国家科技支撑计划(2008BAI54B01)
- 作品数：3 被引量：11H指数：2
- 相关作者：岳秉飞王吉卫礼贺争鸣艾文超更多>>
- 相关机构：中国食品药品检定研究院中国药品生物制品检定所更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划国家科技重大专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法的建立被引量：7
- 2012年
- 目的建立呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法,应用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。方法根据已发表的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)M1基因序列,设计合成引物。提取Reo3细胞毒RNA,以其为模板,进行PCR扩增。优化反应条件,进行特异性、敏感性、重复性试验。结果建立的Reo3RT-PCR检测方法特异、敏感、稳定。以Reo3 RNA逆转录产物为模板,所能检测RNA最小模板浓度为0.42pg/μL,可检测病毒最小滴度为10-9/mL。结论建立的呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)RT-PCR检测方法可用于实验动物及人用动物源性材料及生物制品外源Reo3的检测。
- 王吉卫礼贺争鸣岳秉飞
- 关键词：反转录聚合酶链式反应实验动物
- 呼肠孤病毒Ⅲ型免疫荧光检测方法的建立及初步应用被引量：4
- 2011年
- 目的 建立呼肠孤病毒Ⅲ型(Reo3)免疫荧光(IFA)检测方法,应用于人用动物源性生物材料及生物制品外源Reo3的检测。方法滴定病毒TCID50,筛选Reo3敏感细胞,依据国标IFA法制备抗原片,方阵法滴定免疫荧光素最佳工作浓度。并进行特异性、敏感性和稳定性试验。结果选取BSC-1细胞作为Reo3敏感细胞,病毒感染力滴度(TCID50)为10-5.8/mL;免疫荧光素最佳工作浓度为1∶100;与小鼠鼠痘(Ect)病毒、小鼠肝炎(MHV)病毒均无交叉反应;稳定性和敏感性试验显示,不同时间IFA检测灵敏度均为1∶1280;可检测到的病毒滴度最低为10-4.1/mL。结论建立的IFA法敏感性、特异性强,稳定性好,可用于人用动物源性生物材料及生物制品Reo3的检测。
- 王吉卫礼岳秉飞贺争鸣
- 关键词：免疫荧光试验
