国家自然科学基金(C30100241)
- 作品数:12 被引量:56H指数:5
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- 昆明山海棠总生物碱对肺腺癌A549细胞株增殖抑制作用的实验研究被引量:8
- 2005年
- 目的观察昆明山海棠总生物碱(alkaloidsfromtripterygiumhypoglaucumhutch,THHa)对人肺腺癌细胞系A549体外生长的影响。方法采用MTT比色法检测THHa对A549细胞生长的抑制作用,测定其吸光度D(490)值;用倒置和荧光显微镜观察药物作用后A549细胞形态的变化;流式细胞仪检测细胞凋亡率。结果随着THHa浓度的增加和作用时间的延长,A549细胞增殖受到抑制,抑制率逐渐升高,具有浓度和时间依赖性。流式细胞仪结果显示,随着处理浓度和作用时间的增加,细胞的凋亡率逐渐升高。结论THHa能明显抑制A549细胞增殖,并可诱导A549细胞凋亡。
- 刘乐斌杨录军刘胜学刘晋祎敖琳黄晓春曹佳
- 关键词:昆明山海棠肺腺癌A549细胞增殖凋亡
- 昆明山海棠碱诱导白血病细胞株凋亡的分子机制被引量:4
- 2003年
- 曹佳
- 关键词:细胞凋亡
- 昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻及瘤细胞超微结构改变的研究被引量:4
- 2003年
- 目的 检测昆明山海棠碱 (THH碱 )诱导JurkatT淋巴瘤细胞的凋亡效应。方法 THH碱多剂量多时间点诱导JurkatT淋巴瘤细胞细胞后 ,采用Annexin V Fluorescence标记膜外翻磷脂酰丝氨酸 (Phosphatidylserine ,PS)的凋亡细胞 ,同时荧光素PI标记坏死细胞 ,流式细胞术检测分别检测其阳性细胞率。同时采用判断凋亡发生的“金标准”———形态学观察方法观察其超微结构的改变。结果 THH碱诱导后磷脂酰丝氨酸外翻的细胞显著增加 ,有明显的时间和剂量相关性 ,超微结构观察可见大量细胞明显发生细胞体积缩小、核固缩、胞浆浓缩、凋亡小体形成等凋亡典型的形态特征。
- 杨录军敖琳Nuesse Michael郭乔楠徐颖曹佳
- 关键词:昆明山海棠细胞凋亡显微镜磷脂酰丝氨酸
- 昆明山海棠碱对Jurkat淋巴瘤细胞株的细胞周期和凋亡时相的影响被引量:7
- 2003年
- 目的 探讨昆明山海棠 (THH)碱对JurkatT淋巴瘤细胞的细胞毒性、细胞周期和凋亡时相特异性的影响 ,以了解THH碱诱导细胞凋亡的机制。方法 台盼蓝染色法检测细胞生长和细胞活力 ;DNA染色法、TUNEL标记结合流式细胞术检测细胞周期和凋亡时相特异性。结果 THH碱能有效抑制Jurkat细胞增殖、细胞活力下降 ,细胞在增殖周期中被阻滞于G1 期。THH碱首先能诱导S、G2 M期细胞凋亡 ,同时能诱导G1 期细胞凋亡。结论 提示THH碱能抑制Jurkat细胞的DNA合成 ,抑制细胞增增殖 ,并可显著诱导各期相细胞发生凋亡。
- 杨录军敖琳Nuesse Michael徐颖曹佳
- 关键词:昆明山海棠G1期阻滞TUNEL
- 昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞株的PARP酶剪切和caspase-3激活被引量:3
- 2003年
- 目的 探讨昆明山海棠碱诱导淋巴瘤细胞凋亡过程中caspase 3和PARP酶的作用 ,以了解THH碱诱导细胞凋亡的机制。方法 THH碱诱导JurkatT淋巴瘤细胞后 ,FAM DEVD FMK荧光标记活化的caspase 3 ,免疫细胞化学方法荧光标记PARP酶剪切后的 89× 10 3片段 ,均以流式细胞术检测。结果 THH碱能有效诱导caspase 3激活和PARP酶剪切。结论 提示在THH碱能诱导JurkatT淋巴瘤细胞凋亡过程中caspase 3和PARP酶参与调控 ,它们可能抑制了受损伤DNA的修复 。
- 杨录军敖琳Nuesse Michael曹佳
- 关键词:昆明山海棠PARPDNA修复
- 昆明山海棠碱通过线粒体途径诱导Jurkat淋巴瘤细胞株细胞凋亡被引量:4
- 2003年
- 目的 研究昆明山海棠碱通过线粒体途径诱导细胞凋亡的作用。方法 THH碱多剂量多时间点诱导Jurkat细胞后 ,采用Westernblotting检测细胞内Bcl 2表达的含量、采用JC 1原位染色方法、细胞免疫化学和流式细胞术等手段在单细胞水平分析细胞线粒体膜Apo2 .7分子以及线粒体膜电位 (ΔΨm)的变化。结果 THH碱诱导后Bcl 2蛋白表达下调 ,线粒体膜电位明显下降 ,线粒体膜Apo2 .7蛋白分子表达显著增加。结论 THH碱可通过线粒体途径诱导JurkatT淋巴瘤细胞株发生凋亡 ,并且Bcl
- 杨录军Nuesse Michael余厚勇敖琳曹佳
- 关键词:昆明山海棠细胞凋亡APO2.7
- 昆明山海棠碱诱导Jurkat淋巴瘤细胞核DNA链断裂和DNA片段化被引量:7
- 2003年
- 目的 探讨昆明山海棠碱对淋巴瘤细胞核DNA的影响 ,以了解THH碱诱导细胞凋亡的机制。方法 THH碱诱导Jurkat细胞后 ,TUNEL荧光标记DNA链断裂 ,细胞DNA含量分析方法分析DNA片段化 ,均以流式细胞术检测。结果 THH碱能诱导Jurkat淋巴瘤细胞DNA链断裂 ,之后DNA发生片段化。结论 提示在THH碱诱导Jurkat凋亡过程中 。
- 杨录军Nuesse Michael敖琳曹佳
- 关键词:昆明山海棠DNA断裂
- THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat淋巴瘤细胞株凋亡被引量:2
- 2003年
- 目的 探讨昆明山海棠碱在凋亡中对细胞内游离钙离子浓度的影响。方法 THH碱诱导Jurkat细胞后 ,采用Indo 1AM及PI进行细胞染色、流式细胞术等手段在单细胞水平上检测细胞内钙离子浓度的变化。结果 THH碱诱导后细胞内钙离子浓度未见明显变化。结论 THH碱不通过钙离子信号通道诱导Jurkat细胞凋亡。
- 杨录军Grundler WernerNuesse Michael敖琳曹佳
- 关键词:钙离子流式细胞术
- 细胞凋亡的基因调控及检测方法的研究进展被引量:6
- 2005年
- 细胞凋亡研究对现代医学产生了巨大推动作用,并已成为当前生命科学和医学领域的研究热点,因而熟悉细胞凋亡的调控机制和合理选择检测方法显得尤为重要。本文就近年来GraB、eIF4E、ced-13、Survivin等细胞凋亡调控基因和凋亡的检测技术加以综述。
- 刘乐斌曹佳
- 关键词:脱噬作用基因表达调控
- 昆明山海棠碱通过Fas受体介导途径诱导Jurkat淋巴瘤细胞株凋亡被引量:4
- 2003年
- 目的 探讨Fas、caspase 8在昆明山海棠碱 (THH碱 )对Jurkat淋巴瘤细胞的凋亡诱导中的变化 ,以进一步研究THH碱诱导凋亡的分子机制。方法 采用Annexin V标记和流式细胞术检测细胞的凋亡发生率 ,采用westernblotting分析FasL、caspase 7、caspase 8、Bid等蛋白表达的变化。结果 THH碱能有效诱导Jurkat细胞凋亡 ;在其凋亡过程中 ,FasL逐渐表达增强、caspase 7、caspase 8、Bid剪切激活 ,并呈时间依赖性。结论 THH碱通过Fas受体 配体介导激活caspase 8,caspase 8再激活caspase 7和Bid等网络途径诱导Jurkat细胞凋亡。
- 赵钦军杨录军刘晋杨学森曹佳肖卫
- 关键词:昆明山海棠CASPASE-7BID