国家自然科学基金(30571496) 作品数:16 被引量:96 H指数:7 相关作者: 范国强 翟晓巧 曹喜兵 刘飞 贾峰 更多>> 相关机构: 河南农业大学 河南省林业科学研究院 华中农业大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 国家教育部博士点基金 河南省杰出青年科学基金 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
光周期对泡桐叶片体外植株再生影响研究 被引量:15 2007年 以毛泡桐、兰考泡桐和白花泡桐叶片为外植体,在其体外器官直接再生的最适MS和1/2MS培养基上,研究了不同光周期对泡桐叶片体外植株再生的影响.结果表明,光照时间为24 h的光周期可促进泡桐叶片芽的诱导,但不同种泡桐叶片芽诱导率达到最大所需时间存在一定差异.对幼芽根诱导来说,不同光周期对3种泡桐幼芽生根的作用存在差异.当幼芽诱导根时间为7 d时,光照时间长于或短于16 h的光周期都会抑制毛泡桐和兰考泡桐幼芽根的诱导,并且这些不适宜的光周期对白花泡桐和毛泡桐幼芽生根的抑制作用大于兰考泡桐. 范国强 董占强 李峰稳 贾峰关键词:泡桐 光周期 叶片 体外植株再生 泡桐叶片总DNA甲基化水平测定方法 被引量:7 2007年 采用高效液相色仪,色谱柱为Thermo Hypersil C18BDS,以pH4.0的甲醇-戊烷磺酸钠10mmol/L-三乙胺(10-90-0.2,v/v)为流动相,流速0.5mL/min,柱温30℃,在Waters2487紫外-可见分光光度检测器273nm处,测定泡桐叶片DNA水解样中胞嘧啶和5-甲基胞嘧啶的含量,泡桐叶片DNA总甲基化水平用5-甲基胞嘧啶占DNA样品中总胞嘧啶碱基的百分数表示。 贾峰 张变莉 翟晓巧 刘飞 范国强 黄晓书关键词:高效液相色谱 DNA甲基化 胞嘧啶 白花泡桐二倍体及四倍体响应盐胁迫的蛋白质组变化的研究 被引量:7 2016年 为阐明泡桐多倍体响应盐胁迫的分子机制,本试验以白花泡桐为材料,采用同位素相对标记与绝对定量技术(isobaric tags for relative and absolute quantitation,iTRAQ)结合液相色谱与串联质谱(liquid chromatography-tandem mass spectrometry,LC-MS/MS)定量蛋白质组技术,研究盐处理前后白花泡桐四倍体和对应二倍体的蛋白质表达变化。同时,选择6个差异表达蛋白质进行实时荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。通过比对分析,共鉴定到2 851个蛋白质,有32个是倍性相关的盐应答差异蛋白质。KEGG pathway分析发现,这些差异蛋白质主要参与光合作用,信号转导,植物病原相互作用及淀粉和糖代谢等。其中,2-酮戊二酸脱氢酶E1、过氧化物酶和氢离子转运ATP合酶表达差异显著,表明这些蛋白质可能是潜在的盐应答蛋白质。QRT-PCR验证结果表明,mRNA与蛋白质表达水平不一致。 曹亚兵 赵振利 翟晓巧 赵婉 邓敏捷 董焱鹏 范国强关键词:白花泡桐 盐胁迫 蛋白质组 ITRAQ 泡桐AFLP反应体系的建立及引物筛选 被引量:9 2010年 以豫杂一号泡桐为材料,通过对影响AFLP技术体系的各主要因素的研究,建立了适于泡桐AFLP分析的技术体系.结果表明最佳酶切体系(20μL)为500 ng模板DNA,3 U的PstI和M seI,在37℃下双酶切3 h;20μL最佳连接体系中为酶切产物15μL,0.25μmol.L-1PstI接头,2.5μmol.L-1M seI接头,1μL 10×T4 Buff-er,2 U T4连接酶,22℃连接18 h;20μL最佳预扩反应体系中5μL稀释10倍的连接产物,100μmol.L-1dNTP,2 U Taq酶,250μmol.L-1PstI和M seI引物(P+AGT/M+AGT),2μL 10×PCR Buffer.20μL最佳选择性扩增反应体系中5μL稀释20倍预扩增产物,100μmol.L-1dNTP,2 U Taq酶,350μmol.L-1PstI和M seI引物(P+AGT/M+AGT),2μL 10×PCR Buffer.最后,筛选出了97对适宜于泡桐AFLP分析的引物. 曹喜兵 何佳 翟晓巧 范国强关键词:泡桐 AFLP 引物筛选 毛泡桐悬浮细胞培养及其植株再生 被引量:2 2010年 先将毛泡桐叶片在MS,WPM,KM8P和B5等液体基本培养基中进行悬浮培养,然后建立毛泡桐叶片悬浮细胞培养及其体外植株再生体系.结果表明,毛泡桐叶片愈伤组织悬浮诱导最适培养基为改良MS+0.2 mg.L-1NAA+8 mg.L-1BA;细胞悬浮培养的最佳起始密度为6.67×106个.mL-1;悬浮愈伤组织芽诱导和根诱导的最适培养基分别为MS+0.3 mg.L-1NAA+17 mg.L-1BA和1/2MS+0.1 mg.L-1NAA. 翟晓巧 胡文远 范国强关键词:悬浮细胞培养 体外植株再生 愈伤组织诱导率 芽诱导 细胞悬浮培养 2种泡桐的丛枝病器官体外植株再生系统的建立 被引量:2 2009年 以毛泡桐及白花泡桐丛枝病叶片、叶柄和茎段为外植体,建立了其体外植株再生系统.结果表明,毛泡桐丛枝病叶片、叶柄和幼嫩茎段在MS+NAA1.1 mg.L-1+6-BA8 mg.L-1,MS+NAA0.1 mg.L-1+6-BA 4mg.L-1和MS+NAA0.5 mg.L-1+6-BA 12 mg.L-1培养基上,最高芽诱导率分别为73.88%,42.11%和25.00%;而白花泡桐的丛枝病不同器官的最适培养基分别为MS+NAA 0.3 mg.L-1+6-BA 12 mg.L-1,MS+NAA0.9 mg.L-1+6-BA16 mg.L-1和MS+NAA0.7 mg.L-1+6-BA20 mg.L-1,最高芽诱导率分别为91.11%,32.78%和13.33%.此外,1/2MS+NAA0.5 mg.L-1和1/2MS+NAA0.3 mg.L-1可分别作为毛泡桐和白花泡桐丛枝病幼芽根诱导的最适培养基. 腰政懋 曹喜兵 翟晓巧 范国强关键词:泡桐 丛枝病 培养基 体外植株再生 泡桐SSR分子标记反应体系的建立 被引量:14 2009年 以健康毛泡桐二倍体为材料,通过对影响SSR扩增效果的泡桐DNA,dNTP和引物浓度,Taq酶量及退火温度等因素的筛选,建立了适宜的泡桐SSR分子标记反应体系.结果表明,泡桐的适宜SSR分子标记反应体系中,退火温度为53℃,泡桐DNA质量浓度为0.05 mg.L-1,dNTP和引物浓度分别为0.1 mmol.L-1和0.3μmol.L-1,而Taq酶量和10×Taq酶缓冲液则为0.025 U.μL-1和2.0 mmol.L-1. 曹喜兵 范国强 张延召关键词:泡桐 SSR 抗生素对豫杂一号泡桐丛枝病苗体外植株再生的影响 被引量:1 2008年 以豫杂一号泡桐丛枝病组培苗叶片、茎段为外植体,研究了利福平和土霉素对其体外植株再生系统的影响.结果表明,利福平和抗生素对泡桐丛枝病苗的芽诱导率和根诱导有抑制作用.当利福平和土霉素质量浓度分别为20 mg.L-1时,在MS+NAA 0.3 mg.L-1+6—BA 12 mg.L-1和MS+NAA 0.1 mg.L-1+6—BA 12mg.L-1的培养基上,丛枝病苗叶片最高芽诱导率分别可达67.6%和48.4%;在MS+NAA 0.2 mg.L-1+6—BA 12 mg.L-1和MS+NAA 0.3 mg.L-1+6—BA 12 mg.L-1的培养基上,茎段最高芽诱导率分别可达32.5%和50.8%. 刘飞 翟晓巧 董占强 叶芳林 李静 杨志清 范国强关键词:泡桐 抗生素 体外植株再生 组蛋白甲基化和去甲基化研究进展 被引量:4 2007年 在真核基因中,组蛋白会发生多种共价修饰,其中组蛋白的甲基化在表观遗传学中起重要作用。不同的甲基化位点产生不同的作用机理,组蛋白H3K9的甲基化与异染色质形成、基因沉默有关;组蛋白H3K4的甲基化与基因转录激活有关;组蛋白H3K36的甲基化与RNAPⅡ有一定的关系。最近首次报道了组蛋白甲基化的可逆性,并发现组蛋白去甲基酶:LSD1和含有Jmjc域的组蛋白去甲基酶。这些去甲基酶可使不同程度甲基化的组蛋白H3K4、K9、K36去甲基化,同时与基因转录存在联系。 刘飞 靳飞 翟晓巧 贾峰关键词:组蛋白甲基化 组蛋白甲基转移酶 适用于AFLP分析的泡桐DNA提取方法研究 被引量:17 2009年 分别采用3种方法提取了豫杂一号泡桐组培苗叶片DNA,并对其得率和质量进行了检测.结果表明,DNAkit,CTAB-Ⅰ和CTAB-Ⅱ法提取DNA的得率分别为0.250,0.284,0.312 mg.g-1;CTAB法提取的DNA片段大于DNAkit法;利用CTAB-Ⅱ法得到的DNA可被EcoRI,MspI和HpaⅡ完全酶切,该DNA经AFLP-PCR扩增电泳后,产物带型清晰,稳定,重复性好.CTAB-II法为泡桐DNA提取的最佳方法. 张延召 曹喜兵 翟晓巧 范国强关键词:泡桐 DNA提取 限制性酶切 AFLP