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胰岛素对胰岛β细胞自分泌信号传导通路作用的研究进展被引量：2: 2014年; 胰岛主要包括α、β、δ、PP四种内分泌细胞，胰岛β细胞约占胰岛内分泌细胞的80％。胰岛β细胞分泌的胰岛素除了能调节机体糖代谢、控制血糖平衡外，也能直接作用于胰岛β细胞，产生自身分泌调节效应［1］。现将目前胰岛素对β细胞自分泌作用的研究进展综述如下。; 张君刘红; 关键词：胰岛素胰岛自分泌

短期胰岛素刺激对HIT-T15细胞胰岛素原基因表达的影响: 2014年; 目的探讨短期外源性胰岛素刺激对HIT-T15胰岛β细胞胰岛素原(PI)基因表达的影响及机制。方法HIT-T15仓鼠胰岛瘤细胞随机分为4组:含1.4 mmol/L葡萄糖完全培养基组作为空白对照(LG组),为抑制内源性胰岛素释放干扰以低糖联合硝苯地平作为条件对照(LGC组),在LGC基础上分别加0.5 U/L或5 U/L的外源性胰岛素作为实验组(分别为LINS组和HINS组),分别在刺激后0、30、60、90、120 min以荧光定量PCR检测各组PI mRNA,免疫组化检测各组细胞胰岛素受体底物1(IRS1)酪氨酸磷酸化水平。结果 (1)LINS组、HINS组细胞PI mRNA表达均上调,在刺激后60 min PI mRNA表达量达高峰。(2)实验组在刺激后30 min IRS1酪氨酸磷酸化水平较对照组明显增高,高、低浓度胰岛素组细胞酪氨酸磷酸化达高峰时间不同。(3)LG组和LGC组间PI mRNA表达及IRS1酪氨酸磷酸化水平无明显差异。结论短期外源性胰岛素能上调胰岛β细胞PI基因的表达,且高浓度的胰岛素较低浓度胰岛素作用强。PI表达调控与IRS1信号传导有关。; 张君荣曦吴宇娟刘红; 关键词：胰岛素原胰岛素分泌细胞胰岛素受体底物1 酪氨酸磷酸化

胰高血糖素样肽-1对不同浓度葡萄糖刺激下NIT-1细胞胰岛素原合成的短期影响被引量：1: 2013年; 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)在高、低浓度葡萄糖作用下对胰岛β细胞胰岛素原合成的短期影响及随时间的变化趋势。方法:将NIT-1细胞随机分为以下4组:LG组(培养液中含5.6 mmol/L的葡萄糖)、LGG组(培养液中含5.6 mmol/L的葡萄糖和20 nmol/L的GLP-1)、HG组(培养液中含16.7 mmol/L的葡萄糖)、HGG组(培养液中含16.7 mmol/L的葡萄糖和20 nmol/L的GLP-1)。检测基线0 h及葡萄糖和(或)GLP-1刺激后2、4、6、8、10 h各组胰岛β细胞胰岛素原mRNA和蛋白表达。结果:基线时各组胰岛素原表达无统计学差异(P>0.05),刺激2、4、6、8、10 h后HG组、HGG组胰岛素原表达均显著增高(P<0.05),而LG和LGG组无明显变化(P>0.05)。组间比较HGG组胰岛素原表达量显著高于LG组、LGG组及HG组(均P<0.05)。HG组胰岛素原表达量显著高于LG组、LGG组(均P<0.05)。胰岛素原mRNA的相对表达量在刺激后4 h达到高峰,而胰岛素原蛋白的表达量在2 h达到高峰。结论:在高糖条件下,GLP-1短期刺激胰岛β细胞可显著增加胰岛素原合成,GLP-1联合高糖对胰岛素原合成具有协同作用。胰岛β细胞在受到高糖或高糖+GLP-1刺激后胰岛素原蛋白表达的高峰要先于胰岛素原mRNA表达的高峰。; 钟慕贤刘红荣曦岳惠芬; 关键词：胰高血糖素样肽1 高糖胰岛Β细胞

波动性高糖对INS-1细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响被引量：2: 2012年; 目的探讨波动性高糖对INS-1细胞凋亡及凋亡相关基因表达的影响及其分子机制。方法将INS-1细胞随机分为三组。正常对照组(NG):含5.5 mmol/L葡萄糖;持续高糖组(SHG):含33.3 mmol/L葡萄糖;波动性高糖组(IHG):含5.5 mmol/L或33.3 mmol/L葡萄糖,每24 h交替换液1次,均培养3 d。3 d后检测各组INS-1细胞活性及凋亡百分率,胰岛素分泌量,Bcl-2相关X蛋白(Bax)、细胞色素C(CytC)和天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)蛋白表达水平以及胰岛素(insulin)和胰岛十二指肠同源盒-1(PDX-1)mRNA表达水平。结果与NG组相比,SHG组与IHG组凋亡率均明显升高,细胞活性明显降低,Bax、CytC及Caspase-3表达明显增强,胰岛素分泌量及insulin、PDX-1 mRNA表达水平均明显降低(P均<0.01);与SHG组相比,IHG组细胞活性及胰岛素分泌量明显降低,凋亡率及Caspase-3明显增加(P均<0.01),Bax、CytC表达水平与insulin及PDX-1 mRNA表达水平均未见统计学差异。结论波动性高糖能导致胰岛细胞凋亡增加和功能障碍,其机制可能与上调Bax、CytC、Caspase-3及降低insulin与PDX-1基因表达等相关。; 邓珊珊刘红荣曦岳惠芬张君吴宇娟; 关键词：波动性高糖细胞凋亡基因表达

胰高血糖素样肽-1对葡萄糖刺激下胰岛β细胞胰岛素原合成的短期作用: 2013年; 目的:探讨胰高血糖素样肽-1(GLP-1)在高浓度、低浓度葡萄糖作用下对胰岛β细胞胰岛素原合成的短期影响。方法:将NIT-1细胞随机分为低浓度葡萄糖(LG)组、低浓度葡萄糖+GLP-1(LGG)组、高浓度葡萄糖(HG)组和高浓度葡萄糖+GLP-1(HGG)组4组。检测基线0h及葡萄糖和(或)GLP-1刺激后4h各组细胞胰岛素原基因和蛋白表达。结果:基线时各组胰岛素原表达无显著差异(P>0.05),4h后HG组、HGG组胰岛素原表达均明显增高(P<0.05),而LG和LGG组无明显变化(P>0.05)。组间比较,HGG组胰岛素原表达量明显高于LG组、LGG组及HG组(均P<0.05)。HG组胰岛素原表达量显著高于LG组、LGG组(均P<0.05)。结论:在高浓度葡萄糖条件下,短期GLP-1刺激可显著增加胰岛β细胞胰岛素原合成;GLP-1联合高糖对胰岛素原合成具有协同作用。; 钟慕贤刘红荣曦岳惠芬吴宇娟; 关键词：胰高血糖素样肽-1 高糖胰岛Β细胞

原代大鼠胰岛细胞分离纯化及单细胞培养初探: 2016年; 目的:探讨获得高质量、数量多的原代大鼠胰岛细胞的有效可靠的方法。方法:以Ⅴ型胶原酶顺行灌注大鼠胆总管消化胰腺,以Histopaque 1077等密度区带离心法分离胰岛和胰腺腺泡组织。以双硫腙染色及免疫组化法分别鉴定提取物,胰岛素释放试验鉴定胰岛的活性。结果:经Histopaque 1077等密度区带离心法分离纯化,每只大鼠平均获取(251±26)枚胰岛。双硫腙染色后完整胰岛呈猩红色细胞团。胰岛单细胞培养及胰岛素释放试验起始2.8 mmol/L低糖培养胰岛素分泌量为(23.53±5.946)pmol/L,16.7mmol/L高糖刺激后胰岛素分泌量为(32.61±4.085)pmol/L,最后恢复2.8mmol/L低糖培养胰岛素分泌量为(27.81±3.616)pmol/L,3者之间比较差异均有统计学意义(P<0.05),提示胰岛细胞活性良好。结论:用Histopaque 1077等密度区带离心法分离纯化原代大鼠胰岛细胞兼具有数量多、活性好、纯度高的优点,可继续用于研究。; 罗瑞琼韦芳荣曦刘红; 关键词：分离纯化胰岛细胞

激光拉曼光谱系统无损鉴别大鼠原代胰岛α、β细胞被引量：1: 2016年; 目的:利用激光拉曼光谱系统无损区分贴壁生长的大鼠原代胰岛α、β细胞,并比较该方法与传统方法的优劣。方法:收集贴壁生长于定位格子培养皿中大鼠胰岛细胞的拉曼光谱、坐标及照片后应用免疫组化结合培养皿坐标定位确定胰岛细胞的分类,用主成分分析结合线性判别分析(PCA-LDA)对两种胰岛细胞拉曼光谱进行分析,用线性判别分析法对两种细胞大小进行分析,两组间光谱及面积差异则采用两独立样本t检验。结果:贴壁生长的胰岛β细胞体积较α细胞大,差异具有统计学意义(P=0.001);然而单纯利用面积胰岛α细胞及胰岛β细胞正确区分率分别为84.5%、50.0%;胰岛α细胞与胰岛β细胞的拉曼光谱有共同特征峰同时也存在显著差异的波峰,即二者有不同的"细胞分子指纹",且将该特点结合PCA-LDA的方法对胰岛α、β细胞进行区分正确率均为100%。结论:激光拉曼光谱系统可以成为快速无损区分胰岛α、β细胞的有效方法。; 韦芳岳惠芬罗瑞琼荣曦刘红; 关键词：胰岛细胞拉曼光谱

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国家自然科学基金(31160189)

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