国家教育部博士点基金(20120071110077)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：李雯李华伟陈岩赖垂金于慧前更多>>
- 相关机构：复旦大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金长江学者和创新团队发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 不同基因转染方法对小鼠内耳毛细胞转染效率的比较被引量：3
- 2015年
- 目的对比不同的基因转染方法对小鼠内耳毛细胞的转染效率,以探寻简便、高效转染耳蜗毛细胞的方法。方法分离111只新生昆明小鼠(P2)耳蜗螺旋韧带及感染上皮,分别采用电穿孔法介导质粒载体(pGPHI/GFP/Neo)、腺病毒载体(Ad5/CMV/GFP)和慢病毒载体(LV/CMV/GFP)3种方法转染小鼠内耳毛细胞,于转染48小时后在荧光显微镜下观察并比较三种方法基因转染后小鼠内耳毛细胞绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)的表达。结果电穿孔法介导质粒载体转染组和慢病毒载体转染组GFP阳性细胞极少;腺病毒载体转染组效率最高,耳蜗中回外毛细胞GFP阳性率为90.0%±4.1%,内毛细胞GFP阳性率为5%±0.4%。结论腺病毒载体能更有效地将外源基因导入耳蜗毛细胞内表达,是基因转染耳蜗毛细胞的理想载体。
- 陈岩赖垂金李雯李华伟
- 关键词：腺病毒载体慢病毒载体电穿孔法基因转染内耳毛细胞
- 斑马鱼侧线神经丘毛细胞发育的研究被引量：1
- 2014年
- 目的 研究斑马鱼后部侧线系统神经丘细胞早期迁移及增殖分化过程。方法 选取不同发育阶段的野生型斑马鱼胚胎,采用免疫组织化学染色和原位杂交方法,观察斑马鱼后部侧线原基的迁徙以及神经丘的沉积过程,Brd U 标记原基增殖细胞,观察原基细胞团的增殖情况;选择不同发育时期的转基因斑马鱼（Brn3c ：mGFP ）胚胎,统计绿色荧光蛋白（GFP ）阳性表达的神经丘毛细胞数目;采用活细胞染料F M1 43FX标记神经丘中的功能性毛细胞并进行统计计数,Brd U 标记神经丘增殖细胞,观察神经丘细胞的增殖情况。结果 受精后20 小时的斑马鱼侧线器基板沿水平肌隔开始向后迁移并形成后部侧线神经丘,迁徙速度约为1 .7 肌节/小时;受精后48 小时,初级后部侧线系统基本发育完全,包括躯干部的5～6 组神经丘细胞团,尾部的2～3 组神经丘细胞团;受精后3 5、7、天时的斑马鱼神经丘毛细胞数量分别为5 .68±1 .46、10 .10±0 .99、12 .45±1 .32 个;F M1 43FX阳性毛细胞数量分别为3 .68±1 .11、8 .18±1 .86、10 .22±1 .24 个。结论 受精后3～7 天是斑马鱼侧线神经丘毛细胞发育的活跃时期。
- 李雯何英姿孙珊于慧前李华伟
- 关键词：毛细胞发育
