状动脉平滑肌上STOCs调控中的作用 被引量:4 2010年 目的探讨三磷酸尿苷(UTP)对STOCs作用的胞内信号转导机制及RyR、PKC对其过程的干预作用。方法应用全细胞穿孔膜片钳记录技术,观察三磷酸尿苷(UTP)对猪冠状动脉平滑肌细胞膜上大电导钙激活钾通道(BKCa)介导的自发性瞬时外向钾电流(STOCs)的作用,及兰诺定受体(RyR)和蛋白激酶C(PKC)的特异性阻断剂ryanodine、BisI预处理细胞后UTP对猪冠状动脉平滑肌细胞STOCs的作用。结果①50μmol/L的UTP可使STOCs的幅度与频率明显增加(23.53±2.55)pA,(0.2167±0.0217)Hzvs(40.76±5.75)pA,(0.3695±0.0358)Hz,n=7,P<0.01。②50μmol/L ryanodine处理细胞后,50μmol/L UTP不能再激活STOCs。③5μmol/L的U-73122处理细胞后,50μmol/L UTP也不能激活STOCs(22.76±6.43)pA,(0.2227±0.0977)Hzvs(23.28±8.43)pA,(0.1953±0.061)Hz;n=7,P>0.05。④1μmol/L的BisI处理细胞后,50μmol/L UTP仍可激活STOCs(46.32±6.17)pA,(0.407±0.061)Hzvs(65.53±8.34)pA,(0.6937±0.0597)Hz;n=10,P1<0.05,P2<0.01,且BisI存在时UTP对STOCs的激活作用明显大于UTP单独存在时的激活作用(n=10/7,P1<0.05,P2<0.01)。结论 PLC、RyR和PKC均参与了UTP激活猪冠状动脉平滑肌上STOCs的过程。 潘雪 李向楠 王鹏 曾晓荣 杨艳 蔡芳关键词:蛋白激酶C 猪冠状动脉平滑肌细胞 在inside-out膜片上caffeine对猪冠状动脉平滑肌细胞钙激活钾通道的调节作用及ryanodine的影响 被引量:3 2010年 目的:利用膜片钳技术,研究咖啡因对钙激活钾通道(calcium-activated potassium channel,KCa)的作用机制,及咖啡因存在时兰尼定(ryanodine)对KCa的影响以阐明冠状动脉平滑肌的调控机制。方法:采用急性酶分离方法,应用膜片钳单通道电流记录技术记录猪冠状动脉平滑肌钿胞上KCa电流活动。电流信号经放大、滤波及A/D、D/A转换后输入微机进行采样和储存。应用PCLAMP9.0软件系统进行数据采集及分析。结果:在内面向外式(inside-out)膜片下,咖啡因(0.1、0.5、1.0、5.0mmol/L)可浓度依赖性地增加通道开放概率,而对电流幅值无明显影响,开放概率增加是通过明显缩短平均关闭时间实现的(n=8,P<0.01);洗去药物后通道活性可以恢复到对照水平;5.0mmol/L咖啡因对KCa激活作用最大(P<0.01)。在细胞贴附式(cell-attached)膜片上,咖啡因激活KCa后,ryanodine(10-40μmol/L)浓度依赖性地抑制通道开放概率,开放时间缩短,关闭时间延长,对电流幅度无明显影响。结论:在inside-out膜片下,咖啡因能够直接激活猪冠状动脉平滑肌细胞KCa通道。在cell-atta-ched构型上,ryanodine可通过胞内一定的信号通路浓度依赖性间接抑制咖啡因对KCa激活。 仲维高 杨艳 曾晓荣 崔跃 孔天翰关键词:钾通道 钙激活 猪冠状动脉平滑肌细胞 Sodium tanshinoneⅡ-A sulfonate modulates the kinetics and Ca2+ dependence of BKca in mouse cerebral arterial smooth muscle cells Aim:The large conductance Ca-sensitive K channels(BK) play a key role in buffering the vascular tone.Sodium ta... Xiao-Qiu TAN,Yan YANG,Jun CHENG,Peng-Yun LI,Xiao-Rong ZENG~* Department of Electrophysiology,Institute of Cardiovasology,Luzhou Medical College,Luzhou 646000,China文献传递 血清药理学与膜片钳技术对川芎扩冠离子机制的探讨 被引量:2 2008年 目的通过观察分析川芎灌胃动物后分离的含药血清(含川芎血清)对猪冠状动脉血管条及平滑肌细胞BKCa的作用,旨在从细胞分子水平阐述其扩冠机制,也为探索建立血清药理学与膜片钳技术结合于中药研究的联合技术奠定基础。方法用膜片钳实验及冠状动脉血管条实验观察含川芎血清、川芎主要活性成分川芎嗪(阳性对照)和空白血清(阴性对照)对BKCa的作用以及对离体猪冠状动脉血管条的影响。结果在内面向外式和贴附式膜片上,含川芎血清和空白血清对BKCa通道无激活作用,但在内面向外式膜片上,阳性对照川芎嗪对BKCa通道具有激活作用,且川芎嗪具有对抗高钾(45mM)去极化所致的冠脉血管条收缩的作用,含川芎血清和空白血清无此作用。结论川芎嗪对BKCa通道具有直接激活作用,含川芎血清在体外实验中对BKCa通道无明显激活作用。 杨艳 杨艳艳 李妙龄 程俊 刘智飞 周文 裴杰 曾晓荣关键词:川芎 血清药理学 膜片钳技术 大电导钙激活钾通道 The novel activation of large conductance Ca2+-activated K+ channels by IP3 in porcine coronary artery smooth muscle cells Aim:The roles of IP have been observed in various cells,but many questions are largely unknown. There is a lac... Yan YANG,Peng-Yun LI,Jun CHENG,Fang CAI,Ming LEI,Xiao-Qiu TAN,Zhi-Fei LIU,Xiao-Rong ZENG~* Department of Electrophysiology,Institute of Cardiovasology,Luzhou Medical College,Luzhou 646000,China文献传递 平滑肌细胞双信使系统与钙火花相关性研究 被引量:1 2007年 在平滑肌细胞的肌醇脂质代谢中产生的肌醇三磷酸(IP3)和二酰甘油(DAG)是胞内重要的第二信使,由它们激动的IP3/Ca2+和DAG/蛋白激酶C(PKC)途径,即是调控胞内许多生理过程的重要信号途径。因此又把这一以肌醇磷脂代谢为基础的细胞信号系统称为“双信使系统”。大量研究表明,双信使系统与平滑肌细胞胞内Ca2+浓度的调节、胞内局部Ca2+释放事件、钙火花的产生和调控紧密相关。本文就此方面的研究进展进行综述。 张维维 曾晓荣 杨艳关键词:平滑肌细胞 钙火花 Ryanodine受体活性的蛋白质调控研究新进展 2005年 仲维高 杨艳 曾晓荣关键词:RYANODINE受体 受体活性 蛋白质 神经肌肉兴奋性 胞内钙离子 小鼠脑动脉平滑肌细胞钙激活钾通道基本特性和动力学调控研究 目的大电导钙激活钾通道(BK)是血管平滑肌细胞的重要离子通道,携带了70%~80%的外向电流,在调控血管平滑肌张力中起重要作用。而反映BK通道与胞内钙事情耦连关系的自发性瞬时外向电流(spontaneous transi... 谭晓秋 刘雪茹 杨艳 程俊 李鹏云 曾晓荣关键词:脑动脉 平滑肌细胞 钾通道 电生理学特性 小鼠 文献传递