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大鼠皮质神经元的体外培养和纯化被引量：9: 2002年; 目的　探讨大鼠皮质神经元分离纯化的有效方法。　方法　取胎鼠大脑皮质组织 ,分别在不同的培养液中进行原代培养 ,利用相差显微镜对培养的细胞进行动态观察 ;并以免疫细胞化学技术对神经元进行染色。　结果　在相差显微镜下可见加用 N2 添加剂和胎牛血清培养的神经元生长良好 ,胞体形态多样 ,突起数目多 ,长度长 ,与邻近神经元的胞体或突起形成接触 ,而胶质细胞则大量死亡 ,神经元纯化率达 94 %以上 ;未加用 N2 添加剂培养的神经元胶质细胞大量存在 ,神经元纯化率达 5 0 %左右。　结论　 N2; 陈丽敏陈晓春林挺岩朱元贵; 关键词：神经元细胞培养大脑皮质免疫细胞化学

CDK4-pRB-E2F1通路是Aβ_(1-40)诱导皮层神经元凋亡的可能途径被引量：5: 2003年; 目的 :探讨 β淀粉样肽1-40 (beta -amyloidpeptide1-40 ,Aβ1-40 )诱导大鼠皮层神经元凋亡的可能分子机制。方法 :以 4 0mg/L的Aβ1-40 诱导离体培养的大鼠皮层神经元凋亡 ,流式细胞仪及免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶 4 (CDK4 )、磷酸化的视网膜神经胶质瘤蛋白 (pRB)水平 ;RT -PCR技术检测E2F1mRNA表达水平 ;荧光分光光度计检测半胱氨酸基天冬氨酸特异性蛋白酶 3(caspase - 3)活力 ;观察在Aβ1-40 诱导凋亡过程中是否伴随上述指标的变化。结果 :①CDK4、磷酸化pRB水平在Aβ1-40 作用后 2 - 4h显著升高 ;②Aβ1-40 孵育 3h后皮层神经元E2F1基因表达上调 ;③Aβ1-40 作用 12 - 2 4h后caspase- 3活力明显升高。结论 :CDK4 -pRB -E2F1信号转导通路可能在Aβ1-40 诱导的大鼠皮层神经元凋亡中起主要作用。; 陈丽敏陈晓春林挺岩朱元贵赵朝晖周宜灿; 关键词：神经元

β淀粉样蛋白_(1-40)对大鼠皮层神经元凋亡的诱导作用被引量：6: 2001年; 目的　观察 Aβ1 - 40 对大鼠皮层神经元的毒性作用。　方法　原代培养大鼠皮层神经元 ,分别采用AO- EB染色、TU NEL染色和 DNA凝胶电泳 ,观察不同终浓度的 Aβ1 - 40 对培养的神经元凋亡的诱导作用。　结果　在荧光显微镜下可见 ,经 AO- EB染色后凋亡的神经元胞核染色质着绿色荧光呈固缩状、圆珠状或新月状 ,Aβ1 - 40 三个浓度 (2 0 ,4 0和 80μg/ml)作用不同时间的凋亡率依次为 :2 4 h 2 0 .17%± 0 .76 % ,2 5 .17%± 3.82 % ,2 8.33±2 .84 % ;4 8h 2 2 .33%± 1.4 4 % ,38.83%± 1.2 6 % ,36 .6 7%± 1.0 4 % ;72 h 17.5 0 %± 1.80 % ,2 6 .5 0 %± 1.32 % ,30 .6 7%± 1.2 6 %。 TUNEL染色结果显示胞核内散在分布断裂的 DNA片段 ;琼脂糖凝胶电泳呈现典型的“梯状”带等细胞凋亡的特征性改变。　结论　 Aβ1 - 40 可诱导大鼠皮层神经元凋亡 ,以 4 0μg/ml作用 4; 陈丽敏陈晓春朱元贵; 关键词：淀粉样Β蛋白脱噬作用神经元

β淀粉样肽_(1-40)通过激活caspase-3诱导大鼠皮层神经元凋亡被引量：3: 2003年; 目的　探讨半胱氨酸蛋白酶caspase 3在 β淀粉样肽1 4 0 (β AP1 4 0 )诱导大鼠皮层神经元凋亡中的可能作用。　方法　用 β AP1 4 0 诱导神经元凋亡 ,同时检测caspase 3活力和caspase 3活性片段及caspase 3mRNA的表达水平。　结果　 4 0mg·L- 1 的凝聚态 β AP1 4 0 诱导大鼠皮层神经元凋亡过程中 ,caspase 3活力和caspase 3mRNA的表达水平均有明显增高 (P <0 0 1) ;特异性的caspase 3抑制剂Ac DEVD CHO对caspase 3的激活和皮层神经元细胞凋亡均有明显的阻断作用。　结论　caspase 3可能是 β AP1 4 0; 陈丽敏陈晓春朱元贵周宜灿; 关键词：CASPASE-3 皮层神经元凋亡

人参皂甙Rg1对抗Aβ_(1-40)诱导大鼠皮层神经元凋亡的实验研究被引量：1: 2003年; 目的:观察人参皂甙 Rg1对 Aβ_(1-40)诱导大鼠皮层神经元凋亡的影响以及 Rg1对 Caspase-3活性的影响。方法:用吖啶橙-溴化乙锭(AO-EB)染色、TUNEL 染色、DNA 琼脂糖凝胶电泳方法观察神经元凋亡形态学和生态改变;荧光分光光度计法检测凋亡效应分子 Caspase-3活力的变化;RT-PCR 法检测 Cas-pase-3 mRNA 的表达水平。结果:人参皂甙 Rg1预处理可显著降低 Aβ_(1-40)诱导大鼠皮层神经元的凋亡率,凋亡细胞特有的 DNA 梯形条带消失,Caspase-3活力下降,Caspase-3 mRNA 表达下调。结论:人参皂甙 Rg1可通过抑制 Caspase-3的激活,使 Aβ_(1-40)诱导的大鼠皮层神经元减少凋亡。; 陈丽敏陈晓春叶钦勇朱元贵林明浠; 关键词：人参皂甙凋亡皮层神经元

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福建省自然科学基金(C0110016)